利用ISSR分析技术鉴定贵州枇杷新种质的研究 被引量：14

1

作者 范付华 杨勇胜 +2 位作者 李庆宏 邓勇 文晓鹏 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期52-57,共6页

为探索枇杷新种质的鉴定方法,利用ISSR标记,构建了贵州18个枇杷栽培品种及课题组选育的7个优良新种质的DNA指纹图谱,并分析其相互间的亲缘关系。结果表明:以筛选出的15条引物进行PCR扩增,获得清晰、重复性好的谱带172条,其中多态性谱带... 为探索枇杷新种质的鉴定方法,利用ISSR标记,构建了贵州18个枇杷栽培品种及课题组选育的7个优良新种质的DNA指纹图谱,并分析其相互间的亲缘关系。结果表明:以筛选出的15条引物进行PCR扩增,获得清晰、重复性好的谱带172条,其中多态性谱带157条,多态性比例为91.3%;应用3个引物825、834和848的组合,构建了25份枇杷品种(系)的ISSR指纹图谱,可以有效区分所有供试材料;聚类分析显示,在相似性系数为0.60时,可将供试种质分成2大类:一类主要为原产于浙江的品种(系),另一类主要为原产于四川的品种及选育的新种质;因此,ISSR标记能有效地用于枇杷栽培种及新种质的分子鉴定及其亲缘关系的解析。 展开更多

关键词 枇杷 栽培品种 ISSR 指纹图谱 亲缘关系

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贵州野生枇杷资源遗传多样性的ISSR分析 被引量：11

2

作者 范付华 宋莎 +2 位作者 洪怡 赵亚楠 文晓鹏 《中国南方果树》 北大核心 2012年第3期36-39,54,共5页

采用ISSR标记,构建了贵州39份野生枇杷种质的DNA指纹图谱,并对其遗传多样性进行评价。结果表明,以筛选出的15条引物进行PCR扩增,获得清晰、重复性好的谱带125条,其中多态性谱带108条,多态性比例为86.4%;应用引物815、825和841的组合,构... 采用ISSR标记,构建了贵州39份野生枇杷种质的DNA指纹图谱,并对其遗传多样性进行评价。结果表明,以筛选出的15条引物进行PCR扩增,获得清晰、重复性好的谱带125条,其中多态性谱带108条,多态性比例为86.4%;应用引物815、825和841的组合,构建了39份枇杷种质的ISSR指纹图谱,可以有效区分所有供试材料;15条引物的谱带数据聚类分析表明,供试种质的遗传相似性系数为0.40～0.98,在相似性系数为0.70时,可将供试种质分成五大类;聚类结果与种质表型相关,与地理分布的相关性不明显。 展开更多

关键词 枇杷 种质资源 ISSR 遗传多样性

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利用ISSR标记探讨贵州地方樱桃种质玛瑙红的起源原因 被引量：4

3

作者 宋常美 文晓鹏 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期94-97,共4页

为探讨玛瑙红的起源原因,利用ISSR标记对贵州省纳雍县地方樱桃种质玛瑙红、酸樱桃、黑珍珠和4种欧洲甜樱桃等种质的亲缘关系进行分析。结果表明:用15条稳定性强、条带清晰及多态性丰富的引物进行PCR扩增,共获得286个标记位点,其中多态... 为探讨玛瑙红的起源原因,利用ISSR标记对贵州省纳雍县地方樱桃种质玛瑙红、酸樱桃、黑珍珠和4种欧洲甜樱桃等种质的亲缘关系进行分析。结果表明:用15条稳定性强、条带清晰及多态性丰富的引物进行PCR扩增,共获得286个标记位点,其中多态性位点为249个,多态性比例为87.06%;采用NTSYS2.01软件计算,7种樱桃相似性系数为0.41～0.94,玛瑙红与酸樱桃的相似系数为0.57。玛瑙红和酸樱桃在分子水平上的遗传差异很大,该种质可能为酸樱桃的实生变异种质。 展开更多

