肝纤维化病理过程中ZEB1和ZEB2的动态表达变化及意义 被引量：6

1

作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1639-1643,共5页

目的:观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组,每组各8只,模型组按3 mL... 目的:观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组,每组各8只,模型组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射60%CCl4,每隔3 d注射1次,处死大鼠后测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变;免疫组织化学法检测肝组织中ZEB1、ZEB2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;real-time RT-PCR方法检测肝脏组织中ZEB1及ZEB2 mRNA的表达变化。结果:模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显;随着肝脏损伤逐渐加重,纤维化程度加深,E-cadherin蛋白的表达显著降低,α-SMA蛋白表达显著升高,ZEB1和ZEB2蛋白和mRNA表达量也逐渐增加,8周模型组肝组织中ZEB1和ZEB2蛋白(46.42±14.36和57.71±13.32)与mRNA(189.00±47.39和277.28±48.55)表达较正常组显著增加(P<0.01)。结论:ZEB1和ZEB2蛋白及mRNA表达量随纤维化程度的加重而增加,提示EMT可能通过ZEB1和ZEB2参与肝纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 肝纤维化 慢性肝损伤 锌指E盒结合同源盒蛋白

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阿尔茨海默病发病机制中突触病理及突触囊泡内吞蛋白的改变 被引量：8

2

作者 曹颖 官志忠 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期92-94,共3页

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是常见于老年人的中枢神经系统退行性变疾病，以进行性认知功能障碍为主要临床表现。由β淀粉样肽（β-amyloid peptide，Aβ）沉积形成的老年斑（senile plaques，SP）、高度磷酸化Tau蛋白聚... 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是常见于老年人的中枢神经系统退行性变疾病，以进行性认知功能障碍为主要临床表现。由β淀粉样肽（β-amyloid peptide，Aβ）沉积形成的老年斑（senile plaques，SP）、高度磷酸化Tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结（neurofibrllary tangles，NFTs）及神经元丢失构成AD脑组织中典型的神经病理学改变。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 认知障碍 突触囊泡蛋白 突触 神经原纤维缠结

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肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化 被引量：12

3

作者 杜锡潮 韩冰 +2 位作者 谢汝佳 邹河 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期906-912,共7页

目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4... 目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4周组、正常8周组、肝纤维化4周组和肝纤维化8周组,肝纤维化组大鼠皮下注射40%CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周和8周处死大鼠,观察肝组织病理改变,Western blotting检测肝脏活化转录因子6(ATF6)蛋白,免疫组化、Western blotting和real-time PCR分别检测肝脏CHOP和TRB3蛋白和mRNA表达变化,TUNEL法检测肝脏细胞凋亡。结果:肝纤维化组大鼠肝脏可见假小叶形成,p90ATF6蛋白表达量较正常组明显减少(P<0.01),p50ATF6蛋白表达量较正常组明显增加(P<0.01),肝细胞胞浆CHOP和TRB3蛋白及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01),细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01)。结论:内质网应激相关分子CHOP和TRB3在CCl4致大鼠肝纤维化过程中蛋白及mRNA表达水平明显增加,其变化趋势与大鼠肝细胞凋亡率一致,提示内质网应激可能通过CHOP和TRB3促进肝细胞凋亡,参与肝纤维化发生发展。 展开更多

关键词 大鼠 肝纤维化 内质网应激 细胞凋亡 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 Tribbles同源蛋白3

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肝纤维化大鼠肝细胞内质网形态及GRP78表达的研究 被引量：11

4

作者 温静静 谢汝佳 +3 位作者 韩冰 杨婷 钱程 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2210-2213,共4页

目的:观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中内质网形态及内质网应激标志性蛋白———葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化,探讨内质网应激在肝纤维化发病机制中可能的作用。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型,分别在4... 目的:观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中内质网形态及内质网应激标志性蛋白———葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化,探讨内质网应激在肝纤维化发病机制中可能的作用。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周及8周处死大鼠测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变和肝细胞内质网形态,免疫组化和real-time PCR分别检测肝组织GRP78蛋白及mRNA表达变化。结果:肝纤维化组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),肝纤维化明显,电镜下见肝细胞内质网扩张,数量明显减少;肝细胞胞浆中GRP78蛋白表达量及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01)。结论:在CCl4诱导的肝纤维化发生过程中肝细胞内质网形态有明显损伤性变化,内质网应激蛋白GRP78蛋白及基因表达水平明显增加,提示内质网应激参与肝纤维化发生发展。 展开更多

