贵州白香猪母系与父系遗传检测 被引量：2

1

作者 王兆龙 刘若余 田甜 《山地农业生物学报》 2009年第3期240-244,共5页

采用PCR测序技术分析贵州白香猪两品系(Ⅰ系、Ⅱ系)mtDNA D-loop区和Y染色体SRY基因编码区序列。结果表明,在遵循母系遗传的mtDNA D-loop区,贵州白香猪Ⅰ系具有3种单倍型H1、H2和H3;Ⅱ系具有1种单倍型H1;在遵循父系遗传的SRY基因编码区... 采用PCR测序技术分析贵州白香猪两品系(Ⅰ系、Ⅱ系)mtDNA D-loop区和Y染色体SRY基因编码区序列。结果表明,在遵循母系遗传的mtDNA D-loop区,贵州白香猪Ⅰ系具有3种单倍型H1、H2和H3;Ⅱ系具有1种单倍型H1;在遵循父系遗传的SRY基因编码区,两品系共享单倍型GWXPⅠ。说明贵州白香猪Ⅰ系具有3个母系血统,Ⅱ系具有1个母系血统;Ⅰ系和Ⅱ系具有1个父系血统。通过与GenBank上收录的其他猪品种的同源序列比对发现,贵州白香猪具有独特的线粒体遗传结构,且其线粒体基因纯合性较高。 展开更多

关键词 贵州白香猪 遗传检测 SRY基因 MTDNA D—loop

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‘兴义矮脚鸡’与‘贵州矮脚黄鸡’杂交试验 被引量：3

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作者 叶涛 吴古荣 +3 位作者 李辉 王姣 罗韦 杨金春 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期34-39,共6页

【目的】为解决兴义矮脚鸡矮脚性状不能稳定遗传的问题.【方法】采用分子标记辅助选育技术,引入贵州矮脚黄鸡进行杂交,以期利用dw基因代替Cp基因.本研究测定并分析了兴义矮脚鸡、贵州矮脚黄鸡和杂交F1代的2个基因的基因型和不同周龄的胫... 【目的】为解决兴义矮脚鸡矮脚性状不能稳定遗传的问题.【方法】采用分子标记辅助选育技术,引入贵州矮脚黄鸡进行杂交,以期利用dw基因代替Cp基因.本研究测定并分析了兴义矮脚鸡、贵州矮脚黄鸡和杂交F1代的2个基因的基因型和不同周龄的胫长.【结果】杂交F1代鸡群中,ZDWZDW/ZDWW、ZDWZdw、ZdwW基因型频率分别为0.7757、0.1121、0.1121;(+/+)基因型频率和(Cp/+)基因型频率均为50%,鉴定出19只导入了dw基因又剔除了Cp基因的个体可用于F1代自交.【结论】研究结果表明利用分子标记辅助进行兴义矮脚鸡的杂交选育是可行的,本方法可缩短育种周期,节约育种成本和时间. 展开更多

关键词 兴义矮脚鸡 杂交 DW基因 CP基因

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贵州地方鸡IL8RB基因多态性及其对肉品质的影响 被引量：3

3

作者 吴磊 覃媛钰 +5 位作者 谭光辉 李杰章 张依裕 蒋会梅 杨远清 向程举 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2020年第4期512-518,共7页

为了挖掘IL8RB基因的单核苷酸多态性(SNP)位点,以长顺绿壳蛋鸡、黔画乌鸡和威宁鸡为材料,采用PCR产物直接测序法对IL8RB基因进行SNP筛查,对突变前后序列进行生物信息学分析.结果表明:在3个鸡群体IL8RB基因中共检测到2个错义突变位点,g.2... 为了挖掘IL8RB基因的单核苷酸多态性(SNP)位点,以长顺绿壳蛋鸡、黔画乌鸡和威宁鸡为材料,采用PCR产物直接测序法对IL8RB基因进行SNP筛查,对突变前后序列进行生物信息学分析.结果表明:在3个鸡群体IL8RB基因中共检测到2个错义突变位点,g.22589443 C>T突变共产生3种基因型,为中度多态,引起亮氨酸变成丝氨酸;g.22589512 C>T突变共产生2种基因型,为低度多态,引起苏氨酸变成甲硫氨酸.卡方(χ^2)检测结果表明:g.22589443 C>T位点在长顺绿壳蛋鸡群体的基因型分布极显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),在黔画乌鸡和威宁鸡群体基因型分布显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.05);g.22589512 C>T突变位点在3个鸡群体基因型分布未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).连锁不平衡分析结果显示:3个鸡群体IL8RB基因2个SNP位点间不存在强连锁不平衡;2个SNP位点联合共产生3种单倍型和4种双倍型,单倍型H1和双倍型H1H1出现的频率最高,单倍型H3和双倍型H2H2出现的频率最低.生物信息学分析表明:3种单倍型自由能为:TC>CC>CT,稳定性为:CT>CC>TC;2个SNP位点引起氨基酸变化但未引起蛋白质二级结构和三级结构变化.IL8RB基因变异与黔画乌鸡肉品质关联性分析发现,双倍型H1H1个体的肉色指标显著高于H1H3个体(P<0.05),其他各SNP位点及双倍型在各指标之间的差异未达到显著水平(P>0.05).所检测到的这2个SNP位点或许可作为改善鸡肉品质遗传标记,为今后深入研究提供数据参考和理论支持. 展开更多

