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环介导等温扩增技术快速检测鲜切蔬菜中的大肠杆菌
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作者 袁光宇 龚维瑶 +2 位作者 谢体波 冯才伟 贾玲玲 《贵州农业科学》 CAS 2018年第7期149-151,共3页
为鲜切蔬菜快速检测的市场化应用提供理论基础,利用大肠杆菌的特异性基因rfbE基因设计LAMP引物,通过对10株菌株进行特异性检测,建立利用环介导等温扩增技术检测鲜切蔬菜中的大肠杆菌O157∶H7的方法,并进行验证检测。结果表明:检测鲜切... 为鲜切蔬菜快速检测的市场化应用提供理论基础,利用大肠杆菌的特异性基因rfbE基因设计LAMP引物,通过对10株菌株进行特异性检测,建立利用环介导等温扩增技术检测鲜切蔬菜中的大肠杆菌O157∶H7的方法,并进行验证检测。结果表明:检测鲜切蔬菜样品特异性为93.3%,准确度为96.5%,检测大肠杆菌灵敏度达1.69CFU/mL。建立的快速检测方法可满足市场化应用的需要。 展开更多
关键词 鲜切蔬菜 大肠杆菌 环介导等温扩增 快速检测 农产品质量检测
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冻鸡肉中金黄色葡萄球菌LAMP快速检测方法的建立 被引量:1
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作者 袁光宇 谢体波 +4 位作者 龚维瑶 吴紫洁 程茹 张凯 钟新敏 《安徽农业科学》 CAS 2018年第25期162-163,199,共3页
[目的]建立冻鸡肉中金黄色葡萄球菌的LAMP检测方法。[方法]根据金黄色葡萄球菌特异性耐热核酸酶基因序列设计2对引物,建立LAMP检测方法,并用于检测采购自贵阳市各大超市的冻鸡肉样品。[结果]设计合成的2对引物和建立的LAMP方法检测金黄... [目的]建立冻鸡肉中金黄色葡萄球菌的LAMP检测方法。[方法]根据金黄色葡萄球菌特异性耐热核酸酶基因序列设计2对引物,建立LAMP检测方法,并用于检测采购自贵阳市各大超市的冻鸡肉样品。[结果]设计合成的2对引物和建立的LAMP方法检测金黄色葡萄球菌具有良好的特异性,反应体系的灵敏度为65 CFU/m L。检测采购自贵阳市各大超市和经人为污染的264份冻鸡肉样品分别用LAMP方法检测,并用国标方法检测验证,其特异性为95.2%,准确度为97.3%。[结论]该研究建立的方法为实现在冻鸡肉中金黄色葡萄球菌的快速检测奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 LAMP 检测方法 冻鸡肉
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贵阳市河水中大肠杆菌O157:H7的检测
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作者 袁光宇 龚维瑶 +3 位作者 贾玲玲 程茹 谢体波 钟新敏 《安徽农业科学》 CAS 2018年第28期167-168,185,共3页
[目的]检测贵阳市河水中大肠杆菌O157:H7。[方法]通过大肠杆菌O157:H7毒力基因志贺样毒素2(stx2)、α-溶血素(hly A)、紧密黏附素(eae A)设计3对引物,并建立了实时荧光定量PCR检测方法对8株菌株进行特异性、灵敏度检测,利用该方法检测... [目的]检测贵阳市河水中大肠杆菌O157:H7。[方法]通过大肠杆菌O157:H7毒力基因志贺样毒素2(stx2)、α-溶血素(hly A)、紧密黏附素(eae A)设计3对引物,并建立了实时荧光定量PCR检测方法对8株菌株进行特异性、灵敏度检测,利用该方法检测了采集自贵阳市部分河流10组水样。[结果]该方法能够特异扩增大肠杆菌O157:H7毒力基因,灵敏度为127 ng/m L;检测水样结果与国标方法相比,其灵敏度为87.5%,特异度为97.1%,准确度为94.0%。[结论]该方法的建立能够为大肠杆菌O157:H7检测提供较好的理论基础。 展开更多
关键词 实时PCR 大肠杆菌O157:H7 毒力基因
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反相高效液相色谱法测定植物油中苯并芘的研究 被引量:12