关键词 大鼠 肝纤维化 葡萄糖调节蛋白78 内质网应激

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胃癌中SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达及意义 被引量：40

5

作者 陈友权 于燕妮 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期135-139,143,共6页

目的研究趋化因子SDF-1及其受体CXCR4以及MMP-2和MMP-9在胃癌中的表达,探讨SDF-1对MMP-2和MMP-9表达的影响。方法应用免疫组化EnVision两步法检测109例胃癌组织中SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达。结果 (1)SDF-1、CXCR4、MMP-2、MMP-... 目的研究趋化因子SDF-1及其受体CXCR4以及MMP-2和MMP-9在胃癌中的表达,探讨SDF-1对MMP-2和MMP-9表达的影响。方法应用免疫组化EnVision两步法检测109例胃癌组织中SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达。结果 (1)SDF-1、CXCR4、MMP-2、MMP-9在胃癌组的表达阳性率分别为88.1%、56.9%、80.7%和83.4%,高于切缘对照组的47.8%、30.4%、43.4%和47.8%,差异有显著性(P<0.05);(2)SDF-1和CXCR4的表达在淋巴结转移组高于无转移组(P<0.05),SDF-1、MMP-9表达程度与淋巴结转移、组织学分级、浆膜侵犯、临床分期指标呈正相关(P<0.05);MMP-2、CXCR4表达程度与淋巴结转移、浆膜侵犯、临床分期呈正相关(P<0.05);(3)SDF-1与其受体CXCR4的表达及与MMP-2、MMP-9均呈正相关(P<0.05)。结论 (1)SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达水平与胃癌的发生、侵袭及淋巴结转移密切相关,可作为预测胃癌淋巴结转移及预后的指标;(2)SDF-1/CXCR4轴可通过加强肿瘤细胞MMP-2和MMP-9分泌的途径促进肿瘤的浸润和转移,提示SDF-1可能是药物靶向治疗的重要靶点。 展开更多

关键词 胃肿瘤 SDF-1 CXCR4 MMP-2 MMP-9 肿瘤转移 免疫组织化学

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血栓素A_2和前列腺环素与自发性高血压大鼠高血压发展的关系 被引量：18

6

作者 杨国雄 张国忠 李保罗 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期237-240,共4页

本文观察了SHR和WKY及不同年龄SHR动脉血浆中TXA_2和PGI_2的稳定代谢产物TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的浓度及其比值变化。结果表明,SHR血浆中的TXB_2浓度显著高于WKY,对照组与实验组相比(207.1±59.8比1217.9±298.5P8/ml,P<0.... 本文观察了SHR和WKY及不同年龄SHR动脉血浆中TXA_2和PGI_2的稳定代谢产物TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的浓度及其比值变化。结果表明,SHR血浆中的TXB_2浓度显著高于WKY,对照组与实验组相比(207.1±59.8比1217.9±298.5P8/ml,P<0.001),而血浆中6-Keto-PGF_(1α)浓度,除高年龄组SHR外,其他各组均无明显改变;SHR各组血浆中6-Keto/TXB_2比值均显著低于WKY组,不同年龄组SHR血浆中TXB_2浓度相比,高年龄组明显高于低年龄组(2184.5±273.1比1290.6±284.4pg/ml,P<0.001),高年龄组血浆中6-Keto-PGF_(1α)浓度虽有升高,但6-Keto/TXB_2比值仍明显低于对照组(0.21±0.12比1.48±0.78,P<0.001)。这些变化可能与SHR高血压的持续发展有关。 展开更多

关键词 高血压 血栓素A2 前列腺环素

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miR-200s在中药丹芍化纤干预大鼠肝纤维化过程中的表达变化 被引量：5