关键词 IL8RB基因 长顺绿壳蛋鸡 黔画乌鸡 威宁鸡 单核苷酸多态性 生物信息学

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贵州白香猪Gadd45G的cDNA克隆与序列分析

4

作者 乜玉丽 许厚强 +2 位作者 赵佳福 张勇 陈祥 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期141-144,共4页

采用试剂盒提取RNA和RT-PCR法获得贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列,构建了贵州白香猪Gadd45G基因的pMD19亚克隆载体,并对该重组质粒进行测序分析,为贵州白香猪作为模式动物提供理论基础,为构建Gadd45G基因真核表达载体和转基因猪研究奠... 采用试剂盒提取RNA和RT-PCR法获得贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列,构建了贵州白香猪Gadd45G基因的pMD19亚克隆载体,并对该重组质粒进行测序分析,为贵州白香猪作为模式动物提供理论基础,为构建Gadd45G基因真核表达载体和转基因猪研究奠定基础。PCR、双酶切鉴定结果表明,已成功克隆的贵州白香猪Gadd45G基因的cDNA序列长度为480 bp。测序结果显示,贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列与普通猪、人类、家鼠、牛的同源性分别为99.6%、89.6%、90.2%、91.2%,氨基酸同源性分别为98.8%、95.6%、95.0%、96.2%。序列分析表明,贵州白香猪Gadd45G基因编码序列与普通猪相比,有两处发生碱基突变,其中一处为错义突变(第385处的G→A突变)使氨基酸由丙氨酸突变成苏氨酸。 展开更多

关键词 贵州白香猪 Gadd45基因 pMD19-T载体 克隆 序列分析

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CYP7B1和CYP4B1基因mRNA在不同毛色贵州剑白香猪皮肤组织中的表达分析

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作者 石钰仕 陈伟 +2 位作者 覃海 王康 洪星 《贵州畜牧兽医》 2021年第5期8-12,共5页

为了分析CYP7B1、CYP4B1基因在剑白香猪的黑色和白色皮肤组织中的表达差异,试验通过提取剑白香猪黑色和白色皮肤组织的RNA,分别逆转录合成相应的cDNA;以GAPDH基因作为内参,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CYP7B1,CYP4B1基因mRNA在黑... 为了分析CYP7B1、CYP4B1基因在剑白香猪的黑色和白色皮肤组织中的表达差异,试验通过提取剑白香猪黑色和白色皮肤组织的RNA,分别逆转录合成相应的cDNA;以GAPDH基因作为内参,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CYP7B1,CYP4B1基因mRNA在黑色和白色皮肤组织中的相对表达量。结果:CYP7B 1、CYP4B 1基因在剑白香猪黑色皮肤中表达量较高,在白色皮肤组织中表达量很少甚至几乎不表达。结论:推测CYP7B1、CYP4B1基因可能与剑白香猪黑色皮肤的形成有关,为进一步研究CYP7B1、CYP4B1基因在香猪的黑色和白色皮肤组织中的功能提供数据基础。 展开更多

关键词 剑白香猪 CYP7B1基因 CYP4B1基因 基因差异表达

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单核苷酸多态性在猪育种中的应用 被引量：2

6

作者 闫雷 林家栋 +1 位作者 张晓杰 张勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第6期94-98,共5页