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作者 江露 汪善良 《食品科学技术学报》 CAS 2017年第5期91-94,共4页
建立了植物油中苯并芘含量的反相高效液相色谱检测方法。采用四氢呋喃-乙腈的混合体系溶解油脂,将试样液注入高效液相色谱仪中进行检测。经C18柱分离,荧光检测器检测,激发波长384 nm,发射波长406 nm,V(流动相乙腈)∶V(1‰乙酸水)(88∶1... 建立了植物油中苯并芘含量的反相高效液相色谱检测方法。采用四氢呋喃-乙腈的混合体系溶解油脂,将试样液注入高效液相色谱仪中进行检测。经C18柱分离,荧光检测器检测,激发波长384 nm,发射波长406 nm,V(流动相乙腈)∶V(1‰乙酸水)(88∶12),流速为1.0 m L/min,保留时间定性,苯并芘标准品外标定量。该方法重复性限r为0.81和再现性限R为0.84,均大于2次测定结果绝对差值0.1,回收率达90%以上,线性范围为0.5~100 ng/m L,方法的检出限为0.09μg/kg。此方法简单快捷、检测成本低,适用于植物油中苯并芘的快速测定。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 苯并芘 植物油
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气相色谱法测定蔬菜中甲基异柳磷农药残留量不确定度分析 被引量:7
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作者 班秋丽 江露 汪善良 《现代农业科技》 2017年第20期114-116,120,共4页
为了分析GB/T 5009.144—2003测定蔬菜中甲基异柳磷残留量的不确定度主要来源,采用气相色谱法进行试验,建立数学模型以剖析整个测量过程中不确定度的来源,并且评定出影响甲基异柳磷测量的各个不确定度分量,最终得到合成不确定度。结果表... 为了分析GB/T 5009.144—2003测定蔬菜中甲基异柳磷残留量的不确定度主要来源,采用气相色谱法进行试验,建立数学模型以剖析整个测量过程中不确定度的来源,并且评定出影响甲基异柳磷测量的各个不确定度分量,最终得到合成不确定度。结果表明,当蔬菜中的甲基异柳磷农药残留量为0.25 mg/kg时,测定结果的扩展不确定度为0.03 mg/kg(k=2)。 展开更多
关键词 甲基异柳磷 农药残留 气相色谱法 不确定度
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ZDS基因干扰表达对烟草类胡萝卜素生物合成的影响 被引量:1
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作者 江露 班秋丽 汪善良 《现代农业科技》 2017年第20期231-233,235,共4页
烟草类胡萝卜素对烟叶品质和可用性有重要作用,ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)是调控类胡萝卜素合成积累的关键酶之一。为研究ZDS基因干扰表达对烟草类胡萝卜素生物合成的影响,从贵州省烟草科学研究院福泉试验基地取样品,采用不同株系相同部位... 烟草类胡萝卜素对烟叶品质和可用性有重要作用,ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)是调控类胡萝卜素合成积累的关键酶之一。为研究ZDS基因干扰表达对烟草类胡萝卜素生物合成的影响,从贵州省烟草科学研究院福泉试验基地取样品,采用不同株系相同部位的方式取样,与贵烟1号(GY1)对照,筛选出能够构建RNA干扰(RNAi)载体并成功转化的转基因植株,建立ZDS基因的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR的检测方法,检测新鲜烟叶中ZDS基因表达水平并分析其遗传表型的变化。结果表明,ZDS和其他类胡萝卜素合成关键酶基因的表达均下调,其遗传后代出现异于正常植株的白化与矮化的表型。证明了ZDS基因对产生这种异同发挥了作用,也充分佐证了RNAi技术在基因功能分析中有着重要的作用,但这些样品表现出白化和矮化的表型是否是由于烟草类胡萝卜素的合成受到抑制尚不确定,还需要进一步验证。 展开更多
关键词 烟草类胡萝卜素 ZDS基因 实时荧光定量PCR RNA干扰
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