关键词 樱桃 种质 玛瑙红 贵州 ISSR

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贵州香猪IGF 1基因的克隆及组织分布 被引量：3

4

作者 冉雪琴 李景 王嘉福 《山地农业生物学报》 2009年第1期41-45,共5页

应用RT—PCR技术从香猪肝脏克隆到胰岛素样生长因子1（insulin—like growth factor1，IGF-1）基因，共612bp，包含完整的开放读码框，与已知猪种的核苷酸相似性为99％～100％，编码的153个氨基酸包括信号肽、前体肽、B、C、A、D、E区... 应用RT—PCR技术从香猪肝脏克隆到胰岛素样生长因子1（insulin—like growth factor1，IGF-1）基因，共612bp，包含完整的开放读码框，与已知猪种的核苷酸相似性为99％～100％，编码的153个氨基酸包括信号肽、前体肽、B、C、A、D、E区，成熟肽仅由B到D区组成（70aa）。香猪IGF-1的氨基酸序列与长白猪完全一样，与淞辽黑猪相差一个氨基酸（E区）；与人、犬、牛、马等的差异主要集中在信号肽、前体肽和E区，成熟肽完全相同；与小鼠的差异最大，成熟肽区有4个氨基酸不同，其他区域还有11个氨基酸不同。对香猪IGF—1成熟肽的三维结构分析结果显示，蛋白有3个α-螺旋，3对二硫键分别联系α-螺旋的N端和C端。对香猪IGF-1基因的组织分布研究结果显示，IGF-1基因在肝脏、脾、脂肪、软骨、肌肉、子宫组织中均有表达，其中肝脏的表达量最高；脊髓、肺中未检测到表达，提示IGF—1的旁分泌作用具有组织特异性。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子1 克隆 组织分布 香猪 贵州

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贵州10种玉米基因型组织培养再生体系的建立 被引量：2

5

作者 田晓娥 朱友银 赵德刚 《山地农业生物学报》 2012年第3期194-199,共6页

以贵州10种玉米基因型的幼胚为外植体,研究2,4-D浓度和基因型对玉米胚性愈伤组织诱导的影响,并进行再生体系研究。结果表明:不同基因型玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的最适2,4-D浓度不同:黔单19、黔单20、黔单23、09H313、大青233、益玉6号... 以贵州10种玉米基因型的幼胚为外植体,研究2,4-D浓度和基因型对玉米胚性愈伤组织诱导的影响,并进行再生体系研究。结果表明:不同基因型玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的最适2,4-D浓度不同:黔单19、黔单20、黔单23、09H313、大青233、益玉6号母本、益玉6号父本的最适2,4-D浓度为1.0 mg/L,遵玉母本为2.0mg/L,黔单21为3.0 mg/L。另外,不同基因型胚性愈伤组织的诱导能力及分化再生能力差异明显。其中,胚性愈伤组织诱导率较高的是遵玉母本和大青233,分别为81.87%和71.39%,而绿芽分化率较高的是黔单23和黔单21,分别为89.80%和80.00%。贵州10种玉米基因型中黔单23、黔单21和益玉6号父本表现出较好的再生频率,可为农杆菌介导遗传转化提供备选受体。 展开更多

关键词 玉米幼胚 胚性愈伤组织 再生体系 2 4-D 基因型

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ChIFN-α酿酒酵母工程菌的发酵条件优化 被引量：2

6

作者 秦捷敏 宋莉 +1 位作者 卢凌霄 赵德刚 《山地农业生物学报》 2014年第2期51-54,共4页

在PCR检测重组菌株的遗传稳定性基础上,通过单因素试验和多因素正交试验,对酿酒酵母工程菌的实验室摇瓶发酵条件进行优化,得到重组工程菌株的最佳发酵条件为:发酵温度30℃,培养基pH值为5,15%的接种量,以3%的半乳糖作为诱导剂诱导,棉籽... 在PCR检测重组菌株的遗传稳定性基础上,通过单因素试验和多因素正交试验,对酿酒酵母工程菌的实验室摇瓶发酵条件进行优化,得到重组工程菌株的最佳发酵条件为:发酵温度30℃,培养基pH值为5,15%的接种量,以3%的半乳糖作为诱导剂诱导,棉籽糖和葡萄糖作为碳源的发酵时间分别为24h和40h。 展开更多