单核苷酸多态性(single nucleotide polgmorphisms,SNP)作为第3代分子遗传标记,已广泛应用于动物遗传育种、基因定位、克隆和遗传多样性等方面的研究。笔者对SNP的概念、检测方法及在猪育种上的研究进行了详细的阐述,并对SNP的应用前景... 单核苷酸多态性(single nucleotide polgmorphisms,SNP)作为第3代分子遗传标记,已广泛应用于动物遗传育种、基因定位、克隆和遗传多样性等方面的研究。笔者对SNP的概念、检测方法及在猪育种上的研究进行了详细的阐述,并对SNP的应用前景进行了展望。 展开更多

关键词 单核苷酸多态性 生长性状 肉质性状 繁殖性状 抗病性状

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香炉山鸡线粒体DNA D-Loop区遗传多样性及系统进化研究 被引量：6

7

作者 李兴才 潘成勇 +3 位作者 李辉 杨华婷 陈林 肖涛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第9期2633-2641,共9页

试验旨在研究香炉山鸡的遗传多样性与系统进化。利用PCR扩增结合双向测序的方法对121只香炉山鸡线粒体DNA D-Loop(mtDNA D-Loop)区全长序列进行分析,并对mtDNA D-Loop区全长序列组成、变异与母系起源进行探讨。结果发现,香炉山鸡mtDNA D... 试验旨在研究香炉山鸡的遗传多样性与系统进化。利用PCR扩增结合双向测序的方法对121只香炉山鸡线粒体DNA D-Loop(mtDNA D-Loop)区全长序列进行分析,并对mtDNA D-Loop区全长序列组成、变异与母系起源进行探讨。结果发现,香炉山鸡mtDNA D-Loop区全长序列为1 231~1 233 bp,A、T、C、G碱基含量分别为26.62%、33.55%、26.49%、13.34%,表现出T碱基含量最高,G碱基含量最低,A+T含量明显高于G+C含量,说明此区可能具有一定的碱基嗜好性;121条全长序列经分析发现共存在11种单倍型,26个变异位点,其中单一多态信息位点2个,简约信息位点24个,另外存在4处碱基插入与2处碱基缺失。遗传多样性分析发现,单倍型多样度为0.814,核苷酸多样度为0.00447,平均核酸差异数为5.494,表明香炉山鸡遗传多样性比较丰富,保种效果较好,具有一定的选育空间。经Tajima Test检测发现,Tajima’s D值为0.39378,检验结果不显著(P>0.10),符合中性突变。聚类分析结果显示,香炉山鸡与红色原鸡聚为一支,说明香炉山鸡起源于红色原鸡;在分支内部又有4个分支,说明香炉山鸡存在多个母系起源。研究结果可为香炉山鸡种质资源保护与开发利用提供一定的参考数据。 展开更多

关键词 香炉山鸡 线粒体DNA D-Loop区(mtDNA D-Loop) 遗传多样性 单倍型多样性

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三穗鸭SLC4A9基因表达量及其多态性对蛋壳品质的遗传效应分析 被引量：2

8

作者 杨酸 张依裕 +3 位作者 谭元成 王盈童 游敏芳 廖朝美 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第6期2082-2090,共9页

为探究溶质载体家族4成员9(solute carrier family 4 member 9,SLC4A9)基因的表达量及其多态性对鸭蛋壳品质的遗传效应,试验采用实时荧光定量PCR法检测SLC4A9基因在三穗鸭不同组织中的表达水平,采用PCR产物直接测序法筛查三穗鸭SLC4A9... 为探究溶质载体家族4成员9(solute carrier family 4 member 9,SLC4A9)基因的表达量及其多态性对鸭蛋壳品质的遗传效应,试验采用实时荧光定量PCR法检测SLC4A9基因在三穗鸭不同组织中的表达水平,采用PCR产物直接测序法筛查三穗鸭SLC4A9基因的SNP位点,并分析SNP位点对三穗鸭蛋壳品质的遗传效应。结果显示,SLC4A9基因mRNA在三穗鸭10个组织中均有不同程度表达,其中在心脏和胰腺中为高度特异性表达,肾脏中为中度表达,其他为低度表达。试验共检测到10个SNPs位点,其中3个位于外显子上(g.6803 C>T、g.7065 C>T和g.7089 C>G),且均为错义突变,7个位于内含子上(g.7162 C>G、g.11044 G>A、g.11090 T>C、g.11234 C>T、g.11261 C>T、g.11349 C>T和g.11403 G>A),其中g.6803 C>T位点突变导致丙氨酸(GCG)变为缬氨酸(GTG);g.7065 C>T位点突变导致丙氨酸(GCC)变为缬氨酸(GTC);g.7089 C>G位点突变导致丙氨酸(GCA)变为甘氨酸(GGA)。χ2检验结果显示,g.6803 C>T、g.11090 T>C和g.11349 C>T突变位点的基因型分布均偏离了Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05),其余位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析结果表明,g.11349 C>T位点的CC和CT基因型蛋壳强度显著高于TT基因型(P<0.05)。综上,SLC4A9基因的10个SNPs位点均对三穗鸭的蛋壳品质产生影响,其中g.11349 C>T位点达到了显著水平,可为蛋鸭蛋壳品质的改善及遗传标记提供参考依据。 展开更多

