烟草内生细菌多样性研究 被引量：5

1

作者 王茂胜 汪汉成 +4 位作者 马莹 郭亚利 胡向丹 黄鸿 蒋选利 《广东农业科学》 CAS 2015年第23期59-64,共6页

为了揭示烟草内生细菌多样性,选择K326、云85和红花大金元3个烤烟品种进行内生细菌的分离和16S r DNA序列分析鉴定,获得不同品种烟草内生细菌的多样性特征。结果显示,27株内生细菌分别属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(33%)、蕈状芽... 为了揭示烟草内生细菌多样性,选择K326、云85和红花大金元3个烤烟品种进行内生细菌的分离和16S r DNA序列分析鉴定,获得不同品种烟草内生细菌的多样性特征。结果显示,27株内生细菌分别属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(33%)、蕈状芽孢杆菌Bacillus mycoides(4%)、芽孢杆菌属Bacillus sp.(11%)、肠杆菌属Enterobacter sp.(4%)、寡养单胞菌Stenotrophomonas sp.(4%)、热带根瘤菌Rhizobium tropici(4%)、假单胞菌属Pseudomonas sp.(4%)、土地芽孢杆菌属Terribacillus sp.(4%),芽孢杆菌属Bacillus sp.为优势细菌类群。3个品种的Shannon index(H′)以K326最高、为2.02,其次是云85、为1.48,红花大金元最低、为1.3。 展开更多

关键词 烟草 内生细菌 多样性 16S RDNA

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普通烟草八氢番茄红素脱氢酶基因的原核表达及表达谱分析 被引量：4

2

作者 钟晓武 付强 +4 位作者 邹颉 林世峰 郭玉双 赵杰宏 任学良 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期838-843,共6页

基于NCBI数据库中本氏烟(Nicotiana benthamiana)的烟草八氢番茄红素脱氢酶PDS基因(ABE99707)的核苷酸序列,设计并合成特异性引物,以烟草栽培品种红花大金元叶片总RNA为模板,通过PCR方法获得了烟草NtPDS基因的cDNA片段。序列分析表明,... 基于NCBI数据库中本氏烟(Nicotiana benthamiana)的烟草八氢番茄红素脱氢酶PDS基因(ABE99707)的核苷酸序列,设计并合成特异性引物,以烟草栽培品种红花大金元叶片总RNA为模板,通过PCR方法获得了烟草NtPDS基因的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1749 bp,编码582个氨基酸,推测该蛋白等电点为7.53,理论分子量为65.04 kD。通过构建融合表达载体pET-32a-NtPDS,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃下经1 mmol/L IPTG诱导4 h表达后,产生了以可溶性蛋白形式存在的NtPDS融合蛋白,并通过Western blotting验证融合蛋白获得表达。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,该基因在烟草的叶片、花和茎中均有表达,在根中没有表达。该结果为进一步研究烟草八氢番茄红素脱氢酶NtPDS的活性和生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 烟草 八氢番茄红素脱氢酶 原核表达 表达谱

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烟草钾外流通道基因NTORK1的启动子克隆及激素诱导分析 被引量：4

3

作者 姜骁 吴拥军 +1 位作者 杨亚 赵杰宏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期274-277,共4页

为研究烟草钾外流通道基因NTORK1的启动子的表达特征,以烟草K326基因组DNA为模板,PCR扩增获得NTORK1的启动子片段,该启动子片段为2 111 bp,包含多个转录因子结合域。构建了NTORK1启动子驱动的GUS基因表达载体,在烟草K326叶片中进行瞬时... 为研究烟草钾外流通道基因NTORK1的启动子的表达特征,以烟草K326基因组DNA为模板,PCR扩增获得NTORK1的启动子片段,该启动子片段为2 111 bp,包含多个转录因子结合域。构建了NTORK1启动子驱动的GUS基因表达载体,在烟草K326叶片中进行瞬时表达分析。结果显示,NTORK1启动子受低浓度NAA(5.4μmol/L)和高浓度SA(500μmol/L)的诱导表达。 展开更多

关键词 烟草 钾外流通道基因NTORK1 启动子 激素

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NtPHYB1与光温信号互作调控烟草种子萌发 被引量：2

4

作者 李振华 王显亚 +1 位作者 刘一灵 赵杰宏 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期99-107,共9页

