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野生型斑马鱼胚胎中hoxd3基因mRNA的表达谱 被引量:3
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作者 舒莉萍 何志旭 +3 位作者 姚冬静 马健娟 李涛 叶芝旭 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期69-74,共6页
目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3基... 目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段,将得到的hoxd3基因片段和pCS2+质粒经EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切后插入pCS2+质粒中,挑选阳性克隆,通过双酶切、菌落PCR以及测序鉴定;将pCS2+-hoxd3重组子经EcoRⅠ酶切线性化,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的hoxd3基因的反义mRNA探针。用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交。结果:构建和鉴定了pCS2+-hoxd3重组质粒,经斑马鱼全胚胎原位杂交检测hoxd3基因的表达,发现在Tuebingen野生型斑马鱼受精后24 h~72 h胚胎的中脑后脑交界处以及后脑中可以观察到hoxd3基因的表达。结论:hoxd3基因在Tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育早期的神经系统高表达,未发现在血管生成区域的表达。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 反义/遗传学 原位杂交 基因表达 斑马鱼 胚胎发育 遗传载体 质粒/遗传学 转染 内皮 血管/细胞学
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pCS^(2+)-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备 被引量:2
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作者 丁可军 何志旭 +3 位作者 舒莉萍 许威 姬牧远 杨小燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1119-1120,共2页
目的构建斑马鱼pCS2+-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH反义mRNA探针。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS2+质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS2+质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入... 目的构建斑马鱼pCS2+-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH反义mRNA探针。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS2+质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS2+质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入片段序列测序鉴定后,经T3RNA体外转录体系合成DIG-FLASH基因反义mRNA探针。结果RT-PCR法扩增出长度为533bp的特异性产物,构建的pCS2+-FLASH重组质粒经酶切鉴定和测序结果与预期相符;用FLASH反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观察到FLASH在野生型斑马鱼神经系统中存在表达。结论成功构建了pCS2+-FLASH重组质粒及FLASH基因反义mRNA探针。 展开更多
关键词 斑马鱼 pCS^2+ FLASH 反义mRNA
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腺病毒肺炎患儿病毒早期蛋白抗体检测结果的临床分析
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作者 陈珊琳 张欣樵 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期281-282,共2页
对临床诊断为肺炎的患儿用免疫过氧化物酶法(IP)检测其血清中腺病毒早期抗原(EA)的IgG抗体,结合临床探讨共对小儿腺病毒肺炎早期、快速诊断的价值,现报告如下。方法和结果1986年12月~1987年2月,在肺炎住院病儿中随机抽样,分别或同时进... 对临床诊断为肺炎的患儿用免疫过氧化物酶法(IP)检测其血清中腺病毒早期抗原(EA)的IgG抗体,结合临床探讨共对小儿腺病毒肺炎早期、快速诊断的价值,现报告如下。方法和结果1986年12月~1987年2月,在肺炎住院病儿中随机抽样,分别或同时进行病毒分离。 展开更多
关键词 肺炎 腺病毒 蛋白抗体 检测 儿童
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Pax5基因在野生型斑马鱼全胚胎发育早期的表达 被引量:1
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作者 姚冬静 舒莉萍 +3 位作者 何志旭 马建娟 李涛 黄惠敏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期21-25,共5页
目的为了深入了解在胚胎发育过程中,尤其是在早期B淋巴细胞的生成和中脑的发育过程中pax5基因可能的作用及其机制,选择斑马鱼作为实验动物,构建野生型斑马鱼pCS2+-pax5重组质粒,并观察pax5基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达。方法提取斑... 目的为了深入了解在胚胎发育过程中,尤其是在早期B淋巴细胞的生成和中脑的发育过程中pax5基因可能的作用及其机制,选择斑马鱼作为实验动物,构建野生型斑马鱼pCS2+-pax5重组质粒,并观察pax5基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼pax5基因片段,将得到的pax5基因片段和pCS2+质粒经EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切后,在T4DNA连接酶的作用下插入pCS2+质粒中,通过对重组质粒进行双酶切、菌落PCR以及插入片段序列测定鉴定后,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的pax5基因的反义mRNA探针。将得到的探针用全胚胎原位杂交技术检测pax5基因在斑马鱼早期发育过程中的表达。结果成功构建pCS2+-pax5重组质粒并制备了pax5基因的反义mRNA探针,通过斑马鱼原位杂交技术,发现在斑马鱼受精后18~72小时(18~72hpf)胚胎头部的小脑、中脑后脑交界处均可观察到pax5基因阳性杂交信号;在24~72hpf胚胎的耳蜗均可观察到pax5基因的阳性杂交信号,且随着时相的增长其表达逐渐增多;在18~48hpf胚胎的脊索部位可见pax5基因的阳性杂交信号。结论明确了pax5基因在斑马鱼胚胎的脑部、脊索神经系统高表达,并首次证实其在耳蜗听神经的早期发育过程中有表达,可能对斑马鱼早期胚胎神经系统的发育起着某些至关重要的作用。 展开更多
关键词 斑马鱼 pCS2+载体 pax5基因 反义mRNA 原位杂交
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贵州地区小儿地中海贫血76例临床分析
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作者 刘瑞琼 王雪芬 +4 位作者 朱德芬 梁爱芳 吴倩倩 张惠 王宪侠 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期79-80,共2页
本文报道我院儿科1981~1988年间确诊地中海贫血76例,计β地贫54例,α地贫(HbH病)22例。发病以男多于女(52∶24),贵州籍69例(90.7%),除汉族外以布依族较多(16例)。临床表现以面色苍黄、虚弱、发热、发育营养不良和肝脾肿大多见。重度以... 本文报道我院儿科1981~1988年间确诊地中海贫血76例,计β地贫54例,α地贫(HbH病)22例。发病以男多于女(52∶24),贵州籍69例(90.7%),除汉族外以布依族较多(16例)。临床表现以面色苍黄、虚弱、发热、发育营养不良和肝脾肿大多见。重度以上贫血56例(73.6%),网织红增高54/64(84.3%),靶形细胞阳性66例(86.8%),白细胞及血小板减少9例,红细胞渗透脆性降低46/52(88.4%),红细胞包涵体生成试验HbH病全部阳性,β地贫18例均阴性。多有阳性家族史。治疗除输血外,切脾6例,以HbH病疗效较好。并对诊治予以讨论。 展开更多
关键词 地中海贫血 儿童 遗传病
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