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miR⁃7靶向调控CTSK对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和迁移的影响
1
作者
刘彬
陆情梅
+3 位作者
杨永鲜
周明帅
温晓艳
赵佳福
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第2期429-435,共7页
【目的】探明miR⁃7与CTSK基因相互作用关系及其对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,为贵州黑山羊优良品种保藏、选育与开发利用提供依据。【方法】采用在线数据库筛选miR⁃7与CTSK基因3′UTR的结合靶点,通过将CTSK基因3′UTR插入...
【目的】探明miR⁃7与CTSK基因相互作用关系及其对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,为贵州黑山羊优良品种保藏、选育与开发利用提供依据。【方法】采用在线数据库筛选miR⁃7与CTSK基因3′UTR的结合靶点,通过将CTSK基因3′UTR插入双荧光素酶报告系统中进行互作位点检测;采用CCK⁃8和划痕试验检测miR⁃7是否靶向调控CTSK基因影响贵州黑山羊卵巢颗粒细胞的增殖和迁移;过表达miR⁃7后采用RT⁃qPCR检测其对促增殖蛋白PCNA、抗凋亡蛋白BCL2和促凋亡相关蛋白BAX、caspase⁃3、caspase⁃9表达水平的影响。【结果】成功构建CTSK基因3′⁃UTR 2个预测靶点的野生型和突变型双荧光素酶报告载体;双荧光素酶试验结果表明CTSK基因3′UTR区的2个预测靶位点均受miR⁃7调控;CCK⁃8和细胞划痕结果表明,转染miR⁃7试验组的卵巢颗粒细胞增殖和迁移能力均显著高于对照(NC)组;RT⁃qPCR结果表明,上调miR⁃7能极显著上调PCNA和BCL2的表达,抑制BAX、caspase⁃3和caspase⁃9的表达。【结论】miR⁃7可以靶向结合CTSK的3′UTR区2个靶位点并极显著抑制CTSK基因的表达;过表达miR⁃7可以显著促进贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和迁移能力,并促进增殖标志基因、抗凋亡基因的表达和抑制促凋亡相关基因的表达。研究结果可为进一步研究miR⁃7靶向调控CTSK表达影响贵州黑山羊繁殖性能的分子机制提供理论依据。
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关键词
贵州黑山羊
miRNA
CTSK
卵巢颗粒细胞
细胞增殖和迁移
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职称材料
威宁绵羊和贵州半细毛羊FecB基因SNP分析
被引量：
1
2
作者
王振
申小云
+2 位作者
盘道兴
谢海强
刘若余
《广东农业科学》
CAS
2016年第1期130-135,共6页
利用威宁绵羊和贵州半细毛羊构建DNA池,设计11对引物扩增其Fec B基因外显子和部分内含子的序列,对纯化后的PCR产物双向测序,分析确定多态性位点。然后利用生物信息学软件分析SNPs位点对Fec B基因RNA二级结构、Fec B蛋白结构的影响。结...
利用威宁绵羊和贵州半细毛羊构建DNA池,设计11对引物扩增其Fec B基因外显子和部分内含子的序列,对纯化后的PCR产物双向测序,分析确定多态性位点。然后利用生物信息学软件分析SNPs位点对Fec B基因RNA二级结构、Fec B蛋白结构的影响。结果显示,在扩增的Fec B基因中筛选到10个SNPs,其中exon5-A39G、exon9-C37A、exon11-C87A、intron2-A62G、intron4-A1023G、intron10-G24A突变为威宁绵羊和贵州半细毛羊中所共有,而exon9-A8G和intron1-G243A突变为威宁绵羊所特有,intron3-G177A和exon8-T86C突变为贵州半细毛羊所特有。上述的SNPs中,exon5-A39G和exon9-A8G为错义突变,exon5-A39G突变导致编码的异亮氨酸(Ile)变为缬氨酸(Val),exon9-A8G突变导致编码的天冬酰胺(Asn)变为天冬氨酸(Asp);exon9-C37A和exon11-C87A多态位点均未改变氨基酸的编码,为同义突变。
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关键词
FEC
B基因
威宁绵羊
贵州半细毛羊
单核苷酸多态性(SNP)
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职称材料
威宁绵羊IGF-1基因外显子多态性分析
被引量：
1
3
作者
刘标
易鸣
+6 位作者
张依裕
王振
程朝友
杨德文
程均华
付正仙
王进
《山地农业生物学报》
2017年第2期82-85,共4页
为了更好地保护和开发利用威宁绵羊这一优良地方品种,本实验利用威宁绵羊构建DNA池,设计4对引物扩增威宁绵羊IGF-1基因外显子及部分内含子序列。将PCR产物纯化并进行双向测序,通过DNAStar生物软件分析确定多态性位点。利用在线生物信息...