光照和温度是影响种子萌发的2个重要环境因子,光敏色素是光和温度的受体,研究光敏色素协同光温信号调控种子萌发对于指导作物播种具有重要意义。本研究旨在探索NtPHYB1基因型如何响应光温环境变化而调控烟草种子萌发。结果表明,15种光... 光照和温度是影响种子萌发的2个重要环境因子,光敏色素是光和温度的受体,研究光敏色素协同光温信号调控种子萌发对于指导作物播种具有重要意义。本研究旨在探索NtPHYB1基因型如何响应光温环境变化而调控烟草种子萌发。结果表明,15种光温条件下萌发率的均值为野生型(wild type,WT)种子显著大于NtPHYB1-RNAi和NtPHYB1-OE种子。在持续光照下,NtPHYB1-OE种子萌发被抑制,而在黑暗下NtPHYB1-RNAi种子萌发被抑制。在15℃,3种基因型种子萌发均被抑制,NtPHYB1-OE种子萌发率最低;在20℃和25℃,光促进或抑制种子萌发作用不明显,3种基因型种子萌发率均较高,NtPHYB1-OE和WT种子达到最大萌发率;在30℃和35℃,光对于种子维持较高萌发率是必不可少的,NtPHYB1-RNAi种子达到最大萌发率。综上所述,NtPHYB1、光周期和温度三者之间在调控烟草种子萌发时存在交互作用,通过修饰NtPHYB1基因和改善播种环境均可显著提高烟草种子的萌发率。 展开更多

关键词 种子萌发 光温敏感性 光敏色素 光温信号 自然选择 季节变化

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不同烟草赤星病抗性烤烟品种成熟期叶片氮代谢的差异 被引量：3

5

作者 杨志晓 郭玉双 +5 位作者 刘红峰 杨冬梅 赵二卫 王志红 史跃伟 王轶 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第5期459-465,共7页

以抗赤星病的净叶黄和感赤星病的NC89、长脖黄的不同烤烟品种为材料,采用盆栽试验分析成熟期不同抗性烤烟品种叶片的氮转运差异.结果表明:随着叶片的成熟,3个品种质外体NH+4的浓度均逐步增大,长脖黄、NC89质外体NH+4的浓度显著大于净叶... 以抗赤星病的净叶黄和感赤星病的NC89、长脖黄的不同烤烟品种为材料,采用盆栽试验分析成熟期不同抗性烤烟品种叶片的氮转运差异.结果表明:随着叶片的成熟,3个品种质外体NH+4的浓度均逐步增大,长脖黄、NC89质外体NH+4的浓度显著大于净叶黄;3个品种的谷氨酰胺合成酶(GS)活性均急剧下降,净叶黄的GS活性极显著大于NC89和长脖黄;3个品种的总氮含量和叶片组织NH+4浓度明显下降,长脖黄、NC89具有较高的氨气补偿点,极显著高于净叶黄.可见:不同赤星病抗性烤烟品种成熟期叶片的氮运转能力具有明显差异,抗病品种叶片的氮素再利用能力大于感病品种;感病品种以叶片质外体氨挥发形式损失的氮素多于抗病品种. 展开更多

关键词 烤烟 质外体 氮运转 烟草赤星病

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烟草植物螯合肽合成酶PCS1基因的电子克隆和序列分析 被引量：1

6

作者 付强 钟晓武 +5 位作者 邹颉 林世锋 郭玉双 赵杰宏 王轶 任学良 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第6期34-37,共4页

为了研究烟草中重金属镉的代谢转运基因,以马铃薯的植物螯合肽合成酶phytochelatin synthases 1(PCS1)基因的全长cDNA序列(GenBank登录号:AJ548472.1)为信息探针,通过电子克隆的方法从烟草栽培品种中克隆到1个植物螯合肽合成酶基因(NtPC... 为了研究烟草中重金属镉的代谢转运基因,以马铃薯的植物螯合肽合成酶phytochelatin synthases 1(PCS1)基因的全长cDNA序列(GenBank登录号:AJ548472.1)为信息探针,通过电子克隆的方法从烟草栽培品种中克隆到1个植物螯合肽合成酶基因(NtPCS1),并对其进行了序列分析。序列分析结果:NtPCS1包含完整的开放读码框,编码531个氨基酸,含有2个保守域Phytochelatin_C和Phytochelatin;通过同源比对和进化分析发现,NtPCS1氨基酸序列与番茄PCS1的序列一致性达到85%,与已报道的树烟草NgPCS相比,在N端多出30个氨基酸。以上结果表明NtPCS1是栽培烟草中新发现的金属镉代谢转运基因。 展开更多

