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高迁移率族蛋白B1通过TGF-β/Smad3信号通路降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞纤维化的机制 被引量：6
1
作者 徐敏 岳峰 +4 位作者 宋勃 周松 黄晶 田水 刘启方 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1018-1022,1056,共6页
目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞纤维化过程中的作用及机制。方法:构建转染HMGB1-shRNA H9C2稳定细胞系沉默HMGB1的表达,行缺氧/复氧损伤处理,Western Blot检测纤维化相关蛋白的表达,同时检测TGF-β1、ERK... 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞纤维化过程中的作用及机制。方法:构建转染HMGB1-shRNA H9C2稳定细胞系沉默HMGB1的表达,行缺氧/复氧损伤处理,Western Blot检测纤维化相关蛋白的表达,同时检测TGF-β1、ERK及Smad3纤维化信号通路相关因子,明确下调HMGB1表达对心肌纤维化蛋白及纤维化信号通路蛋白表达的影响。使用TGF-β1抑制剂SB431542与H9C2心肌细胞共培养,行缺氧/复氧损伤处理,Western Blot检测纤维化相关蛋白的表达,明确TGF-β1对心肌纤维化蛋白表达的影响。结果:转染HMGB1-shRNA的H9C2细胞,行缺氧/复氧处理,HMGB1蛋白及纤维化相关蛋白TIMP2、MMP2、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平下调,与对照组相比差异具有显著性意义(P<0.05);TGF-β1、p-Smad3蛋白表达下调,与对照组相比差异具有显著性意义(P<0.05)。使用TGF-β1抑制剂SB431542,行缺氧/复氧处理,纤维化相关蛋白TIMP2、MMP2、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平下调,与对照组相比,差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:HMGB1影响缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞纤维化,其作用机制可以通过下调TGFβ1/Smad3信号通路蛋白的表达降低心肌纤维化。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 缺血/再灌注 心肌纤维化 TGF-β1/Smad3信号通路
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miR-25对缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡的作用 被引量：4
2
作者 刘启方 黄晶 徐敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1214-1221,共8页
目的:探讨微小RNA-25(miR-25)在缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡过程中的作用及机制。方法:构建miR-25高表达H9c2细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,real-time PCR检测miR-25及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA的表达,Western blot检测HMGB1及细胞凋... 目的:探讨微小RNA-25(miR-25)在缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡过程中的作用及机制。方法:构建miR-25高表达H9c2细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,real-time PCR检测miR-25及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA的表达,Western blot检测HMGB1及细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和cleaved caspase-3的蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化,明确miR-25的高表达对缺氧/复氧所诱导的H9c2细胞凋亡及HMGB1表达的影响。然后通过双萤光素酶报告基因验证miR-25与HMGB1的靶向关系,并构建转染HMGB1 shRNA的H9c2稳定细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,验证HMGB1是否参与缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡的调控。结果:与对照组相比,高表达miR-25组的H9c2细胞在缺氧/复氧诱导后HMGB1表达下调,Bcl-2表达上调,cleaved caspase-3蛋白水平下调,流式细胞术提示处于S期的细胞增多,G1期减少(P<0.01)。双萤光素报告基因显示,转染miR-25 mimic+野生型HMGB1-3’UTR报告基因载体组萤光素酶活性明显下降;转染miR-25 inhibitor+野生型HMGB1-3’UTR和转染miR-25 mimic+突变型HMGB1-3’UTR报告基因载体组萤光素酶活性没有变化。转染HMGB1-shRNA的H9c2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,凋亡蛋白cleaved caspase-3蛋白水平下调,流式细胞术分析提示细胞凋亡减少,处于S期的细胞增多,G1期减少(P<0.05)。结论:miR-25减少缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡,期作用机制可能与靶向调控HMGB1表达有关。 展开更多
关键词 微小RNA-25 缺氧/复氧 冠状动脉粥样硬化性心脏病
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基于红外视频测量技术的瞳孔反应动态识别监测系统
3
作者 李蕊 张浪千 +5 位作者 胡博 蒋政 吴广延 姚娟 刘运航 隋建峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期649-652,共4页
目的设计一种简单实用,基于红外视频测量技术,能对人或动物的瞳孔反应进行动态和同步在线自动识别和监测的系统。方法系统包括:普通CCD红外摄像头、数据采集卡、生理信号记录仪及信号采集分析基础软件、瞳孔同步视频测量分析软件、计算... 目的设计一种简单实用,基于红外视频测量技术,能对人或动物的瞳孔反应进行动态和同步在线自动识别和监测的系统。方法系统包括:普通CCD红外摄像头、数据采集卡、生理信号记录仪及信号采集分析基础软件、瞳孔同步视频测量分析软件、计算机等。CCD摄像头接收眼球的红外光反射并将之转化为数字信号,数据采集卡采集已经数字化的视频信息然后将其输入计算机。瞳孔视频分析软件是该系统的核心,它通过动态地跟踪分析瞳孔区域的灰度值与周围区域灰度值的差异,得出瞳孔区域的总像素数从而得出瞳孔区域的面积。利用Windows内存转储机制作为桥梁,进行与信号记录系统软件间的数据通讯传递,使瞳孔大小的变化以快速跳变的数据呈现在生理信号记录仪上,同时形成实时的瞳孔反应的面积-时间曲线图。结果利用本系统成功测量了猫瞳孔扩大反应。结论本系统依赖简单设备解决了瞳孔自动跟踪和动态测量的难题,特别是解决了瞳孔位置移动对于测量的影响。 展开更多
关键词 瞳孔 红外线 扩大反射 视频
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