关键词 三穗鸭 SLC4A9基因 组织表达 多态性 蛋壳品质

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牛MSTN启动子与MEF2C转录因子相互作用的研究 被引量：2

9

作者 杨涛 许厚强 +3 位作者 陈伟 周迪 王圆圆 朱晓锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1567-1575,共9页

旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧... 旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧光素酶报告载体,采用脂质体法共转染至小鼠C2C12成肌细胞,24 h后检测其双荧光素酶活性。最后,通过PCR扩增MSTN启动子核心片段MSTN-P1,重新构建以MSTN-P1片段替代(CMV)区的重组表达载体pEGFP-N3-MSTN-P1-MEF2C,将其分别转染至小鼠C2C12成肌细胞和大鼠下颌腺上皮细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白发光情况,48 h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR检测MEF2C基因在不同细胞中的表达情况。结果显示,在小鼠C2C12成肌细胞中,共转染pcDNA3.1(+)-MEF2C试验组较pGL3-Basic-MSTN试验组能显著增强MSTN启动子的活性(P<0.05),较pGL3-Basic对照组能极显著增强MSTN启动子的活性(P<0.01);MSTN启动子核心片段MSTN-P1能驱动MEF2C基因在小鼠C2C12成肌细胞中的表达量极显著上调(P<0.01),且能驱动MEF2C基因在大鼠下颌腺上皮细胞中的表达量显著上调(P<0.05)。结果表明,在转录水平,MSTN启动子与MEF2C可能同时参与了牛肌肉生长和分化的调控。 展开更多

关键词 牛 MSTN启动子 MEF2C转录因子 互作

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绿色肉猪饲养管理HACCP模式初探 被引量：2

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作者 李金杰 许厚强 +3 位作者 张勇 徐彩龙 陈祥 杨春怒 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第2期132-135,共4页

应用HACCP方法,通过对绿色肉猪饲养管理流程中各个环节的危害分析,确定关键控制点;对关键控制点中存在的潜在危害做出有效监控和纠偏措施,并对关键控制点建立档案记录,制定绿色肉猪饲养管理HACCP体系工作简表;绘制绿色肉猪饲养管理流程... 应用HACCP方法,通过对绿色肉猪饲养管理流程中各个环节的危害分析,确定关键控制点;对关键控制点中存在的潜在危害做出有效监控和纠偏措施,并对关键控制点建立档案记录,制定绿色肉猪饲养管理HACCP体系工作简表;绘制绿色肉猪饲养管理流程危害分析表及绿色肉猪饲养管理HACCP计划表,进而初步构建绿色肉猪饲养管理HACCP模式,并应用于肉猪饲养管理中,可有效控制饲养管理过程中的潜在危害,为绿色肉猪生产研究提供理论指导。 展开更多

关键词 绿色肉猪 HACCP 饲养管理 关键控制点

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OC-116基因第1外显子多态性对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的影响 被引量：4

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作者 吴磊 谭光辉 +3 位作者 李杰章 覃媛钰 张依裕 田琴 《河南农业科学》 北大核心 2020年第5期143-148,共6页