关键词 栽培烟草 植物螯合肽合成酶 镉转运

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烟草蛋白酶体α2型亚单位的克隆和序列分析

7

作者 付强 邹颉 +2 位作者 余婧 赵杰宏 任学良 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第9期39-41,共3页

为研究烟草识别病毒并将其降解为蛋白酶体基因,以拟南芥的蛋白酶体α2型亚单位基因全长c DNA序列(Gen Bank登录号:AF043520.1)为信息探针,用电子克隆的方法从烟草栽培品种中克隆到1个蛋白酶体基因Nt PAB1,并对其进行序列分析。结果表明,... 为研究烟草识别病毒并将其降解为蛋白酶体基因,以拟南芥的蛋白酶体α2型亚单位基因全长c DNA序列(Gen Bank登录号:AF043520.1)为信息探针,用电子克隆的方法从烟草栽培品种中克隆到1个蛋白酶体基因Nt PAB1,并对其进行序列分析。结果表明,Nt PAB1包含完整的开放读码框,编码219个氨基酸,含有1个保守域proteasome_alpha_type_2;通过同源比对和进化分析发现,Nt PAB1氨基酸序列与葡萄PAB1的序列一致性达到98%。以上结果表明,Nt PAB1是栽培烟草中未报道的编码蛋白酶体基因。 展开更多

关键词 栽培烟草 蛋白酶体α2型亚单位 蛋白降解 克隆 序列分析

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豆伞滑刃线虫类转甲状腺素基因(Bd-TTL-1)的克隆与表达定位分析 被引量：1

8

作者 林世锋 王仁刚 +4 位作者 杨志晓 王自力 李莉 朱秀 陈越男 《南方农业学报》 北大核心 2025年第3期816-826,共11页

[目的]克隆豆伞滑刃线虫(Bursaphelenchus doui)类转甲状腺素(Transthyretin-like,TTL)基因Bd-TTL-1并进行表达特性分析,为进一步研究该基因的生物学功能打下基础。[方法]以植物寄生线虫豆伞滑刃线虫为试验材料,以其体前端cDNA为试验方... [目的]克隆豆伞滑刃线虫(Bursaphelenchus doui)类转甲状腺素(Transthyretin-like,TTL)基因Bd-TTL-1并进行表达特性分析,为进一步研究该基因的生物学功能打下基础。[方法]以植物寄生线虫豆伞滑刃线虫为试验材料,以其体前端cDNA为试验方,体后端cDNA为驱动方,利用固相消减杂交方法构建豆伞滑刃线虫体前端特异cDNA文库。利用反向Northern杂交和测序筛选文库,结合RACE技术获得Bd-TTL-1基因全长序列,并利用生物信息学软件及数据库对Bd-TTL-1蛋白的理化性质、信号肽、跨膜区、同源性和保守结构域进行预测分析。利用实时荧光定量PCR和原位杂交分别进行基因发育模式和表达定位分析。[结果]成功构建1个豆伞滑刃线虫体前端特异cDNA文库。通过反向Northern杂交、测序与RACE技术相结合的方法克隆获得豆伞滑刃线虫TTL全长基因Bd-TTL-1,GenBank登录号PQ276066。Bd-TTL-1基因DNA编码区全长497 bp,包括2个外显子和1个内含子;cDNA编码区全长435 bp,编码144个氨基酸。预测Bd-TTL-1蛋白的相对分子量为15.86 kD,理论等电点为9.37;Bd-TTL-1蛋白含有1个典型且保守的TTL蛋白结构域,存在信号肽但无跨膜结构域,属于分泌性蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,Bd-TTL-1基因在豆伞滑刃线虫各发育阶段均有表达,但在虫卵期表达微弱,显著低于其他发育阶段(P<0.05)。原位杂交结果显示,Bd-TTL-1基因在豆伞滑刃线虫的食道腺特异表达。[结论]豆伞滑刃线虫Bd-TTL-1蛋白的氨基酸序列含有1个TTL蛋白保守结构域,是一种具有信号肽但无跨膜结构域的分泌性蛋白;Bd-TTL-1基因在豆伞滑刃线虫食道腺中特异表达,初步推测编码蛋白在寄生过程中通过口针释放到体外发挥作用。 展开更多

