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肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化 被引量:12
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作者 杜锡潮 韩冰 +2 位作者 谢汝佳 邹河 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期906-912,共7页
目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180~200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4... 目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180~200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4周组、正常8周组、肝纤维化4周组和肝纤维化8周组,肝纤维化组大鼠皮下注射40%CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周和8周处死大鼠,观察肝组织病理改变,Western blotting检测肝脏活化转录因子6(ATF6)蛋白,免疫组化、Western blotting和real-time PCR分别检测肝脏CHOP和TRB3蛋白和mRNA表达变化,TUNEL法检测肝脏细胞凋亡。结果:肝纤维化组大鼠肝脏可见假小叶形成,p90ATF6蛋白表达量较正常组明显减少(P<0.01),p50ATF6蛋白表达量较正常组明显增加(P<0.01),肝细胞胞浆CHOP和TRB3蛋白及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01),细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01)。结论:内质网应激相关分子CHOP和TRB3在CCl4致大鼠肝纤维化过程中蛋白及mRNA表达水平明显增加,其变化趋势与大鼠肝细胞凋亡率一致,提示内质网应激可能通过CHOP和TRB3促进肝细胞凋亡,参与肝纤维化发生发展。 展开更多
关键词 大鼠 肝纤维化 内质网应激 细胞凋亡 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 Tribbles同源蛋白3
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肝纤维化大鼠肝细胞内质网形态及GRP78表达的研究 被引量:11
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作者 温静静 谢汝佳 +3 位作者 韩冰 杨婷 钱程 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2210-2213,共4页
目的:观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中内质网形态及内质网应激标志性蛋白———葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化,探讨内质网应激在肝纤维化发病机制中可能的作用。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型,分别在4... 目的:观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中内质网形态及内质网应激标志性蛋白———葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化,探讨内质网应激在肝纤维化发病机制中可能的作用。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周及8周处死大鼠测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变和肝细胞内质网形态,免疫组化和real-time PCR分别检测肝组织GRP78蛋白及mRNA表达变化。结果:肝纤维化组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),肝纤维化明显,电镜下见肝细胞内质网扩张,数量明显减少;肝细胞胞浆中GRP78蛋白表达量及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01)。结论:在CCl4诱导的肝纤维化发生过程中肝细胞内质网形态有明显损伤性变化,内质网应激蛋白GRP78蛋白及基因表达水平明显增加,提示内质网应激参与肝纤维化发生发展。 展开更多
关键词 大鼠 肝纤维化 葡萄糖调节蛋白78 内质网应激
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血栓素A_2和前列腺环素与自发性高血压大鼠高血压发展的关系 被引量:18
3
作者 杨国雄 张国忠 李保罗 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期237-240,共4页
本文观察了SHR和WKY及不同年龄SHR动脉血浆中TXA_2和PGI_2的稳定代谢产物TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的浓度及其比值变化。结果表明,SHR血浆中的TXB_2浓度显著高于WKY,对照组与实验组相比(207.1±59.8比1217.9±298.5P8/ml,P<0.... 本文观察了SHR和WKY及不同年龄SHR动脉血浆中TXA_2和PGI_2的稳定代谢产物TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的浓度及其比值变化。结果表明,SHR血浆中的TXB_2浓度显著高于WKY,对照组与实验组相比(207.1±59.8比1217.9±298.5P8/ml,P<0.001),而血浆中6-Keto-PGF_(1α)浓度,除高年龄组SHR外,其他各组均无明显改变;SHR各组血浆中6-Keto/TXB_2比值均显著低于WKY组,不同年龄组SHR血浆中TXB_2浓度相比,高年龄组明显高于低年龄组(2184.5±273.1比1290.6±284.4pg/ml,P<0.001),高年龄组血浆中6-Keto-PGF_(1α)浓度虽有升高,但6-Keto/TXB_2比值仍明显低于对照组(0.21±0.12比1.48±0.78,P<0.001)。这些变化可能与SHR高血压的持续发展有关。 展开更多