为探讨OC-116基因第1外显子多态性对鸡蛋壳品质的影响,试验以长顺绿壳蛋鸡为材料,采用PCR产物直接测序法对OC-116基因第1外显子区域进行单核苷酸多态性(SNP)筛查,利用一般线性模型分析多态位点对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的遗传效应。结果显... 为探讨OC-116基因第1外显子多态性对鸡蛋壳品质的影响,试验以长顺绿壳蛋鸡为材料,采用PCR产物直接测序法对OC-116基因第1外显子区域进行单核苷酸多态性(SNP)筛查,利用一般线性模型分析多态位点对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的遗传效应。结果显示,在OC-116基因第1外显子共检测到2个中度多态且完全连锁的SNP位点,分别为g.45667632 T>C和g.45667671 G>A,均产生3种基因型。通过卡方(χ2)检验发现,2个SNPs基因型分布均未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),共存在2种单倍型和3种双倍型。基因型CC、AA和双倍型H2H2在蛋质量上显著高于基因型TT、GG和双倍型H1H1(P<0.05),基因型TT、GG和双倍型H1H1在蛋形指数上显著高于基因型CT、AG和双倍型H1H2(P<0.05),基因型CT、AG和双倍型H1H2在蛋壳强度上显著高于基因型TT、GG和双倍型H1H1(P<0.05)。综上,基因型CC、AA和双倍型H2H2是改善蛋壳品质的有利基因型和双倍型,揭示g.45667632 T>C位点和g.45667671 G>A位点可作为蛋壳性状选择的标记性位点。 展开更多

关键词 长顺绿壳蛋鸡 OC-116基因 外显子 蛋壳品质 SNP

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牛FATP1基因5'侧翼启动子克隆及序列分析 被引量：1

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作者 龚婷 许厚强 +4 位作者 陈伟 赵佳福 骆衡 陈祥 张勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期86-92,共7页

旨在克隆牛FATP1基因5'侧翼启动子,研究其特异性转录调控元件的调控机制。利用PCR方法扩增牛FATP1基因5'侧翼区,并通过产物纯化、连接、转化及测序比对,获得2 164 bp(-1 969-+194 bp)的5'侧翼启动子序列。利用生物信息软件... 旨在克隆牛FATP1基因5'侧翼启动子,研究其特异性转录调控元件的调控机制。利用PCR方法扩增牛FATP1基因5'侧翼区,并通过产物纯化、连接、转化及测序比对,获得2 164 bp(-1 969-+194 bp)的5'侧翼启动子序列。利用生物信息软件对获得的2 164 bp 5'侧翼启动子克隆载体进行分析预测,发现其有4处转录起始点和40个潜在转录因子结合位点;该序列与人、小鼠、大鼠和狗的同源性分别为74.1%、71.1%、72.0%、62.8%,且不同物种FATP1基因5'侧翼区的同源序列主要集中在转录起始点上游-578--93 bp区域,保守性较强的区域在转录起始点上游-263--174 bp,推测转录起始点上游-263--174 bp可能是其核心启动子区域,从而成功克隆了FATP15'侧翼启动子序列2 164 bp,初步预测了该基因的核心启动子区域。 展开更多

关键词 牛 克隆 FATP1基因 启动子 转录因子

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从江香猪PHKG2基因超表达载体和RNA干扰载体的构建及其表达 被引量：1

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作者 王圆圆 许厚强 +3 位作者 陈伟 周迪 张鸣 杨涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1818-1829,共12页

旨在克隆从江香猪磷酸化酶激酶γ2(phosphorylase kinase gamma 2,PHKG2)基因编码区,并对PHKG2基因功能进行初步探究。本研究利用RT-PCR法扩增从江香猪PHKG2基因完整CDS区。通过构建pEGFP-N3-PHKG2超表达载体,设计并合成4对针对从江香猪... 旨在克隆从江香猪磷酸化酶激酶γ2(phosphorylase kinase gamma 2,PHKG2)基因编码区,并对PHKG2基因功能进行初步探究。本研究利用RT-PCR法扩增从江香猪PHKG2基因完整CDS区。通过构建pEGFP-N3-PHKG2超表达载体,设计并合成4对针对从江香猪PHKG2基因的RNAi表达载体,瞬时转染至C2C12细胞株和从江香猪肾细胞中,以正常生长的细胞为空白对照,24h后检测各个重组载体的绿色荧光蛋白的表达情况。48h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR方法检测目的基因PHKG2和糖原代谢相关基因糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase,muscle form,PYGM)、肌肉糖原合成酶(glycogen synthase 1(muscle),GYS1)、磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyce rate mutase,PGAM2)基因mRNA的表达情况,并且测定各组细胞中的糖原含量。结果表明,经过双酶切、测序检测以及脂质体瞬时转染至C2C12细胞中,验证超表达载体pEGFP-N3-PHKG2和4对RNAi表达载体均构建成功。转染至从江香猪肾细胞后,相对于空白对照(Blank)和阴性对照(pEGFP-N3),超表达载体pEGFP-N3-PHKG2能极显著提高PHKG2基因的表达量(P<0.01),同时显著上调PGAM2、PYGM基因的表达量(P<0.05),并且显著降低细胞中糖原的含量(P<0.05)。各RNAi载体中,相对于空白对照(Blank)和阴性对照(NC),shRNA-1的干扰效率较高,极显著下调PHKG2基因的表达量(P<0.01),显著下调PGAM2、PYGM、GYS1基因的表达量(P<0.05),并且显著升高细胞中糖原含量(P<0.05)。shRNA-2极显著下调PHKG2基因的表达量(P<0.01);shRNA-3对PHKG2基因的表达也能起到显著的干扰作用(P<0.05);shRNA-4对于所检测的4个基因干扰效果不明显;shRNA-2、shRNA-3、shRNA-4转染细胞后,细胞中糖原含量升高水平不明显。PHKG2基因超表达和RNAi后可分别明显上调和抑制PHKG2、PYGM、PGAM2、GYS1基因的表达,并且分别降低和提高糖原含量,可能是影响从江香猪猪肉品质的重要候选基因,为进一步研究PHKG2基因在细胞糖原代谢通路中的作用机制奠定基础。 展开更多