关键词 豆伞滑刃线虫 类转甲状腺素 生物信息学 表达分析 原位杂交

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烟属40份种质资源的花粉形态及其分类学意义

9

作者 郭凯阳 王仁刚 +4 位作者 王自力 林世锋 杨志晓 张洁 刘国琴 《中国烟草科学》 北大核心 2025年第3期12-19,共8页

为探究烟属植物的孢粉学特征及其分类学意义,通过电镜扫描的方法观察了烟属36份野生种及4份栽培品种的花粉形态,并用聚类分析的方法研究了烟属花粉的分类学关系。结果显示,40份材料的花粉形态为:单胞花粉,等极,三孔沟或四孔沟,球形至超... 为探究烟属植物的孢粉学特征及其分类学意义,通过电镜扫描的方法观察了烟属36份野生种及4份栽培品种的花粉形态,并用聚类分析的方法研究了烟属花粉的分类学关系。结果显示,40份材料的花粉形态为:单胞花粉,等极,三孔沟或四孔沟,球形至超长球形,P/E=1.66(0.99~2.16),尺寸39.96(26.55~58.08)μm×24.28(17.83~33.79)μm,外壁纹饰有疣状、疣状-褶皱状、褶皱状、褶皱状-条纹状、条纹状、条纹状-网状、网状等7种类型,其中含有条纹状纹饰的种最多,且大部分种外壁上具有穿孔,花粉的外壁纹饰和花粉大小是鉴别烟属花粉的主要特征。以特征值对40份材料进行聚类分析,在相似系数为15.73时,40个种被分为3个类群,普通烟草组、圆锥烟草组、渐尖叶烟草组、残波烟草组、绒毛烟草组以及三角叶烟草组6个组的聚类结果与Knapp分类系统一致。孢粉学分析为烟属的分类研究提供重要佐证,分类结果总体支持分子系统的研究结果。 展开更多

关键词 烟属 野生种 花粉形态 电镜扫描 分类学

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烤烟新品种贵烟21的选育及其特征特性

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作者 王志红 陈懿 +5 位作者 孔德钧 王海 张吉顺 陈尧 杨志晓 林英超 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2024年第6期1-6,共6页

烤烟新品种贵烟21是围绕优质易烤、抗黑胫病、提高上部叶开片等主要选育目标,以MSNC82为母本、福烟3号为父本选育出的雄性不育杂交种,2024年通过全国烟草品种审定委员会审定。该品种田间长势强,上部叶开片好,含梗率低,易烘烤,抗黑胫病,... 烤烟新品种贵烟21是围绕优质易烤、抗黑胫病、提高上部叶开片等主要选育目标,以MSNC82为母本、福烟3号为父本选育出的雄性不育杂交种,2024年通过全国烟草品种审定委员会审定。该品种田间长势强,上部叶开片好,含梗率低,易烘烤,抗黑胫病,其外观品质、化学成分及物理特性与K326相当,主要经济性状和感官品质优于K326和云烟87。贵烟21适宜在西南烟区种植,是一个能兼顾工业可用性和烟农生产效益的优良新品种。 展开更多

关键词 烤烟 新品种 贵烟21 选育 特征特性

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酚酸对烟苗根系生长及叶片光合特性的影响 被引量：6

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作者 王茂胜 李明 +3 位作者 杨秀祥 汪汉成 邱忠智 蒋选利 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期14-18,共5页

为了解酚酸类他感物质对烟苗生长发育的影响,研究了苯甲酸、对羟基苯甲酸和水杨酸对烟苗根系发育、气体交换特征、叶绿素荧光参数及叶绿素含量的影响。结果表明,3种酚酸随着浓度的增加,烟苗叶片叶绿素含量(SPAD值)均呈先增加后降低趋势;... 为了解酚酸类他感物质对烟苗生长发育的影响,研究了苯甲酸、对羟基苯甲酸和水杨酸对烟苗根系发育、气体交换特征、叶绿素荧光参数及叶绿素含量的影响。结果表明,3种酚酸随着浓度的增加,烟苗叶片叶绿素含量(SPAD值)均呈先增加后降低趋势;3种酚酸能够显著抑制烟苗根系发育,随着浓度增加,根尖数、总根长和总根表面积呈先升后降或直接降低的趋势;3种酚酸能够降低净光合速率(Pn),苯甲酸差异不显著;3种酚酸对叶绿素荧光参数均有影响,随着浓度的增加,Fv/Fm有降低趋势,但差异不显著,qp和ФPSII呈显著下降趋势,NPQ呈显著升高趋势。本试验证明了3种酚酸对烟苗根系发育、光合作用有抑制作用。 展开更多