7

作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1950-1954,共5页

目的:观察肝组织中微小RNA-200家族成员(miR-200s)在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化并探讨其机制。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,干预组在给予CCl4造模同时给予丹芍化纤胶囊(0.5 g/... 目的:观察肝组织中微小RNA-200家族成员(miR-200s)在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化并探讨其机制。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,干预组在给予CCl4造模同时给予丹芍化纤胶囊(0.5 g/kg)灌胃,分别在4周和8周处死大鼠,测定肝脏指数和血清谷丙/谷草转氨酶(ALT和AST)活性,观察肝组织病理改变,real-time PCR方法分别检测肝组织miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达变化。结果:模型组及干预4周组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显,并且肝组织中miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达较正常组显著增加(P<0.05)。丹芍化纤胶囊干预8周组肝功能生化指标及病理学改变与对照组无明显差异,且肝组织中miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达均低于8周模型组。结论:miR-200s在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化,提示其参与肝纤维化的发生发展并可能是潜在的中药作用靶点。 展开更多

关键词 肝纤维化 丹芍化纤胶囊 微小RNA200

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钙中性蛋白酶2及Bax在肝纤维化大鼠肝组织中的表达变化及意义 被引量：4

8

作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 温静静 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1603-1608,共6页

目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/k... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;对照组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用TUNEL法检测肝组织中肝细胞凋亡情况;real-time PCR检测肝组织中calpain 2及bax mRNA的表达变化。免疫组织化学法及Western blotting检测肝组织中calpain 2及Bax蛋白的表达情况。结果:Real-time PCR检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中calpain2及bax mRNA表达较相应的正常对照组显著增加。免疫组化及Western blotting检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain 2蛋白的表达与正常4周组比较无显著差异;随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain 2的表达显著增加;而肝组织中Bax的表达从肝纤维化4周时就显著增加,肝纤维化8周时达到高峰。此外,通过TUNEL法检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加。结论:Calpain 2与Bax可能参与了肝纤维化的发生发展过程。 展开更多

关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 Bcl-2相关X蛋白

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胃腺癌中p57^kip2和LIMK-1的表达及意义 被引量：3

9

作者 贺晓燕 于燕妮 王龙 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期756-760,共5页

目的探讨p57kip2mRNA、LIMK-1mRNA及其蛋白在胃腺癌组织中的表达,了解其与肿瘤组织分化程度及临床病理特征的关系。方法采用显色原位杂交(chromogenic in situ hybridizations,CISH)技术和免疫组化EnVision法检测40例胃腺癌及癌旁正常... 目的探讨p57kip2mRNA、LIMK-1mRNA及其蛋白在胃腺癌组织中的表达,了解其与肿瘤组织分化程度及临床病理特征的关系。方法采用显色原位杂交(chromogenic in situ hybridizations,CISH)技术和免疫组化EnVision法检测40例胃腺癌及癌旁正常胃黏膜组织中p57kip2mRNA、LIMK-1mRNA及其蛋白的表达。结果 (1)正常胃黏膜组织中p57kip2高表达,在胃腺癌组织中低表达,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)p57kip2的表达与胃腺癌组织分化程度呈负相关(P<0.05);(3)p57kip2、LIMK-1蛋白表达与胃腺癌组织中微脉管计数微淋巴管密度(lymphaticmicrovessel density,LVD)、微血管密度(microvesseldensi-ty,MVD)呈正相关(P<0.05)。结论胃腺癌存在p57kip2基因组印记缺失,致p57kip2mRNA及其蛋白表达减少或缺失,并与胃腺癌组织分化程度有关,LIMK-1蛋白高表达与肿瘤的浸润转移及微脉管的生成有关,检测胃癌活检标本中LIMK-1蛋白的表达,对预测胃腺癌预后及浸润转移有辅助诊断意义。 展开更多

关键词 胃肿瘤 腺癌 P57KIP2 LIMK-1 肿瘤转移 免疫组织化学 原位杂交

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早期肺鳞癌患者与正常人血清表达差异蛋白筛选 被引量：1

10

作者 韩冰 吴倩 +2 位作者 谢汝佳 杨婷 杨勤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期542-546,共5页