关键词 从江香猪 PHKG2基因 超表达 RNA干扰

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绿色食品肉猪生产试验初报 被引量：1

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作者 徐彩龙 许厚强 +3 位作者 张勇 嵇辛勤 李金杰 杨春怒 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第1期143-145,共3页

利用开阳县当地盛产的玉米、米糠作为能量饲料,100头"大长杜"三元杂交仔猪,分2组进行饲养对比试验,试验组使用已获得国家绿色认证的云南省某公司生产的浓缩饲料,对照组使用市面常见的某厂家的浓缩饲料(无绿色认证),分别按配... 利用开阳县当地盛产的玉米、米糠作为能量饲料,100头"大长杜"三元杂交仔猪,分2组进行饲养对比试验,试验组使用已获得国家绿色认证的云南省某公司生产的浓缩饲料,对照组使用市面常见的某厂家的浓缩饲料(无绿色认证),分别按配方要求配制饲料,饲养125 d后,对测定各组日增重、料肉比、经济效益等指标进行分析,结果表明:试验组平均日增重比对照组提高5.23%,差异显著(P<0.05);料肉比比对照组低6.12%;饲养成本也有所降低。 展开更多

关键词 绿色食品 日增重 料肉比 经济效益

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关岭牛PPAP2B基因mRNA在不同组织中的表达分析

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作者 周萍 陈伟 +2 位作者 范瑞 秦媛 陈祥 《贵州畜牧兽医》 2020年第3期15-18,共4页

为了研究关岭牛PPAP2B基因mRNA在不同组织中的表达水平及相关功能,试验以关岭牛为实验动物,分别提取心脏、肝脏、小肠、脂肪、大腿肌、背最长肌组织的总RNA,以不同组织的总RNA为模板,逆转录合成cDNA,以GAPDH基因作为内参,应用实时荧光定... 为了研究关岭牛PPAP2B基因mRNA在不同组织中的表达水平及相关功能,试验以关岭牛为实验动物,分别提取心脏、肝脏、小肠、脂肪、大腿肌、背最长肌组织的总RNA,以不同组织的总RNA为模板,逆转录合成cDNA,以GAPDH基因作为内参,应用实时荧光定量PCR技术检测PPAP2B基因mRNA在不同组织中的相对表达量。结果:关岭牛PPAP2B基因mRNA在脂肪中表达量最高,在其他组织中表达量很少甚至几乎不表达。结论:PPAP2B基因可能在牛的脂肪沉积过程中发挥作用。 展开更多

关键词 关岭牛 PPAP2B基因 基因表达 逆转录定量PCR

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用Cre/LoxP和CRISPR基因工程技术构建猪肌肉生长抑制素双等位基因敲除细胞系 被引量：3

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作者 綦世金 毕延震 +6 位作者 刘西梅 华文君 郑新民 李奎 唐中林 华再东 陈彬 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期311-318,共8页

