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大肠杆菌RecQ解旋酶的生物学活性分析
被引量：
6
1
作者
骆衡
陈祥
+2 位作者
段丽霞
许庆贺
许厚强
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1143-1150,共8页
RecQ家族解旋酶是DNA解旋酶中高度保守的一个重要家族,在维持染色体的稳定性中起着重要的作用.人类RecQ家族解旋酶突变会导致几种与癌症有关的疾病.本研究旨在诱导大肠杆菌RecQ解旋酶体外表达,并应用生物化学和生物物理学技术研究大肠杆...
RecQ家族解旋酶是DNA解旋酶中高度保守的一个重要家族,在维持染色体的稳定性中起着重要的作用.人类RecQ家族解旋酶突变会导致几种与癌症有关的疾病.本研究旨在诱导大肠杆菌RecQ解旋酶体外表达,并应用生物化学和生物物理学技术研究大肠杆菌RecQ解旋酶的生物学活性.体外诱导表达获得纯度达90%以上并具有高活性的大肠杆菌重组RecQ解旋酶,其可溶性好;经生物学活性分析显示具有DNA结合活性、ATP依赖的DNA解链活性、DNA依赖的ATP酶活性.较之双链DNA(dsDNA),大肠杆菌RecQ解旋酶更容易与单链DNA(ssDNA)结合(P<0.01),但与长度不同的dsDNA的结合特性有差异(P<0.01)而与ssDNA没有差异(P>0.05);大肠杆菌RecQ解旋酶对3种dsDNA的解链速率不同(P<0.05);大肠杆菌RecQ解旋酶的ATP酶活性与辅助因子ssDNA长度也呈正相关(P<0.01).这些研究结果将有助于阐明大肠杆菌RecQ解旋酶的分子作用机制,并为研究RecQ解旋酶家族其它成员的结构与功能提供帮助。
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关键词
大肠杆菌
RecQ解旋酶
纯化
生物学活性
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职称材料
溴化乙锭对布鲁姆综合症解旋酶生物学特性的影响
被引量：
1
2
作者
许庆贺
许厚强
+3 位作者
骆衡
陈祥
张金彪
李坤
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1267-1272,共6页
目的研究溴化乙锭(EB)对BLM解旋酶的生物学特性的影响。方法应用荧光偏振技术研究EB对BLM解旋酶的DNA结合活性与解链活性的影响;应用自由磷检测技术研究EB对BLM解旋酶的ATPase活性的影响;应用紫外吸收光谱法研究EB对BLM解旋酶的构象的...
目的研究溴化乙锭(EB)对BLM解旋酶的生物学特性的影响。方法应用荧光偏振技术研究EB对BLM解旋酶的DNA结合活性与解链活性的影响;应用自由磷检测技术研究EB对BLM解旋酶的ATPase活性的影响;应用紫外吸收光谱法研究EB对BLM解旋酶的构象的影响。结果EB可完全抑制BLM解旋酶的DNA结合活性,当双链DNA与单链DNA作为底物时,Ci值分别为(21.3±0.7)μmol.L-1和(3.3±0.3)μmol.L-1;可完全抑制BLM解旋酶的解链活性,Ci值为(9.0±0.3)μmol.L-1;对BLM解旋酶的ATPase活性有抑制作用,但差异无显著性;可改变BLM解旋酶的构象,最大吸收峰发生红移。结论 EB可以结合BLM解旋酶并改变其构象,抑制其与DNA的结合,从而抑制BLM解旋酶的生物学活性。
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关键词
溴化乙锭
BLM解旋酶
DNA结合活性
解链活性
ATPASE活性
构象
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职称材料
题名
大肠杆菌RecQ解旋酶的生物学活性分析
被引量：
6
1
作者
骆衡
陈祥
段丽霞
许庆贺
许厚强
机构
贵州
省动物遗传育种与繁殖
重点
实验室
贵州大学
动物科学
学院
贵州山地农业病虫害重点实验室贵州大学农学学院
教育部绿色农药与
农业
生物工程
重点
实验室
贵州大学
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1143-1150,共8页
基金
国家重点基础研究发展计划资助(973计划
No.2010CB534912)
+2 种基金
教育部博士点基金(No.200806570003)