目的:应用蛋白质组学方法来比较早期肺鳞癌患者和健康人血清蛋白质的差异,筛选与肺鳞癌发生发展密切相关的蛋白质。方法:以6例Ⅰ期肺鳞癌患者血清和健康正常人血清为研究对象,运用比较蛋白质组学方法,用双向凝胶电泳(2-Pi-mentional ele... 目的:应用蛋白质组学方法来比较早期肺鳞癌患者和健康人血清蛋白质的差异,筛选与肺鳞癌发生发展密切相关的蛋白质。方法:以6例Ⅰ期肺鳞癌患者血清和健康正常人血清为研究对象,运用比较蛋白质组学方法,用双向凝胶电泳(2-Pi-mentional electrophoresis,2-DE)分离肺鳞癌患者血清和正常人血清的总蛋白质,银染显色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time offlightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点。结果:肺鳞癌患者血清和健康正常人血清的平均蛋白质点数分别为939±40和962±27,匹配率达89.2%和87.1%;找到表达量差异3倍以上蛋白质点25个;对25个差异蛋白质点进行分析,得到了16张肽质量指纹图谱,最终鉴定出8个差异蛋白质。其中,有3个蛋白质只在早期肺鳞癌患者血清中表达,1个蛋白质在早期肺鳞癌患者血清中表达显著上调。另4个蛋白质在早期肺鳞癌患者血清中表达显著下调或缺失。结论:通过对早期肺鳞癌患者和健康正常人血清的蛋白质表达谱进行比较,鉴定出8个与早期肺鳞癌可能相关的蛋白质,为进一步筛选肺鳞癌早期诊断、治疗和预后评估的分子生物学标志物奠定了基础。 展开更多

关键词 早期肺鳞癌 双向凝胶电泳 血清蛋白质组学 分子标志物

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用RhD阳性红细胞从含抗D抗体的IgG中提纯抗D抗体 被引量：1

11

作者 石明隽 谢竞 +3 位作者 钟江 桂华珍 郭兵 张国忠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1012-1014,共3页

目的:研究从含抗-D抗体的IgG中纯化抗D抗体的方法。方法:抗D含量为0.814μg/ml的健康人血浆,经柱层析法分离获得含抗D的IgG后,用遗传表现型CCDee的RhD阳性"O"型红细胞经亲和层析法从IgG中纯化抗-D抗体。检测相关指标。结果:... 目的:研究从含抗-D抗体的IgG中纯化抗D抗体的方法。方法:抗D含量为0.814μg/ml的健康人血浆,经柱层析法分离获得含抗D的IgG后,用遗传表现型CCDee的RhD阳性"O"型红细胞经亲和层析法从IgG中纯化抗-D抗体。检测相关指标。结果:经过亲和层析法纯化后去除了近90%的非目的IgG,使产物可以进一步浓缩以提高单位体积制剂中抗-D抗体浓度。所得制剂经检测各项指标均符合中国生物制品规程的要求。结论:本方法可从含抗D的IgG制剂中进一步纯化抗D抗体,为血浆综合利用提供参考。 展开更多

关键词 抗-D抗体 免疫球蛋白 红细胞 柱层析法 亲和层析法

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CBM复合物对MALT淋巴瘤和结外弥漫大B细胞淋巴瘤发展和预后的影响 被引量：1

12

作者 王松 杨文秀 +2 位作者 裴媛媛 郭宏伟 方艺 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第22期3779-3782,共4页