肌肉生长抑制素(myostatin,Mstn)基因失活可引起哺乳动物的肌肉增生,但其调控机制尚不清楚,且缺乏可靠的试验材料验证Mstn相关分子通路的变化。本研究所用PK3108细胞系是在野生型PK15细胞系的基础上成功靶向敲除一条等位基因,在其靶位... 肌肉生长抑制素(myostatin,Mstn)基因失活可引起哺乳动物的肌肉增生,但其调控机制尚不清楚,且缺乏可靠的试验材料验证Mstn相关分子通路的变化。本研究所用PK3108细胞系是在野生型PK15细胞系的基础上成功靶向敲除一条等位基因,在其靶位点敲入标记基因,敲除了204bp的外显子3序列,LoxP锚定在其标记基因两侧。利用Cre/LoxP重组酶删除系统删除插入PK3108Mstn靶位点的标记,借助流式细胞仪和荧光蛋白甄别得到无标记的过渡型细胞系PK3108-2。将Cas9/sgRNA表达载体和供体DNA共转染PK3108-2,借助G418抗性筛选和倒置荧光显微镜挑选出仅带阳性标记的克隆L18,对其基因组进行PCR产物凝胶电泳与PCR产物测序,证明克隆L18在预设位点发生同源重组;对其蛋白质进行Western印迹实验表明,Mstn被成功地敲除失活。综上结果证明,本研究实现了双等位基因的精准敲除,构建了Mstn双敲除梯度回复表达细胞系。本研究为揭示Mstn的作用机制提供理想的实验材料,也为双等位基因的敲除提供了可借鉴的技术路线。 展开更多

关键词 猪肌肉抑制素双等位基因敲除 CRISPR/Cas9 CRE/LOX P重组酶删除系统

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甲磺酸培氟沙星抑制大肠杆菌RecQ解旋酶的体外DNA结合、解链和ATPase活性 被引量：2

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作者 李坤 骆衡 +3 位作者 许厚强 陈祥 刘微 孟惠惠 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1133-1140,共8页

RecQ家族解旋酶是DNA解旋酶中高度保守的一个重要家族,参与DNA复制、修复、重组、转录及维持端粒稳定等细胞代谢过程,在维持染色体稳定性与完整性中起着重要作用.甲磺酸培氟沙星(pefloxacin mesylate,PFM)是一种新型氟喹诺酮类抗菌药物... RecQ家族解旋酶是DNA解旋酶中高度保守的一个重要家族,参与DNA复制、修复、重组、转录及维持端粒稳定等细胞代谢过程,在维持染色体稳定性与完整性中起着重要作用.甲磺酸培氟沙星(pefloxacin mesylate,PFM)是一种新型氟喹诺酮类抗菌药物,对一些革兰氏阴性菌具有明显的杀菌效果,临床上已广泛使用.本研究利用荧光偏振、自由磷检测技术研究PFM对大肠杆菌RecQ解旋酶的DNA结合活性、解链活性、ATPase活性的影响.结果表明,低浓度PFM可促进大肠杆菌RecQ解旋酶与ssDNA、dsDNA结合,达到一定量后PFM则抑制酶与DNA底物的结合,这种影响与DNA底物有关;PFM对RecQ解旋酶的DNA解链活性和ATP酶活性都具有抑制作用,但其抑制的效果有极显著差异(P<0.01):比较PFM对两种活性抑制的Ci值(对解链活性抑制的Ci值为(1.5±0.2)μmol/L,对ATP酶活性抑制的Ci值为(0.010±0.005)μmol/L)可知,PFM对大肠杆菌RecQ解旋酶ATPase活性的抑制强于其解链活性.这些结果可为研究以DNA解旋酶为药物靶标的分子机理奠定相关理论基础. 展开更多

关键词 甲磺酸培氟沙星 大肠杆菌RecQ解旋酶 生物活性 构象

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山羊肉质相关主效基因研究进展 被引量：6

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作者 陈滇黔 张华琦 韩勇 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期2507-2512,共6页

影响山羊肉质的指标很多,其中肌内脂肪(IMF)、肌肉嫩度、肌苷酸(IMP)是业界公认的部分主要指标。本文对IMF、肌肉嫩度、 IMP的相关主效基因脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)、心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)、钙... 影响山羊肉质的指标很多,其中肌内脂肪(IMF)、肌肉嫩度、肌苷酸(IMP)是业界公认的部分主要指标。本文对IMF、肌肉嫩度、 IMP的相关主效基因脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)、心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)、钙蛋白酶1(CAPN1)及钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)基因近年来的研究进展情况进行综述,以期为开展山羊肉质相关主效基因的研究及肉用性状选育提供一定的理论参考。 展开更多