关键词 烤烟 根系提取物 自毒作用 化感作用 酚酸

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金鱼草花青素糖基转移酶基因的克隆与表达特性分析 被引量：2

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作者 燕一波 郭玉双 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期1101-1105,共5页

以白苏子(Perilla frutescens)花青素糖基转移酶基因为探针,通过电子克隆和RT-PCR的方法从金鱼草(Antirrhinum majus L.)叶片中克隆到花青素糖基转移酶基因(Am GT1)的全长c DNA,并对其表达特性进行分析。结果表明:Am GT1全长892 bp,编码... 以白苏子(Perilla frutescens)花青素糖基转移酶基因为探针,通过电子克隆和RT-PCR的方法从金鱼草(Antirrhinum majus L.)叶片中克隆到花青素糖基转移酶基因(Am GT1)的全长c DNA,并对其表达特性进行分析。结果表明:Am GT1全长892 bp,编码277个氨基酸;进化分析表明Am GT1的氨基酸序列与白苏子的同源性最高为79%,与其他花青素糖基转移酶蛋白的同源性在42%~62%之间,表明Am GT1是从金鱼草中克隆的新的花青素糖基转移酶基因。实时定量RT-PCR分析表明:该基因在金鱼草叶片中的表达量最高,根中的表达量最低;该基因虽然在红色、粉色、黄色、白色花朵中均有表达,但在红色花朵中的表达量最高,且存在一个从紧蕾期到松蕾期的跃变。 展开更多

关键词 金鱼草 花青素 糖基转移酶基因 表达分析

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拟松材线虫类毒液过敏原蛋白基因Bm-vap-1的克隆与分析

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作者 李莉 余婧 +7 位作者 王仁刚 杨春元 林世锋 朱秀 叶子 李国红 陈越男 吴沙沙 《福建农林大学学报(自然科学版)》 2025年第5期599-608,共10页

【目的】克隆拟松材线虫类毒液过敏原蛋白(VAP)基因Bm-vap-1,并进行表达特性分析,为深入研究Bm-vap-1基因在拟松材线虫与寄主互作过程中的作用提供参考。【方法】以拟松材线虫体前端特异cDNA文库构建和测序获得的VAP基因片段为基础,通过... 【目的】克隆拟松材线虫类毒液过敏原蛋白(VAP)基因Bm-vap-1,并进行表达特性分析,为深入研究Bm-vap-1基因在拟松材线虫与寄主互作过程中的作用提供参考。【方法】以拟松材线虫体前端特异cDNA文库构建和测序获得的VAP基因片段为基础,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆得到该基因的全长cDNA序列,将其命名为Bm-vap-1。利用生物信息学软件预测Bm-VAP-1蛋白的理化性质、信号肽和跨膜区,并通过生物数据库对其同源性和保守结构域进行分析。然后利用实时荧光定量PCR检测该基因在拟松材线虫不同虫态中的表达水平,并利用原位杂交技术进行转录组表达定位。【结果】Bm-vap-1基因开放阅读框序列长度为621 bp,编码206个氨基酸,GenBank登录号为GU451046。编码蛋白质的分子质量为22.49 ku,理论等电点为4.61,与松材线虫、豆伞滑刃线虫和冲绳伞滑刃线虫VAP同源蛋白的序列一致性较高,含有1个典型且保守的CAP结构域,存在信号肽,无跨膜结构域,属于分泌型蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,Bm-vap-1基因在拟松材线虫各个虫态中均有表达,但在成虫中的表达量较高。原位杂交结果表明,Bm-vap-1基因在拟松材线虫的食道腺特异表达。【结论】成功克隆了拟松材线虫Bm-vap-1基因,初步推测其编码蛋白在线虫食道腺合成,且在线虫寄生过程中分泌到体外发挥作用。 展开更多

关键词 拟松材线虫 类毒液过敏原蛋白 生物信息学 表达水平 原位杂交

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