关键词 高血压 血栓素A2 前列腺环素
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肝纤维化病理过程中ZEB1和ZEB2的动态表达变化及意义 被引量:6
4
作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1639-1643,共5页
目的:观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组,每组各8只,模型组按3 mL... 目的:观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组,每组各8只,模型组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射60%CCl4,每隔3 d注射1次,处死大鼠后测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变;免疫组织化学法检测肝组织中ZEB1、ZEB2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;real-time RT-PCR方法检测肝脏组织中ZEB1及ZEB2 mRNA的表达变化。结果:模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显;随着肝脏损伤逐渐加重,纤维化程度加深,E-cadherin蛋白的表达显著降低,α-SMA蛋白表达显著升高,ZEB1和ZEB2蛋白和mRNA表达量也逐渐增加,8周模型组肝组织中ZEB1和ZEB2蛋白(46.42±14.36和57.71±13.32)与mRNA(189.00±47.39和277.28±48.55)表达较正常组显著增加(P<0.01)。结论:ZEB1和ZEB2蛋白及mRNA表达量随纤维化程度的加重而增加,提示EMT可能通过ZEB1和ZEB2参与肝纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 肝纤维化 慢性肝损伤 锌指E盒结合同源盒蛋白
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钙中性蛋白酶2及Bax在肝纤维化大鼠肝组织中的表达变化及意义 被引量:4
5
作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 温静静 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1603-1608,共6页
目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/k... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;对照组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用TUNEL法检测肝组织中肝细胞凋亡情况;real-time PCR检测肝组织中calpain 2及bax mRNA的表达变化。免疫组织化学法及Western blotting检测肝组织中calpain 2及Bax蛋白的表达情况。结果:Real-time PCR检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中calpain2及bax mRNA表达较相应的正常对照组显著增加。免疫组化及Western blotting检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain 2蛋白的表达与正常4周组比较无显著差异;随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain 2的表达显著增加;而肝组织中Bax的表达从肝纤维化4周时就显著增加,肝纤维化8周时达到高峰。此外,通过TUNEL法检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加。结论:Calpain 2与Bax可能参与了肝纤维化的发生发展过程。 展开更多
关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 Bcl-2相关X蛋白
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miR-200s在中药丹芍化纤干预大鼠肝纤维化过程中的表达变化 被引量:4
6
作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1950-1954,共5页
目的:观察肝组织中微小RNA-200家族成员(miR-200s)在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化并探讨其机制。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,干预组在给予CCl4造模同时给予丹芍化纤胶囊(0.5 g/... 目的:观察肝组织中微小RNA-200家族成员(miR-200s)在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化并探讨其机制。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,干预组在给予CCl4造模同时给予丹芍化纤胶囊(0.5 g/kg)灌胃,分别在4周和8周处死大鼠,测定肝脏指数和血清谷丙/谷草转氨酶(ALT和AST)活性,观察肝组织病理改变,real-time PCR方法分别检测肝组织miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达变化。结果:模型组及干预4周组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显,并且肝组织中miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达较正常组显著增加(P<0.05)。丹芍化纤胶囊干预8周组肝功能生化指标及病理学改变与对照组无明显差异,且肝组织中miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达均低于8周模型组。结论:miR-200s在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化,提示其参与肝纤维化的发生发展并可能是潜在的中药作用靶点。 展开更多