关键词 山羊 肌内脂肪 肌肉嫩度 肌苷酸 主效基因

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牛SLC13家族基因编码蛋白的生物信息学分析 被引量：2

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作者 黄明捷 张勇 +4 位作者 陈祥 陈伟 莫先艇 郭勇 王天松 《河南农业科学》 北大核心 2020年第3期157-166,共10页

为研究牛溶质载体13(SLC13)基因编码蛋白的结构和功能,运用生物信息学软件对牛SLC13蛋白的理化性质、疏水性、二级结构及三级结构、序列保守基序、亚细胞定位、跨膜区进行分析,预测其蛋白质互作网络并构建不同物种SLC13基因家族编码蛋... 为研究牛溶质载体13(SLC13)基因编码蛋白的结构和功能,运用生物信息学软件对牛SLC13蛋白的理化性质、疏水性、二级结构及三级结构、序列保守基序、亚细胞定位、跨膜区进行分析,预测其蛋白质互作网络并构建不同物种SLC13基因家族编码蛋白的系统发育树.结果表明,牛SLC13蛋白的氨基酸数介于520~626个,亮氨酸含量最高,组氨酸含量最低,分子质量介于57.80~68.96 ku,其编码蛋白均为疏水性蛋白,除SLC13A2蛋白外的4个编码蛋白均为稳定蛋白.牛SLC13蛋白的二级结构主要由α-螺旋、β-转角以及无规卷曲组成,外显子数目介于11~16,除SLC13A3基因编码蛋白无Motif 10、SLC13A5基因编码蛋白无Motif 8外,其他编码蛋白序列均存在Motif 1—10,SLC13蛋白亚细胞定位于质膜、内质网和线粒体,SLC13A3蛋白在高尔基体中有少量分布.牛SLC13蛋白均为多次跨膜螺旋的内在膜蛋白,其以不同形式在生物学层面和分子功能层面发挥功能.系统进化分析发现,14个物种的SLC13A1、SLC13A4蛋白处于同一个较大分支,SLC13A2、SLC13A3和SLC13A5处于另一个较大分支,普通牛均与瘤牛、水牛、牦牛亲缘关系最近. 展开更多

关键词 牛SLC13基因家族 柠檬酸循环中间体 生物信息学分析 进化树 蛋白质互作

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长顺绿壳蛋鸡ITPR1基因RYDR-ITPR结构域的多态性对蛋壳品质的影响 被引量：3

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作者 游敏芳 吴磊 +4 位作者 廖朝美 张依裕 刘若余 谭光辉 李杰章 《河南农业科学》 北大核心 2020年第8期124-129,共6页

为了探究贵州特产长顺绿壳蛋鸡ITPR1基因RYDR-ITPR结构域的多态性对蛋壳品质的影响,采用在线引物设计软件Primer Premier 3.0设计1对引物,扩增ITPR1基因RYDR-ITPR结构域,利用双向直接测序和序列比对法挖掘单核苷酸多态性(SNP)位点,应用S... 为了探究贵州特产长顺绿壳蛋鸡ITPR1基因RYDR-ITPR结构域的多态性对蛋壳品质的影响,采用在线引物设计软件Primer Premier 3.0设计1对引物,扩增ITPR1基因RYDR-ITPR结构域,利用双向直接测序和序列比对法挖掘单核苷酸多态性(SNP)位点,应用SPSS 18.0软件分析SNP位点对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的影响。结果显示,在ITPR1基因第17~19内含子区共发现3个SNP位点,分别为位于18内含子上的g.18853584 G>T、g.18853600 A>G突变位点和19外显子上的g.18853848 C>T突变位点;3个SNP位点均为中度多态,均未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),共检测到4种单倍型和7种双倍型。关联分析结果显示,位于19外显子上的g.18853848 C>T突变对蛋壳厚度有显著影响,TT、CC基因型显著高于TC基因型(P<0.05);双倍型H3H3的蛋壳厚度和蛋壳强度测定值最高。综上,长顺绿壳蛋鸡ITPR1基因RYDR-ITPR结构域中g.18853848 C>T突变可能是影响蛋壳厚度的标记位点,双倍型H3H3可能是蛋壳厚度和蛋壳强度的有利双倍型。 展开更多

关键词 长顺绿壳蛋鸡 ITPR1基因 SNP RYDR-ITPR结构域 蛋壳品质

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