为了更好地保护和开发利用威宁绵羊这一优良地方品种,本实验利用威宁绵羊构建DNA池,设计4对引物扩增威宁绵羊IGF-1基因外显子及部分内含子序列。将PCR产物纯化并进行双向测序,通过DNAStar生物软件分析确定多态性位点。利用在线生物信息学软件分析多态位点对IGF-1基因RNA的二级结构、类胰岛素生长因子1的二级和三级结构的影响。结果表明,在扩增的IGF-1基因中筛选到3个SNPs:Intron1-A4387C、Exon2-T87C、Exon4-A27T,其中Exon4-A27T为错义突变,导致编码的精氨酸(Arg)变为丝氨酸(Ser);Exon2-T87C多态位点均未改变氨基酸的编码,为同义突变;Intron1-A4387C在内含子区,不参与氨基酸编码。
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关键词
威宁绵羊
IGF-1基因
SNPS
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职称材料
题名
miR⁃7靶向调控CTSK对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和迁移的影响
1
作者
刘彬
陆情梅
杨永鲜
周明帅
温晓艳
赵佳福
机构
贵州大学动物科学学院/贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第2期429-435,共7页
基金
贵州省科技计划项目(黔科合支撑〔2022〕一般089、黔科合支撑〔2022〕重点033)
国家级大学生创新创业训练计划项目(202110657012)。
文摘
【目的】探明miR⁃7与CTSK基因相互作用关系及其对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,为贵州黑山羊优良品种保藏、选育与开发利用提供依据。【方法】采用在线数据库筛选miR⁃7与CTSK基因3′UTR的结合靶点,通过将CTSK基因3′UTR插入双荧光素酶报告系统中进行互作位点检测;采用CCK⁃8和划痕试验检测miR⁃7是否靶向调控CTSK基因影响贵州黑山羊卵巢颗粒细胞的增殖和迁移;过表达miR⁃7后采用RT⁃qPCR检测其对促增殖蛋白PCNA、抗凋亡蛋白BCL2和促凋亡相关蛋白BAX、caspase⁃3、caspase⁃9表达水平的影响。【结果】成功构建CTSK基因3′⁃UTR 2个预测靶点的野生型和突变型双荧光素酶报告载体;双荧光素酶试验结果表明CTSK基因3′UTR区的2个预测靶位点均受miR⁃7调控;CCK⁃8和细胞划痕结果表明,转染miR⁃7试验组的卵巢颗粒细胞增殖和迁移能力均显著高于对照(NC)组;RT⁃qPCR结果表明,上调miR⁃7能极显著上调PCNA和BCL2的表达,抑制BAX、caspase⁃3和caspase⁃9的表达。【结论】miR⁃7可以靶向结合CTSK的3′UTR区2个靶位点并极显著抑制CTSK基因的表达;过表达miR⁃7可以显著促进贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和迁移能力,并促进增殖标志基因、抗凋亡基因的表达和抑制促凋亡相关基因的表达。研究结果可为进一步研究miR⁃7靶向调控CTSK表达影响贵州黑山羊繁殖性能的分子机制提供理论依据。
关键词
贵州黑山羊
miRNA
CTSK
卵巢颗粒细胞
细胞增殖和迁移
Keywords
Capra hircus
miRNA
CTSK
Ovarian granulosa cells
Cell proliferation and migration
分类号
S827 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
威宁绵羊和贵州半细毛羊FecB基因SNP分析
被引量：
1
2
作者
王振
申小云
盘道兴
谢海强
刘若余
机构
贵州大学动物科学学院/贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室
贵州
省扶贫办公室外资项目管理中心
西南科技
大学
生命
科学
院
出处
《广东农业科学》
CAS
2016年第1期130-135,共6页
基金