关键词 肝纤维化 丹芍化纤胶囊 微小RNA200
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早期肺鳞癌患者与正常人血清表达差异蛋白筛选 被引量:1
7
作者 韩冰 吴倩 +2 位作者 谢汝佳 杨婷 杨勤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期542-546,共5页
目的:应用蛋白质组学方法来比较早期肺鳞癌患者和健康人血清蛋白质的差异,筛选与肺鳞癌发生发展密切相关的蛋白质。方法:以6例Ⅰ期肺鳞癌患者血清和健康正常人血清为研究对象,运用比较蛋白质组学方法,用双向凝胶电泳(2-Pi-mentional ele... 目的:应用蛋白质组学方法来比较早期肺鳞癌患者和健康人血清蛋白质的差异,筛选与肺鳞癌发生发展密切相关的蛋白质。方法:以6例Ⅰ期肺鳞癌患者血清和健康正常人血清为研究对象,运用比较蛋白质组学方法,用双向凝胶电泳(2-Pi-mentional electrophoresis,2-DE)分离肺鳞癌患者血清和正常人血清的总蛋白质,银染显色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time offlightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点。结果:肺鳞癌患者血清和健康正常人血清的平均蛋白质点数分别为939±40和962±27,匹配率达89.2%和87.1%;找到表达量差异3倍以上蛋白质点25个;对25个差异蛋白质点进行分析,得到了16张肽质量指纹图谱,最终鉴定出8个差异蛋白质。其中,有3个蛋白质只在早期肺鳞癌患者血清中表达,1个蛋白质在早期肺鳞癌患者血清中表达显著上调。另4个蛋白质在早期肺鳞癌患者血清中表达显著下调或缺失。结论:通过对早期肺鳞癌患者和健康正常人血清的蛋白质表达谱进行比较,鉴定出8个与早期肺鳞癌可能相关的蛋白质,为进一步筛选肺鳞癌早期诊断、治疗和预后评估的分子生物学标志物奠定了基础。 展开更多
关键词 早期肺鳞癌 双向凝胶电泳 血清蛋白质组学 分子标志物
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用RhD阳性红细胞从含抗D抗体的IgG中提纯抗D抗体 被引量:1
8
作者 石明隽 谢竞 +3 位作者 钟江 桂华珍 郭兵 张国忠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1012-1014,共3页
目的:研究从含抗-D抗体的IgG中纯化抗D抗体的方法。方法:抗D含量为0.814μg/ml的健康人血浆,经柱层析法分离获得含抗D的IgG后,用遗传表现型CCDee的RhD阳性"O"型红细胞经亲和层析法从IgG中纯化抗-D抗体。检测相关指标。结果:... 目的:研究从含抗-D抗体的IgG中纯化抗D抗体的方法。方法:抗D含量为0.814μg/ml的健康人血浆,经柱层析法分离获得含抗D的IgG后,用遗传表现型CCDee的RhD阳性"O"型红细胞经亲和层析法从IgG中纯化抗-D抗体。检测相关指标。结果:经过亲和层析法纯化后去除了近90%的非目的IgG,使产物可以进一步浓缩以提高单位体积制剂中抗-D抗体浓度。所得制剂经检测各项指标均符合中国生物制品规程的要求。结论:本方法可从含抗D的IgG制剂中进一步纯化抗D抗体,为血浆综合利用提供参考。 展开更多
关键词 抗-D抗体 免疫球蛋白 红细胞 柱层析法 亲和层析法
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Calpain2及其抑制剂在肝纤维化细胞凋亡中的机制 被引量:1
9
作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 邹河 杨勤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期960-963,共4页
目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain2)及其抑制剂calpastatin在肝纤维化过程中的表达变化及他们在肝细胞凋亡中的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组4、8周组和肝纤维化4、8周组,每组各10只。肝纤维化组按0.3 ml/100 g体质量皮... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain2)及其抑制剂calpastatin在肝纤维化过程中的表达变化及他们在肝细胞凋亡中的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组4、8周组和肝纤维化4、8周组,每组各10只。肝纤维化组按0.3 ml/100 g体质量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;正常组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用原位末端转移酶标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)法检测肝组织中肝细胞凋亡的情况;免疫组织化学法及Western blot检测肝组织中calpain2、calpastatin及活性caspase3的表达情况;realtime PCR检测肝组织中calpain2及calpastatin mRNA的表达变化。结果:免疫组化及Western blot检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain2及calpastatin蛋白的表达与正常4周组比较差异无统计学意义(P>0.05);随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain2的表达明显增加,而calpastatin的表达明显减少;real-time PCR检测发现肝纤维化4、8周组大鼠肝组织中calpain2 mRNA表达较相应的正常对照组明显增加(P<0.01),而calpastatin mRNA的表达在肝纤维化8周组明显减少(P<0.01);此外,通过免疫组化及Western blot发现肝组织中活性caspase3的表达在肝纤维化4周时已明显增加,肝纤维化8周时达高峰;同时TUNEL法检测发现肝纤维化大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加(P<0.01)。结论:calpain2与calpastatin在蛋白及基因水平的表达变化,提示他们可能参与了肝纤维化的发生发展过程,其致肝纤维化的机制可能与促进肝细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 CALPASTATIN