关键词 酿酒酵母 工程菌 发酵 优化

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大肠杆菌茶氨酸合成酶基因γ-GGT的生物信息学分析 被引量：4

7

作者 吕晶晶 张天缘 +2 位作者 杨仕梅 宋莉 赵德刚 《山地农业生物学报》 2019年第1期74-78,共5页

γ-谷氨酰转肽酶(γ-GGT)是催化L-茶氨酸合成的关键酶之一,对其编码基因的解析有助于进行茶氨酸的合成调控和异源表达生产研究,本论文利用生物信息学方法,对大肠杆菌(Escherichia coli)γ-GGT基因的结构和特性进行分析。结果显示,E.coli... γ-谷氨酰转肽酶(γ-GGT)是催化L-茶氨酸合成的关键酶之一,对其编码基因的解析有助于进行茶氨酸的合成调控和异源表达生产研究,本论文利用生物信息学方法,对大肠杆菌(Escherichia coli)γ-GGT基因的结构和特性进行分析。结果显示,E.coliγ-GGT基因编码580个氨基酸,主要氨基酸为甘氨酸和亮氨酸,γ-GGT酶蛋白等电点为5.38,分子量为61.7 kDa,属于酸性不稳定亲水性蛋白,具有信号肽序列和保守功能结构域,在细胞质周质中发挥作用,其二级结构元件主要是α-螺旋和无规卷曲,在微生物中进化较为保守。研究结果为进一步研究γ-GGT基因功能及其应用奠定了基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌 γ-谷氨酰胺转肽酶 茶氨酸合成 GGT酶蛋白 生物信息学

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3个贵州薏苡品种农艺性状及光合特性研究 被引量：5

8

作者 徐剑 李建容 +1 位作者 赵懿琛 赵德刚 《山地农业生物学报》 2019年第5期65-69,共5页

为探究贵州薏苡农艺性状及光合生理特性,以兴仁小白壳、黔薏苡1号、黔薏苡2号进行田间小区试验,测量其农艺性状并测定光合特性日变化,以期为发掘高产的薏苡品种提供理论依据。结果表明:黔薏苡1号的茎粗、分蘖数、单株产量、主茎产量均... 为探究贵州薏苡农艺性状及光合生理特性,以兴仁小白壳、黔薏苡1号、黔薏苡2号进行田间小区试验,测量其农艺性状并测定光合特性日变化,以期为发掘高产的薏苡品种提供理论依据。结果表明:黔薏苡1号的茎粗、分蘖数、单株产量、主茎产量均显著高于黔薏苡2号和兴仁小白壳;黔薏苡2号的株高、茎节数、分蘖数显著低于兴仁小白壳。3个薏苡品种之间的净光合速率、气孔导度及胞间CO2浓度日变化趋势均不同,兴仁小白壳和黔薏苡1号各自在13:00、14:00出现午休现象,表现为黔薏苡1号、黔薏苡2号净光合速率显著高于兴仁小白壳,黔薏苡1号净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度及蒸腾速率均显著低于其它两个品种,此后逐渐升高,16:00时达到峰值并显著高于其它两个薏苡品种。蒸腾速率兴仁小白壳在10:00~11:00、14:00~15:00时间段高于黔薏苡1号、黔薏苡2号。 展开更多

关键词 薏苡 农艺性状 光合作用

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细菌型豆豉发酵芽孢杆菌的筛选与鉴定 被引量：33

9

作者 贾东旭 吴拥军 +1 位作者 李耀中 许文钊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期217-221,共5页