贵州省优秀教育人才省长专项(黔省专合字[2009]129)
国家现代农业产业技术体系(CARS-40-30)
文摘
利用威宁绵羊和贵州半细毛羊构建DNA池,设计11对引物扩增其Fec B基因外显子和部分内含子的序列,对纯化后的PCR产物双向测序,分析确定多态性位点。然后利用生物信息学软件分析SNPs位点对Fec B基因RNA二级结构、Fec B蛋白结构的影响。结果显示,在扩增的Fec B基因中筛选到10个SNPs,其中exon5-A39G、exon9-C37A、exon11-C87A、intron2-A62G、intron4-A1023G、intron10-G24A突变为威宁绵羊和贵州半细毛羊中所共有,而exon9-A8G和intron1-G243A突变为威宁绵羊所特有,intron3-G177A和exon8-T86C突变为贵州半细毛羊所特有。上述的SNPs中,exon5-A39G和exon9-A8G为错义突变,exon5-A39G突变导致编码的异亮氨酸(Ile)变为缬氨酸(Val),exon9-A8G突变导致编码的天冬酰胺(Asn)变为天冬氨酸(Asp);exon9-C37A和exon11-C87A多态位点均未改变氨基酸的编码,为同义突变。
关键词
FEC
B基因
威宁绵羊
贵州半细毛羊
单核苷酸多态性(SNP)
Keywords
Fec B gene
Weining sheep
Guizhou semi-fine wool sheep
single nucleotide polymorphism（SNP）
分类号
S813-3 [农业科学—畜牧学]
Q346.5 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
威宁绵羊IGF-1基因外显子多态性分析
被引量：
1
3
作者
刘标
易鸣
张依裕
王振
程朝友
杨德文
程均华
付正仙
王进
机构
贵州大学动物科学学院/贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室
贵州
省威宁县畜禽品种改良站
出处
《山地农业生物学报》
2017年第2期82-85,共4页
基金
2013年地方畜禽品种保护项目贵州省农委
文摘
为了更好地保护和开发利用威宁绵羊这一优良地方品种,本实验利用威宁绵羊构建DNA池,设计4对引物扩增威宁绵羊IGF-1基因外显子及部分内含子序列。将PCR产物纯化并进行双向测序,通过DNAStar生物软件分析确定多态性位点。利用在线生物信息学软件分析多态位点对IGF-1基因RNA的二级结构、类胰岛素生长因子1的二级和三级结构的影响。结果表明,在扩增的IGF-1基因中筛选到3个SNPs:Intron1-A4387C、Exon2-T87C、Exon4-A27T,其中Exon4-A27T为错义突变,导致编码的精氨酸(Arg)变为丝氨酸(Ser);Exon2-T87C多态位点均未改变氨基酸的编码,为同义突变;Intron1-A4387C在内含子区,不参与氨基酸编码。
关键词
威宁绵羊
IGF-1基因
SNPS
Keywords
Weining sheep
IGF- 1 gene
SNPs
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR⁃7靶向调控CTSK对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和迁移的影响
刘彬
陆情梅
杨永鲜
周明帅
温晓艳
赵佳福
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
威宁绵羊和贵州半细毛羊FecB基因SNP分析
王振
申小云
盘道兴
谢海强
刘若余
《广东农业科学》
CAS
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
威宁绵羊IGF-1基因外显子多态性分析
刘标
易鸣
张依裕
王振
程朝友
杨德文
程均华
付正仙
王进
《山地农业生物学报》
2017
1
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职称材料
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