目的:了解黏膜相关淋巴瘤异位基因1(MALT1)、B细胞淋巴瘤10(BCL10)、含caspase募集结构域的膜相关鸟氨酸激酶1(CARMA1)在结外弥漫大B细胞淋巴瘤(Ex-DLBCL)及黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)中的表达及其对两种淋巴... 目的:了解黏膜相关淋巴瘤异位基因1(MALT1)、B细胞淋巴瘤10(BCL10)、含caspase募集结构域的膜相关鸟氨酸激酶1(CARMA1)在结外弥漫大B细胞淋巴瘤(Ex-DLBCL)及黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)中的表达及其对两种淋巴瘤预后的影响。方法:常规HE和IHC染色筛选病例78例,检查CARMA1、BCL10和MALT1蛋白的表达,收集临床病理资料和随访,并进行统计学分析。结果:两种淋巴瘤中三种蛋白表达阳性率均明显高于淋巴结反应性增生(均P=0.001),Ex-DLBCL中BCL10表达高于MALT淋巴瘤(P=0.027);与CARMA1、BCL10阴性组比较,相应的阳性组临床分期较晚(P依次为0.033、0.011)、Ki67≥30%的病例增多(均P=0.001)。三种蛋白不同的表达组合与淋巴瘤类型、分期、淋巴结累及率和Ki67表达有相关关系(P分别为0.022、0.023、0.020、0.008)。随访分析:三种蛋白不同的表达组合病例之间生存状况有明显差异,以全表达病例生存状况最差(P=0.015)。结论:MALT淋巴瘤和Ex-DLBCL都高表达CARMA1、MALT1和BCL10;2.CARMA1、MALT1和BCL10表达对Ex-DLBCL及MALT淋巴瘤的临床过程和预后有一定影响,三种蛋白同时表达可能是两种淋巴瘤独立的不良预后相关因子。 展开更多

关键词 淋巴瘤 CARMA1 MALT1 BCL10 预后

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Calpain2及其抑制剂在肝纤维化细胞凋亡中的机制 被引量：1

13

作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 邹河 杨勤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期960-963,共4页

目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain2)及其抑制剂calpastatin在肝纤维化过程中的表达变化及他们在肝细胞凋亡中的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组4、8周组和肝纤维化4、8周组,每组各10只。肝纤维化组按0.3 ml/100 g体质量皮... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain2)及其抑制剂calpastatin在肝纤维化过程中的表达变化及他们在肝细胞凋亡中的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组4、8周组和肝纤维化4、8周组,每组各10只。肝纤维化组按0.3 ml/100 g体质量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;正常组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用原位末端转移酶标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)法检测肝组织中肝细胞凋亡的情况;免疫组织化学法及Western blot检测肝组织中calpain2、calpastatin及活性caspase3的表达情况;realtime PCR检测肝组织中calpain2及calpastatin mRNA的表达变化。结果:免疫组化及Western blot检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain2及calpastatin蛋白的表达与正常4周组比较差异无统计学意义(P>0.05);随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain2的表达明显增加,而calpastatin的表达明显减少;real-time PCR检测发现肝纤维化4、8周组大鼠肝组织中calpain2 mRNA表达较相应的正常对照组明显增加(P<0.01),而calpastatin mRNA的表达在肝纤维化8周组明显减少(P<0.01);此外,通过免疫组化及Western blot发现肝组织中活性caspase3的表达在肝纤维化4周时已明显增加,肝纤维化8周时达高峰;同时TUNEL法检测发现肝纤维化大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加(P<0.01)。结论:calpain2与calpastatin在蛋白及基因水平的表达变化,提示他们可能参与了肝纤维化的发生发展过程,其致肝纤维化的机制可能与促进肝细胞的凋亡有关。 展开更多

关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 CALPASTATIN

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转基因小鼠脑组织中突触素和发动蛋白Ⅰ及衔接蛋白180表达的变化 被引量：2

14

作者 曹颖 官志忠 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期358-361,共4页

目的探讨瑞典型淀粉样前体蛋白突变基因转基因小鼠脑组织中突触素(synaptophysin)、发动蛋白Ⅰ(dynamin Ⅰ)及衔接蛋白180(AP180)表达变化。方法选择6只瑞典型淀粉样前体蛋白突变基因转基因小鼠为转基因组,另选5只小鼠为对照组。采用免... 目的探讨瑞典型淀粉样前体蛋白突变基因转基因小鼠脑组织中突触素(synaptophysin)、发动蛋白Ⅰ(dynamin Ⅰ)及衔接蛋白180(AP180)表达变化。方法选择6只瑞典型淀粉样前体蛋白突变基因转基因小鼠为转基因组,另选5只小鼠为对照组。采用免疫组织化学染色法检测小鼠海马及颞叶皮质synaptophysin、dynamin Ⅰ及AP180的表达,图像分析半定量;免疫组织化学双染法观察转基因小鼠脑组织中synaptophysin与β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)在老年斑表达部位的关系。结果与对照组比较,转基因组小鼠脑组织齿状回分子层、海马CA1、CA3及内嗅区皮质各层synaptophysin平均灰度值明显增高(P<0.05,P<0.01);齿状回颗粒细胞、海马CA1锥体细胞及内嗅区皮质各层dynamin Ⅰ平均灰度值明显增高(P<0.05,P<0.01);齿状回分子层、海马CA4、CA1、内嗅区皮质各层及颞叶皮质Ⅱ～Ⅴ层AP180平均灰度值明显增高(P<0.05,P<0.01)。免疫组织化学双染显示转基因组小鼠老年斑内有synaptophysin和Aβ_(1-42)共同存在。结论转基因小鼠脑组织中synaptophysin、dynamin Ⅰ及AP180表达降低,提示出现不同程度突触丧失及突触囊泡回收功能缺陷,可能是该小鼠认知功能障碍的原因之一。 展开更多