对贵州省10个细菌型豆豉产区的样品进行菌种分离与鉴定。旨在通过纯种发酵、口感评测、产蛋白酶能力测定、产气实验,筛选出能够取代自然发酵、蛋白酶产量高、发酵风味好、发酵不产气的芽孢杆菌菌株。结果从分离的184株芽孢杆菌中,筛选出... 对贵州省10个细菌型豆豉产区的样品进行菌种分离与鉴定。旨在通过纯种发酵、口感评测、产蛋白酶能力测定、产气实验,筛选出能够取代自然发酵、蛋白酶产量高、发酵风味好、发酵不产气的芽孢杆菌菌株。结果从分离的184株芽孢杆菌中,筛选出3株发酵品质突出且不产气的菌株:BJ3-2、BJ1-3和ZY4-5,其产蛋白酶能力(h/c)分别为3.60、1.71和1.50。生理生化鉴定和16SrDNA序列分析结果显示,它们均为枯草芽孢杆菌。扩大纯种发酵实验证明,可以将其作为工业发酵参考菌株。 展开更多

关键词 细菌型豆豉 芽孢杆菌 纯种发酵 蛋白酶 分离鉴定

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腐乳发酵中毛霉菌丝的自溶及其影响因素研究 被引量：5

10

作者 吴拥军 王嘉福 +2 位作者 陈昌泽 龙菊 许文钊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期212-217,共6页

对腐乳发酵过程中甲壳素酶、脱乙酰甲壳质酶、壳多糖酶和N-乙酰氨基葡萄糖酶进行研究,旨在探索腐乳毛霉后发酵菌丝自溶机理。在保持腐乳发酵所需各种酶活力的同时,达到后期腐乳成熟及毛霉菌丝充分自溶,以提高腐乳品质。结果表明:甲壳素... 对腐乳发酵过程中甲壳素酶、脱乙酰甲壳质酶、壳多糖酶和N-乙酰氨基葡萄糖酶进行研究,旨在探索腐乳毛霉后发酵菌丝自溶机理。在保持腐乳发酵所需各种酶活力的同时,达到后期腐乳成熟及毛霉菌丝充分自溶,以提高腐乳品质。结果表明:甲壳素酶是影响毛霉菌丝自溶的关键酶;温度是影响菌丝自溶的主要因素;香辛料(砂仁)对几丁质酶活力影响较大。通过正交试验确定:控制适宜的香辛料比例,温度30℃,初始pH6.5,初始酒精度10°,初始NaCl浓度11%并添加0.2%几丁质进行腐乳发酵。70d完全成熟,腐乳毛霉菌丝长度比对照低4.1倍。 展开更多

关键词 腐乳毛霉 菌丝自溶 几丁质酶 酶活力测定

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我国部分区域链格孢属rDNAITS区序列分析 被引量：5

11

作者 何劲 康冀川 +2 位作者 谢红艳 雷帮星 文庭池 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第6期2425-2427,共3页

[目的]对我国部分区域链格孢属rDNA ITS序列进行分析,从而在分子水平上对其进行鉴定。[方法]使用通用引物ITS4和ITS5对分离自我国部分区域不同寄主链格孢属(AlternariaNees)34个菌株进行ITS基因(ITS1-5.8S-ITS2)的PCR扩增和测序。[结果... [目的]对我国部分区域链格孢属rDNA ITS序列进行分析,从而在分子水平上对其进行鉴定。[方法]使用通用引物ITS4和ITS5对分离自我国部分区域不同寄主链格孢属(AlternariaNees)34个菌株进行ITS基因(ITS1-5.8S-ITS2)的PCR扩增和测序。[结果]序列分析结果表明:5.8S rDNA全长为159 bp,保守程度高,参试的34株菌均一致;ITS区变化相对较大。与A.tenuissima或A.alternata100%同源的分离菌株均表现出对地域和基质的广适性;菌株在5.8S/ITS存在的差异,说明寄主本犀科的丁香叶、蔷薇科、茄科等部分植物的链格孢具有一定的多样性。但同时也发现ITS序列标记在链格孢属部分种间应用有一定的局限性;基于序列ITS1-5.8S-ITS2聚类关系与其地理来源和寄主相关性不大。[结论]ITS序列分析法可为链格孢属的分子鉴定提供理论依据。 展开更多