贵州省优秀人才省长资金(No.200822)
贵州省创新科研基金(No.SYN2009005)资助~~
文摘
RecQ家族解旋酶是DNA解旋酶中高度保守的一个重要家族,在维持染色体的稳定性中起着重要的作用.人类RecQ家族解旋酶突变会导致几种与癌症有关的疾病.本研究旨在诱导大肠杆菌RecQ解旋酶体外表达,并应用生物化学和生物物理学技术研究大肠杆菌RecQ解旋酶的生物学活性.体外诱导表达获得纯度达90%以上并具有高活性的大肠杆菌重组RecQ解旋酶,其可溶性好;经生物学活性分析显示具有DNA结合活性、ATP依赖的DNA解链活性、DNA依赖的ATP酶活性.较之双链DNA(dsDNA),大肠杆菌RecQ解旋酶更容易与单链DNA(ssDNA)结合(P<0.01),但与长度不同的dsDNA的结合特性有差异(P<0.01)而与ssDNA没有差异(P>0.05);大肠杆菌RecQ解旋酶对3种dsDNA的解链速率不同(P<0.05);大肠杆菌RecQ解旋酶的ATP酶活性与辅助因子ssDNA长度也呈正相关(P<0.01).这些研究结果将有助于阐明大肠杆菌RecQ解旋酶的分子作用机制,并为研究RecQ解旋酶家族其它成员的结构与功能提供帮助。
关键词
大肠杆菌
RecQ解旋酶
纯化
生物学活性
Keywords
Escherichia coli
RecQ helicase
purification
biological activity
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
溴化乙锭对布鲁姆综合症解旋酶生物学特性的影响
被引量：
1
2
作者
许庆贺
许厚强
骆衡
陈祥
张金彪
李坤
机构
贵州大学
生命科学
学院
高原
山地
动物遗传育种与繁殖省部共建教育部
重点
实验室
贵州大学
动物科学
学院
贵州
山地
农业
病虫害
重点
实验室
贵州大学
农学
院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1267-1272,共6页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(No2010CB534912)
教育部博士点基金资助项目(No200806570003)
+2 种基金
贵州省国际科技合作计划项目(黔科合外G字[2011]7008号)
贵州省优秀人才省长资金资助项目(No 200822)
贵州大学SRT项目(No 2010024)
文摘
目的研究溴化乙锭(EB)对BLM解旋酶的生物学特性的影响。方法应用荧光偏振技术研究EB对BLM解旋酶的DNA结合活性与解链活性的影响;应用自由磷检测技术研究EB对BLM解旋酶的ATPase活性的影响;应用紫外吸收光谱法研究EB对BLM解旋酶的构象的影响。结果EB可完全抑制BLM解旋酶的DNA结合活性,当双链DNA与单链DNA作为底物时,Ci值分别为(21.3±0.7)μmol.L-1和(3.3±0.3)μmol.L-1;可完全抑制BLM解旋酶的解链活性,Ci值为(9.0±0.3)μmol.L-1;对BLM解旋酶的ATPase活性有抑制作用,但差异无显著性;可改变BLM解旋酶的构象,最大吸收峰发生红移。结论 EB可以结合BLM解旋酶并改变其构象,抑制其与DNA的结合,从而抑制BLM解旋酶的生物学活性。
关键词
溴化乙锭
BLM解旋酶
DNA结合活性
解链活性
ATPASE活性
构象
Keywords
ethidium bromide
BLM helicase
DNA binding activity
helicase activity
ATPase activity
conformation
分类号
R342.3 [医药卫生—基础医学]
R345.89 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌RecQ解旋酶的生物学活性分析
骆衡
陈祥
段丽霞
许庆贺
许厚强
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
溴化乙锭对布鲁姆综合症解旋酶生物学特性的影响
许庆贺
许厚强
骆衡
陈祥
张金彪
李坤
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
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职称材料
已选择
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