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His-TAT-mCherry融合蛋白的跨膜转导及其在细胞内的定位 被引量:1
10
作者 陈茜 宋方丽 +2 位作者 刘亚伟 杨勤 姜勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-150,共4页
目的构建在原核中表达的人类免疫缺陷病毒转录活化因子(HIV-TAT)红色荧光蛋白(mCherry)融合表达载体,荧光显微镜观察HIV-TAT的跨膜转导及其在细胞内的定位,为进一步研究HIV-TAT的跨膜转导机制及其定位提供重要工具。方法采用基因重组技... 目的构建在原核中表达的人类免疫缺陷病毒转录活化因子(HIV-TAT)红色荧光蛋白(mCherry)融合表达载体,荧光显微镜观察HIV-TAT的跨膜转导及其在细胞内的定位,为进一步研究HIV-TAT的跨膜转导机制及其定位提供重要工具。方法采用基因重组技术构建含HIV-TAT以及红色荧光蛋白的质粒pET14b-His-TAT-mCherry,对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,将该质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,使其在体外表达,并进行纯化、除菌。将纯化的His-TAT-mCherry融合蛋白与Hela细胞共同孵育,荧光显微镜下观察。结果PCR、双酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;表达纯化出了高纯度的His-TAT-mCher-ry融合蛋白。荧光显微镜下见Hela细胞中红色荧光蛋白主要分布在胞质中,细胞膜上也有一定分布。结论成功构建了pET14b-His-TAT-mCherry原核表达质粒,纯化了高纯度的His-TAT-mCherry融合蛋白,该蛋白在哺乳动物细胞中有跨膜转导活性,为研究HIV-TAT的跨膜转导机制提供了一个重要的工具。 展开更多
关键词 基因产物 tat 红色荧光蛋白 跨膜转导
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牛蛙椎旁神经节在突触传递研究中的应用
11
作者 易必达 殷松生 《贵州畜牧兽医》 1998年第5期5-7,共3页
使用常规细胞内记录技术,对离体灌流的牛蛙椎旁神经节B细胞的电生理学特性和胆碱能突触传递进行观察。所测得电生理学指标与以往报道在体神经节的资料基本相符;刺激节前纤维引起的突触反应,如动作电位、快兴奋性突触后电位和慢兴奋... 使用常规细胞内记录技术,对离体灌流的牛蛙椎旁神经节B细胞的电生理学特性和胆碱能突触传递进行观察。所测得电生理学指标与以往报道在体神经节的资料基本相符;刺激节前纤维引起的突触反应,如动作电位、快兴奋性突触后电位和慢兴奋性突触后电位可稳定地观察和记录到。在灌流液中加入某种药物或化学物质,通过对B细胞电生理学特性和突触传递的影响,可探讨分析其作用环节和机理。牛蛙椎分神经节标本解剖结构相对简单,生理药理特性比较清楚,对实验环境条件的要求也不高,是研究突触传递较理想的标本材料。 展开更多
关键词 牛蛙 神经节 突触 电生理学
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乙酰胆碱和谷氨酸对碘缺乏大鼠海马单位放电活动的影响 被引量:3
12
作者 蔡春 庄宗杰 易必达 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期681-684,共4页
目的:探讨地方性克汀病智力低下与神经元电活动及神经递质的关系。方法:采用多管玻璃微电极微电泳技术,观察乙酰胆碱和谷氨酸对碘缺乏子代大鼠海马神经元单位自发放电活动的影响。结果:泳入乙酰胆碱和谷氨酸后,对照组海马神经元单... 目的:探讨地方性克汀病智力低下与神经元电活动及神经递质的关系。方法:采用多管玻璃微电极微电泳技术,观察乙酰胆碱和谷氨酸对碘缺乏子代大鼠海马神经元单位自发放电活动的影响。结果:泳入乙酰胆碱和谷氨酸后,对照组海马神经元单位自发放电频率均显著增多,呈兴奋性反应。而碘缺乏子代大鼠均无明显变化,且抑制性反应也较对照组多。 展开更多
关键词 海马 乙酰胆碱 谷氨酸 电生理学 碘缺乏症
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对海洛因成瘾大鼠体重及痛阈变化的研究 被引量:2
13
作者 徐国强 潘贵书 +1 位作者 孙善发 李淑芳 《贵州畜牧兽医》 1998年第2期7-8,共2页
在建立海洛因成瘾大鼠模型的基础上,对成瘾大鼠(实验组)和正常大鼠(对照组)生长发育状况和痛阈改变进行比较研究,结果发现成瘾大鼠生长发育迟缓,体重增长速度慢,痛阈明显提高。提示海洛因成瘾对机体的损害作用。
关键词 海洛因 成瘾大鼠 体重 痛阈
全文增补中
孤束核在腹部迷走神经升压反应中的作用
14
作者 石磊 陈孟勤 《中国医学科学院学报》 1986年第1期40-45,共6页
电解损毁兔、猫延脑闩部至闩尾1.5mm区域内的内侧孤束核和连合核外侧部后,电刺激腹部迷走神经中枢端所致升压反应显著减弱;向上述区域注射肾上腺素能受体激动剂或阻断剂、或阻断动脉压力感受反射,均不影响升压反应,提示孤束核的上述区... 电解损毁兔、猫延脑闩部至闩尾1.5mm区域内的内侧孤束核和连合核外侧部后,电刺激腹部迷走神经中枢端所致升压反应显著减弱;向上述区域注射肾上腺素能受体激动剂或阻断剂、或阻断动脉压力感受反射,均不影响升压反应,提示孤束核的上述区域有一条独立的不依赖中枢肾上腺素能神经系统和动脉压力感受反射的升压反应通路。 展开更多
关键词 腹部迷走传入纤维 孤束孩 联合核 加压反应
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