关键词 链格孢 序列分析 ITS 5.8SrDNA

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马尾松水通道蛋白PmPIP1基因克隆及在干旱胁迫下的表达分析 被引量：8

12

作者 蔡琼 丁贵杰 文晓鹏 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期191-200,共10页

克隆马尾松Pinus massoniana水通道蛋白(AQP),并对其生物信息学与干旱胁迫表达模式进行分析。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)以及互补脱氧核糖核酸(c DNA)末端快速扩增(RACE)方法克隆马尾松水通道蛋白基因。采用实时荧光定量聚合酶... 克隆马尾松Pinus massoniana水通道蛋白(AQP),并对其生物信息学与干旱胁迫表达模式进行分析。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)以及互补脱氧核糖核酸(c DNA)末端快速扩增(RACE)方法克隆马尾松水通道蛋白基因。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析其在干旱胁迫下的响应模式。结果克隆到一个马尾松水通道蛋白基因,命名为Pm PIP1(Gen Bank登录号为KF582038)。此基因c DNA全长序列为1 301 bp,包括867 bp的完整开放阅读框,99 bp的5′末端非翻译区和335 bp的3′末端非翻译区。编码288个氨基酸残基,分子量为30.86 k D,等电点(p I)8.48。Pm PIP1与菠菜Spinacia oleracea(2b5f A)水通道蛋白结构相似。Pm PIP1含有6个跨膜区,具有膜内在蛋白(MIP)家族信号序列、高等植物高度保守序列HINPAVTFG和2个天门冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(NPA)保守肽段。Pm PIP1基因属质膜内在蛋白(PIPs)亚族,与挪威云杉Picea abies水通道蛋白基因亲缘关系最近,同源性达95%。q RT-PCR表明Pm PIP1受干旱胁迫诱导表达。马尾松Pm PIP1的克隆丰富了植物AQP基因的资料库,同时推测Pm PIP1基因可能参与了马尾松干旱胁迫过程。 展开更多

关键词 植物学 马尾松 水通道蛋白 克隆 表达

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一株虫生真菌的分离鉴定及杀虫活性初探 被引量：7

13

作者 何劲 雷帮星 +1 位作者 文庭池 康冀川 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第10期4530-4531,4574,共3页

[目的]为虫生真菌在害虫防治中的应用提供参考。[方法]以从罹病昆虫体表分离的虫生真菌Ekks1为供试菌种,对其进行形态鉴定;以ITS4和ITS5为引物,对Ekks1的ITS序列进行PCR扩增、电泳检测和序列分析,并检测Ekks1对小菜蛾和豆蚜虫的杀虫效果... [目的]为虫生真菌在害虫防治中的应用提供参考。[方法]以从罹病昆虫体表分离的虫生真菌Ekks1为供试菌种,对其进行形态鉴定;以ITS4和ITS5为引物,对Ekks1的ITS序列进行PCR扩增、电泳检测和序列分析,并检测Ekks1对小菜蛾和豆蚜虫的杀虫效果。[结果]经形态鉴定,Ekks1为半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丝孢科,白僵菌属,球孢白僵菌(Beauveria.bassiana);经PCR扩增,成功获得了Ekks1菌株的ITS1-5.8s-ITS5 rDNA序列,经分析,ITS1-5.8s-ITS5序列为555 bp,菌株Ekks1与GenBank中B.bassiana(EF672309)的同源性为99%;菌株Ekks1在孢子浓度为1.5×107个/ml时,感染8 d后小菜蛾的校正死亡率为76%,感染72 h后豆蚜虫的校正死亡率为61%。[结论]Ekks1为白僵菌属真菌,其孢子浓度为1.5×107个/ml时,对小菜蛾和豆蚜虫均具有一定的致死效果。 展开更多

