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CRISPR/Cas 9基因编辑技术降低贵州禾株高研究 被引量:3
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作者 郭洪刚 曹雪娇 +1 位作者 曾晓芳 赵德刚 《种子》 北大核心 2020年第7期1-5,11,共6页
为获得株高降低的贵州禾水稻新种质,以贵州禾高秆糯稻材料黎平杂边禾为研究材料,根据CRISPR/Cas 9靶位点设计原则设计水稻OsGA20ox2基因的特异性靶点sgRNA序列,构建水稻OsGA20ox2基因的CRISPR/Cas 9定点突变载体,利用农杆菌介导的愈伤... 为获得株高降低的贵州禾水稻新种质,以贵州禾高秆糯稻材料黎平杂边禾为研究材料,根据CRISPR/Cas 9靶位点设计原则设计水稻OsGA20ox2基因的特异性靶点sgRNA序列,构建水稻OsGA20ox2基因的CRISPR/Cas 9定点突变载体,利用农杆菌介导的愈伤转化法遗传转化黎平杂边禾,通过潮霉素筛选,以及PCR分子检测,获得16株转基因植株。对筛选获得的转基因植株基因进行测序,获得7株OsGA20ox2基因靶位点被编辑的突变转基因植株。研究表明,T 1代突变体植株株高比黎平杂边禾降低了29.6%。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas 9 贵州禾 株高 OsGA20ox2基因
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贵州禾来拢茎尖遗传转化体系的研究 被引量:1
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作者 刘怒安 曾晓芳 赵德刚 《种子》 北大核心 2019年第6期25-29,共5页
以贵州禾来拢茎尖为材料,遗传转化含有Ubiqutin启动子的苦瓜几丁质酶基因McCHIT1,设计正交试验,探究农杆菌菌液浓度、真空渗透压和真空处理时间对贵州禾来拢茎尖遗传转化的影响。结果表明:对植株的死亡率及转化率影响最大的是真空处理时... 以贵州禾来拢茎尖为材料,遗传转化含有Ubiqutin启动子的苦瓜几丁质酶基因McCHIT1,设计正交试验,探究农杆菌菌液浓度、真空渗透压和真空处理时间对贵州禾来拢茎尖遗传转化的影响。结果表明:对植株的死亡率及转化率影响最大的是真空处理时间,其次为菌液浓度,真空渗透压的影响较小。综合考虑植株死亡率及转化效率认为,菌液侵染浓度OD6000.8,真空处理时间11min,真空渗透压16kPa为农杆菌介导贵州禾来拢茎尖遗传转化的最优参数。 展开更多
关键词 水稻 遗传转化 来拢
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低温胁迫及生理生化指标综合评价抗寒茶树 被引量:18
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作者 李岩 田维丽 +2 位作者 谢恩俊 岑露 赵德刚 《种子》 北大核心 2020年第12期38-43,54,共7页
为研究贵州地区规模化种植且具有代表性的茶树种质福鼎白茶、黔茶8号、黔茶1号和紫魁的抗寒性,以等叶龄叶片为材料,测定低温胁迫处理下叶片的各项生理生化指标变化,综合评价4种茶树的抗寒性。结果表明,紫魁在4℃和-4℃均保持高的叶绿素... 为研究贵州地区规模化种植且具有代表性的茶树种质福鼎白茶、黔茶8号、黔茶1号和紫魁的抗寒性,以等叶龄叶片为材料,测定低温胁迫处理下叶片的各项生理生化指标变化,综合评价4种茶树的抗寒性。结果表明,紫魁在4℃和-4℃均保持高的叶绿素含量,降解少;可溶性糖含量保持持续上升;CAT、SOD和POD的酶活性均最高;O·-2和H 2O 2含量均为最低;在未处理与处理时,MDA含量均为最高,但增加幅度却最小。福鼎白茶在4℃和-4℃均保持较高叶绿素含量;可溶性糖含量保持持续上升;CAT、SOD和POD的酶活性均较高;O·-2和H 2O 2含量均为较低;MDA含量增加幅度较小。在4℃和-4℃时黔茶1号和黔茶8号的叶绿素含量均持续下降,黔茶8号下降幅度最大;-4℃时可溶性糖含量均下降,黔茶8号下降幅度最大;CAT、SOD和POD的酶活性均较低,且黔茶1号的最低;O·-2和H 2O 2含量均较高;MDA含量增加幅度均较大。综合得出抗寒性强弱顺序为:紫魁>福鼎白茶>黔茶1号>黔茶8号。 展开更多
关键词 茶树 低温胁迫 生理生化指标 抗寒性
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超高效液相测定棉酚含量方法的建立 被引量:4
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作者 阳腾 赵懿琛 +1 位作者 黄小贞 赵德刚 《种子》 北大核心 2019年第11期34-38,共5页
棉花种子富含蛋白和油脂,而种子中含有的棉酚对人和多种单胃动物具有不可逆的毒害作用,严重限制棉籽的应用。本研究建立了超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)检测棉酚的方法,色谱条件:色谱柱Hypersil GOLD T... 棉花种子富含蛋白和油脂,而种子中含有的棉酚对人和多种单胃动物具有不可逆的毒害作用,严重限制棉籽的应用。本研究建立了超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)检测棉酚的方法,色谱条件:色谱柱Hypersil GOLD TM C18柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm);乙腈-0.2%磷酸(90∶10)为流动相;0.4 mL·min^-1的流速;25℃的柱温;检测波长235 nm;进样量10μL。结果表明:棉酚在0.1~50μg·mL^-1的浓度范围内线性关系良好(R 2=0.9999),平均回收率为98.47%,相对标准偏差RSD为0.10%。经方法学检验,该检测方法精密度高、重复性好,符合检测的要求。 展开更多
关键词 超高效液相色谱 棉酚 方法
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超高效液相测定茶树水杨酸含量方法的建立 被引量:1
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作者 陈蓉 黄小贞 赵德刚 《特产研究》 2021年第5期90-95,共6页
水杨酸的含量对于茶树的生长发育、抗病和抗逆性至关重要。本研究建立了超高效液相色谱提取和检测茶树水杨酸的方法。色谱条件色谱柱 Waters POSSIBLE^(TM) C18 柱(4.6 mm×250 mm,5 h·m);1% 乙酸,1% 磷酸-甲醇(30:70)为流动相... 水杨酸的含量对于茶树的生长发育、抗病和抗逆性至关重要。本研究建立了超高效液相色谱提取和检测茶树水杨酸的方法。色谱条件色谱柱 Waters POSSIBLE^(TM) C18 柱(4.6 mm×250 mm,5 h·m);1% 乙酸,1% 磷酸-甲醇(30:70)为流动相;0.8 mL·min^(-1)的流速;30℃的柱温;检测波长276 nm,进样量3h·L。结果表明水杨酸在0.008~0.256 mg·mL^(-1)的浓度范围内线性关系良好(R^(2)=0.999 8),平均回收率为98.13%,相对标准偏差RSD为1.04%。经方法学检验结果表明,该方法精密度高重复性好,满足检测的要求。 展开更多
关键词 超高效液相色谱 茶树 水杨酸
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