关键词 淀粉样Β蛋白前体 小鼠 转基因 突触囊泡蛋白 动力蛋白质Ⅰ 认知障碍

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His-TAT-mCherry融合蛋白的跨膜转导及其在细胞内的定位 被引量：1

15

作者 陈茜 宋方丽 +2 位作者 刘亚伟 杨勤 姜勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-150,共4页

目的构建在原核中表达的人类免疫缺陷病毒转录活化因子(HIV-TAT)红色荧光蛋白(mCherry)融合表达载体,荧光显微镜观察HIV-TAT的跨膜转导及其在细胞内的定位,为进一步研究HIV-TAT的跨膜转导机制及其定位提供重要工具。方法采用基因重组技... 目的构建在原核中表达的人类免疫缺陷病毒转录活化因子(HIV-TAT)红色荧光蛋白(mCherry)融合表达载体,荧光显微镜观察HIV-TAT的跨膜转导及其在细胞内的定位,为进一步研究HIV-TAT的跨膜转导机制及其定位提供重要工具。方法采用基因重组技术构建含HIV-TAT以及红色荧光蛋白的质粒pET14b-His-TAT-mCherry,对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,将该质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,使其在体外表达,并进行纯化、除菌。将纯化的His-TAT-mCherry融合蛋白与Hela细胞共同孵育,荧光显微镜下观察。结果PCR、双酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;表达纯化出了高纯度的His-TAT-mCher-ry融合蛋白。荧光显微镜下见Hela细胞中红色荧光蛋白主要分布在胞质中,细胞膜上也有一定分布。结论成功构建了pET14b-His-TAT-mCherry原核表达质粒,纯化了高纯度的His-TAT-mCherry融合蛋白,该蛋白在哺乳动物细胞中有跨膜转导活性,为研究HIV-TAT的跨膜转导机制提供了一个重要的工具。 展开更多

关键词 基因产物 tat 红色荧光蛋白 跨膜转导

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一次饲养兔群中绿脓杆菌性肺炎流行的初步判定 被引量：1

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作者 于燕妮 姜淑芬 +1 位作者 孙善发 韦树丰 《中国实验动物学杂志》 1994年第4期229-231,共3页

一次饲养兔群中绿脓杆菌性肺炎流行的初步判定于燕妮，姜淑芬（贵阳医学院病理教研室）孙善发贵阳医学院实验动物中心韦树丰贵阳医学院附院细菌室绿脓假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）是人畜共患的条件致病菌，... 一次饲养兔群中绿脓杆菌性肺炎流行的初步判定于燕妮，姜淑芬（贵阳医学院病理教研室）孙善发贵阳医学院实验动物中心韦树丰贵阳医学院附院细菌室绿脓假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）是人畜共患的条件致病菌，又称绿脓杆菌。１９９１年６～７月间... 展开更多

关键词 饲养 兔群 绿脓杆菌性肺炎 流行病学 症状

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海洛因对大鼠尾核头部单位自发放电的影响

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作者 潘贵书 徐国强 +2 位作者 李淑芳 刘家骝 孙善发 《贵州畜牧兽医》 1998年第3期1-3,共3页