关键词 虫生真菌 形态鉴定 杀虫活性

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应用16S rDNA鉴定食品中的双歧杆菌 被引量：9

14

作者 吴拥军 王嘉福 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第18期359-361,共3页

依据双歧杆菌16SrDNA保守序列设计属特异性引物,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术对食品中分离物基因组扩增,进行双歧杆菌属的分子鉴定。建立了相应快速、可靠的双歧杆菌基因组DNA的提取方法和PCR扩增体系。这种快速、可靠的鉴定方法能... 依据双歧杆菌16SrDNA保守序列设计属特异性引物,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术对食品中分离物基因组扩增,进行双歧杆菌属的分子鉴定。建立了相应快速、可靠的双歧杆菌基因组DNA的提取方法和PCR扩增体系。这种快速、可靠的鉴定方法能够有效的检测食品及微生态制剂中的双歧杆菌。 展开更多

关键词 双歧杆菌 PCR 鉴定 16S RDNA

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杜仲皮蛋白对霉菌的抑制作用 被引量：11

15

作者 刘世会 赵德刚 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期149-151,共3页

用纸片琼脂扩散法,研究了杜仲皮蛋白和多菌灵对木霉、青霉、根霉的抑制作用。结果表明,杜仲皮蛋白对这三种霉菌均有明显抑制作用,最小抑菌浓度分别为912.5、912.5和456.3μg/ml。多菌灵对木霉、青霉、根霉的最小抑菌浓度均为456.3μg/ml。

关键词 杜仲皮蛋白 多菌灵 霉菌 抗真菌活性

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喜树根际和内生真菌多样性研究 被引量：3

16

作者 曹晋静 康冀川 +2 位作者 何劲 莫莉 苏昊 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第5期2002-2004,共3页

[目的]研究喜树根际和内生真菌的多样性及与喜树的关系。[方法]对贵州大学校园内喜树的根际和内生真菌进行分离鉴定并进行比较分析。[结果]结果表明,分离得到的根际真菌分属于5个科,9个属;内生真菌分属于8个科,9个属。[结论]喜树根际和... [目的]研究喜树根际和内生真菌的多样性及与喜树的关系。[方法]对贵州大学校园内喜树的根际和内生真菌进行分离鉴定并进行比较分析。[结果]结果表明,分离得到的根际真菌分属于5个科,9个属;内生真菌分属于8个科,9个属。[结论]喜树根际和内生真菌存在丰富的多样性和一定的相关性。 展开更多

关键词 喜树 根际真菌 内生真菌 多样性

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ipt基因促进杜仲遗传转化不定芽再生 被引量：8

17

作者 李岩 赵德刚 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期90-93,共4页

利用农杆菌介导法,将35S启动子驱动的ipt基因遗传转化杜仲,分析ipt基因对杜仲遗传转化不定芽诱导的影响。结果表明:转ipt基因及空载体,外植体不定芽的分化率分别为0.96%和0.93%,差别不明显,但转ipt基因的单位外植体平均长芽数为3.1个,... 利用农杆菌介导法,将35S启动子驱动的ipt基因遗传转化杜仲,分析ipt基因对杜仲遗传转化不定芽诱导的影响。结果表明:转ipt基因及空载体,外植体不定芽的分化率分别为0.96%和0.93%,差别不明显,但转ipt基因的单位外植体平均长芽数为3.1个,明显高于对照的1.9个,进而促进了杜仲遗传转化的不定芽的诱导,其不定芽诱导率可达2.95%,明显高于空载体对照的1.68%。本文首次证明:ipt基因能够促进转化困难木本植物杜仲的不定芽诱导,为通过该基因与其他功能基因结合提高杜仲遗传转化效率奠定了技术基础。 展开更多

