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采用荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR alpha链CDR3谱系漂移技术的初步探讨
被引量：
6
1
作者
汤贤英
孙永苹
+4 位作者
马锐
朱红倩
田祖国
孙万邦
姚新生
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期727-730,共4页
目的:初步探讨荧光定量PCR溶解曲线分析技术监测人外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。方法:提取4例正常人、2例淋巴瘤型白血病患者PBMC中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCRalpha链胚系可变区基因家族(TRAV)设计上...
目的:初步探讨荧光定量PCR溶解曲线分析技术监测人外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。方法:提取4例正常人、2例淋巴瘤型白血病患者PBMC中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCRalpha链胚系可变区基因家族(TRAV)设计上游引物,共同的TCRalpha胚系链恒定区基因家族(TRAC)设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生。结果:正常人外周血T细胞TCRalpha链32个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的溶解曲线谱型图(melting curve spectratyping)呈现熔点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布,2例淋巴瘤型白血病患者外周血T细胞TCRalpha链32个家族CDR3表达频率不一致,部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的溶解曲线谱型图上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族。结论:荧光定量PCR溶解曲线分析TCRalpha链CDR3谱系漂移技术方法稳定简便,能较好地监测正常人和临床样本外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。
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关键词
T淋巴细胞受体
互补决定区3
荧光定量PCR
溶解曲线
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职称材料
胆碱酯酶检测的临床研究进展
被引量：
20
2
作者
郭鹏翔
王季石
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期795-796,共2页
关键词
胆碱酯酶
乙酰胆碱酯酶
丁酰胆碱酯酶
乙酰胆碱
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职称材料
上调miR-126表达对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响
3
作者
丁倩
杨敏
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2019年第4期509-512,共4页
目的:探讨上调miR-126对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:采用脂质体转染法分别将miR-126mimic和miR-126阴性对照(miR-126NC)转染入K562细胞,以不做转染处理的K562细胞为空白对照。采用qRT-PCR检测转染48h后细胞中miR-...
目的:探讨上调miR-126对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:采用脂质体转染法分别将miR-126mimic和miR-126阴性对照(miR-126NC)转染入K562细胞,以不做转染处理的K562细胞为空白对照。采用qRT-PCR检测转染48h后细胞中miR-126的表达水平,转染24、48、72、96h后MTT法检测细胞活力,转染48h采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Westernblot法检测细胞中PCNA及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:与空白对照和miR-126NC组相比,miR-126mimic组细胞中miR-126的表达上调,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,细胞中PCNA蛋白和Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调(P均<0.05)。结论:上调miR-126能够抑制K562细胞增殖,诱导细胞凋亡,这一效应与下调Bcl-2、促进Bax蛋白表达有关。
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关键词
MIR-126
白血病
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
题名
采用荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR alpha链CDR3谱系漂移技术的初步探讨
被引量：
6
1
作者
汤贤英
孙永苹
马锐
朱红倩
田祖国
孙万邦
姚新生
机构
遵义医学院免疫学教研室
贵州省人民医院血液内科
遵义医学院附属
医院
血液
内科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期727-730,共4页
基金
国家973前期研究专项(2008CB517310)
国家自然科学基金(30760231&30660172)资助
文摘
目的:初步探讨荧光定量PCR溶解曲线分析技术监测人外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。方法:提取4例正常人、2例淋巴瘤型白血病患者PBMC中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCRalpha链胚系可变区基因家族(TRAV)设计上游引物,共同的TCRalpha胚系链恒定区基因家族(TRAC)设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生。结果:正常人外周血T细胞TCRalpha链32个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的溶解曲线谱型图(melting curve spectratyping)呈现熔点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布,2例淋巴瘤型白血病患者外周血T细胞TCRalpha链32个家族CDR3表达频率不一致,部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的溶解曲线谱型图上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族。结论:荧光定量PCR溶解曲线分析TCRalpha链CDR3谱系漂移技术方法稳定简便,能较好地监测正常人和临床样本外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。
关键词
T淋巴细胞受体
互补决定区3
荧光定量PCR
溶解曲线
Keywords
T-cells receptor（TCR）
Complementarity determining region 3（ TCR CDR3 ）
Real-time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction （FQ-PCR）
Melting curve
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
胆碱酯酶检测的临床研究进展
被引量：
20
2
作者
郭鹏翔
王季石
机构
贵州省人民医院血液内科
贵阳医学院第一附属
医院
血液
内科
出处
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期795-796,共2页
关键词
胆碱酯酶
乙酰胆碱酯酶
丁酰胆碱酯酶
乙酰胆碱
分类号
R446.1 [医药卫生—诊断学]
在线阅读
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职称材料
题名
上调miR-126表达对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响
3
作者
丁倩
杨敏
机构
贵州省人民医院血液内科
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2019年第4期509-512,共4页
基金
贵州省科技计划项目(黔科合LH字【2016】7184)
文摘
目的:探讨上调miR-126对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:采用脂质体转染法分别将miR-126mimic和miR-126阴性对照(miR-126NC)转染入K562细胞,以不做转染处理的K562细胞为空白对照。采用qRT-PCR检测转染48h后细胞中miR-126的表达水平,转染24、48、72、96h后MTT法检测细胞活力,转染48h采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Westernblot法检测细胞中PCNA及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:与空白对照和miR-126NC组相比,miR-126mimic组细胞中miR-126的表达上调,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,细胞中PCNA蛋白和Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调(P均<0.05)。结论:上调miR-126能够抑制K562细胞增殖,诱导细胞凋亡,这一效应与下调Bcl-2、促进Bax蛋白表达有关。
关键词
MIR-126
白血病
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
miR-126
leukemia
cell proliferation
cell apoptosis
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
采用荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR alpha链CDR3谱系漂移技术的初步探讨
汤贤英
孙永苹
马锐
朱红倩
田祖国
孙万邦
姚新生
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
胆碱酯酶检测的临床研究进展
郭鹏翔
王季石
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2010
20
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
上调miR-126表达对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响
丁倩
杨敏
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2019
0
在线阅读
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职称材料
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0
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