用玻璃微电极技术,分别记录海洛因成瘾大鼠(实验组)和正常组(对照组)大鼠尾核头部神经元单位自发放电,结果发现,尾核头部单位自发放电的频率明显不同,实验组以低频放电为主,而对照组则以中频放电为主,组间的差异显著(P<0.01),提示,... 用玻璃微电极技术,分别记录海洛因成瘾大鼠(实验组)和正常组(对照组)大鼠尾核头部神经元单位自发放电,结果发现,尾核头部单位自发放电的频率明显不同,实验组以低频放电为主,而对照组则以中频放电为主,组间的差异显著(P<0.01),提示,海洛因对尾核头部神经元的活动有影响。 展开更多

关键词 海洛因 成瘾大鼠 尾核 单位放电 大鼠

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大脑中动脉阻塞后脑组织病变过程及MDA含量变化 被引量：8

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作者 刘家骝 杨桂萍 +4 位作者 贺晓燕 何燕 查力 曹序茂 邓传静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期546-548,共3页

在大鼠中用热凝造成大脑中动脉阻塞而致脑局灶性缺血。电镜观察发现,在缺血2min后,神经细胞粗面内质网与线粒体即出现改变。光镜检查,缺氧10min后才出现神经细胞缺血改变;梗死灶周边微血管体积密度在缺血24h后即明显升高。肉眼检查,于缺... 在大鼠中用热凝造成大脑中动脉阻塞而致脑局灶性缺血。电镜观察发现,在缺血2min后,神经细胞粗面内质网与线粒体即出现改变。光镜检查,缺氧10min后才出现神经细胞缺血改变;梗死灶周边微血管体积密度在缺血24h后即明显升高。肉眼检查,于缺血3h后可见梗死灶。在缺血2min后,脑组织内丙二醛(MOA)即升高,说明在缺血缺氧的早期,脂质过氧化作用加强。表明自由基在缺血性脑损伤早期即起重要作用。 展开更多

关键词 脑缺血 丙二醛 大鼠

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乙酰胆碱和谷氨酸对碘缺乏大鼠海马单位放电活动的影响 被引量：3

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作者 蔡春 庄宗杰 易必达 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期681-684,共4页

目的：探讨地方性克汀病智力低下与神经元电活动及神经递质的关系。方法：采用多管玻璃微电极微电泳技术，观察乙酰胆碱和谷氨酸对碘缺乏子代大鼠海马神经元单位自发放电活动的影响。结果：泳入乙酰胆碱和谷氨酸后，对照组海马神经元单... 目的：探讨地方性克汀病智力低下与神经元电活动及神经递质的关系。方法：采用多管玻璃微电极微电泳技术，观察乙酰胆碱和谷氨酸对碘缺乏子代大鼠海马神经元单位自发放电活动的影响。结果：泳入乙酰胆碱和谷氨酸后，对照组海马神经元单位自发放电频率均显著增多，呈兴奋性反应。而碘缺乏子代大鼠均无明显变化，且抑制性反应也较对照组多。 展开更多

关键词 海马 乙酰胆碱 谷氨酸 电生理学 碘缺乏症

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去交感神经肾上腺髓质不影响高血压心、血管肥厚 被引量：2

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作者 刘家骝 杨桂萍 +3 位作者 茹景顺 曹序茂 曾宪筠 邓传静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期494-497,共4页

在大鼠中,缩窄腹主动脉,4—6周后,颈动脉血压升高,股动脉血压正常。心重0.564±0.024mg/100gBW,胸主动脉壁—腔比值0.13±0.012,腹主动脉壁—腔比值0.12±0.01,心、肾细动脉壁—腔比值增高。去除交感神经肾上腺髓质使血压下... 在大鼠中,缩窄腹主动脉,4—6周后,颈动脉血压升高,股动脉血压正常。心重0.564±0.024mg/100gBW,胸主动脉壁—腔比值0.13±0.012,腹主动脉壁—腔比值0.12±0.01,心、肾细动脉壁—腔比值增高。去除交感神经肾上腺髓质使血压下降20%,但不影响心、血管肥厚的程度。心重0.548±0.024,胸主动脉壁—腔比值0.135±0.002,腹主动脉壁—腔比值0.13±0.01,心、肾细动脉壁—腔比值亦增高,两组各数值相比P>0.05。 展开更多

关键词 高血压 交感神经 主动脉缩窄

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