关键词 异戊烯基转移酶基因 遗传转化 杜仲

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影响农杆菌介导朝仓花椒遗传转化因素研究 被引量：8

18

作者 曾晓芳 赵德刚 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期80-85,共6页

为建立农杆菌介导的朝仓花椒遗传转化体系,以朝仓花椒叶柄及茎段为转化受体,研究了预培养时间、侵染菌液浓度、侵染时间、共培养时间等因素对转化效率的影响。获得转化体系如下:外植体预培养3d,在OD600为0.5～0.8菌液侵染10min,共培养3d... 为建立农杆菌介导的朝仓花椒遗传转化体系,以朝仓花椒叶柄及茎段为转化受体,研究了预培养时间、侵染菌液浓度、侵染时间、共培养时间等因素对转化效率的影响。获得转化体系如下:外植体预培养3d,在OD600为0.5～0.8菌液侵染10min,共培养3d,延迟7d筛选,以30和50mg/L卡那霉素(Kan)进行梯度筛选。结果表明:重悬液及共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS),可提高朝仓花椒Kan抗性愈伤率至24.6%;转化植株经GUS组织活性及PCR检测呈阳性,证实外源基因已导入朝仓花椒基因组中,利用本转化体系可为下一步将有重要经济价值外源基因导入花椒打下基础。 展开更多

关键词 朝仓花椒 农杆菌 遗传转化

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籼稻成熟胚愈伤组织诱导及不定芽分化 被引量：8

19

作者 向阳 赵德刚 +1 位作者 朱冬雪 余显权 《山地农业生物学报》 2004年第3期193-197,共5页

以不同籼稻品种的成熟胚为研究材料,通过对比实验,结果表明,采用DNB为诱导愈伤组织培养基,DMS与DNB培养基交替继代,籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好;采用MSRc3(MS+casaminoacids500mg·L-1+glutamine300mg·L-1+proline500mg
... 以不同籼稻品种的成熟胚为研究材料,通过对比实验,结果表明,采用DNB为诱导愈伤组织培养基,DMS与DNB培养基交替继代,籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好;采用MSRc3(MS+casaminoacids500mg·L-1+glutamine300mg·L-1+proline500mg·L-1+mannitol36 4g·L-1+maltose30g·L-1+TDZ0 2mg·L-1+phytagel5g·L-1pH5 8)为分化培养基,愈伤组织不定芽分化率在90%以上,较对照MSR1提高300%～500%。 展开更多

关键词 籼稻 成熟胚 愈伤组织诱导 不定芽分化 组织培养 培养基

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农杆菌介导大豆遗传转化的影响因素 被引量：10

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作者 李茂福 李睿 +1 位作者 傅永福 赵德刚 《山地农业生物学报》 2006年第4期283-286,292,共5页

采用农杆菌介导法，以大豆无菌苗子叶节为外植体，将含有Bar基因及大豆隐花色素基因的表达载体导入大豆子叶节中，在含除草剂的筛选培养基中连续筛选，获得转化植株。研究了农杆菌菌液浓度、浸染时间、共培养时间、乙酰丁香酮的浓度等... 采用农杆菌介导法，以大豆无菌苗子叶节为外植体，将含有Bar基因及大豆隐花色素基因的表达载体导入大豆子叶节中，在含除草剂的筛选培养基中连续筛选，获得转化植株。研究了农杆菌菌液浓度、浸染时间、共培养时间、乙酰丁香酮的浓度等因素对大豆转化效率的影响，结果表明，农杆菌对大豆转化率的影响较大，当转化的菌液浓度0D600为0．7、浸染时间为30—45min、共培养时问为3d、乙酰丁香酮的浓度为100μmol·L^-1时转化效率较好。 展开更多

关键词 大豆 农杆菌介导法 隐花色素基因 遗传转化 影响因素

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