鼠伤寒沙门氏菌孔蛋白突变株的致病性研究

1

作者 武绍碧 令狐远凤 +4 位作者 潘永 杨婉 陈世雄 叶景芬 杨琦 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期36-41,共6页

孔蛋白在免疫原和毒力决定因素方面有重要作用。为探究沙门氏菌中孔蛋白ompD、ompS、ompW基因突变是否对沙门氏菌的致病性产生影响,在构建鼠伤寒沙门氏菌孔蛋白突变株STM LT2ΔompD、STM LT2ΔompS、STM LT2ΔompW的基础上,测定了突变... 孔蛋白在免疫原和毒力决定因素方面有重要作用。为探究沙门氏菌中孔蛋白ompD、ompS、ompW基因突变是否对沙门氏菌的致病性产生影响,在构建鼠伤寒沙门氏菌孔蛋白突变株STM LT2ΔompD、STM LT2ΔompS、STM LT2ΔompW的基础上,测定了突变株对其小鼠致病性、体内遗传稳定性、LD 50、肝脏和脾脏载菌量。结果表明,标准菌株和突变株均对小鼠产生致病性,肝脏和脾脏体积明显增大;突变株在小鼠体内连续传代20次仍然能够稳定遗传;LD 50毒力测定发现突变株的毒力均呈现减弱趋势,其中突变株STM LT2ΔompS毒力减弱最为明显;肝脾载菌量测定发现,相比标准菌株,突变株在小鼠肝、脾上分布的细菌含量均明显减少。试验结果为鼠伤寒沙门氏菌减毒疫苗开发奠定基础,也可为探讨鼠伤寒沙门氏菌致病作用的分子机制提供参考。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门氏菌 孔蛋白 致病性

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贵州省H7亚型禽流感病毒感染的血清学和病原学分析 被引量：3

2

作者 徐茂文 张华 +3 位作者 李涛 张霞 周碧君 文明 《动物医学进展》 北大核心 2015年第6期159-162,共4页

为了解贵州省近几年H7亚型禽流感病毒感染情况,分别采集鸡血清3 031份、卵黄962份、咽-肛拭子1 607份、环境土壤拭子394份及野鸟粪便122份样本共计6 116份,采用血凝抑制试验(HI)和实时荧光定量RT-PCR方法进行H7亚型禽流感病毒特异性抗... 为了解贵州省近几年H7亚型禽流感病毒感染情况,分别采集鸡血清3 031份、卵黄962份、咽-肛拭子1 607份、环境土壤拭子394份及野鸟粪便122份样本共计6 116份,采用血凝抑制试验(HI)和实时荧光定量RT-PCR方法进行H7亚型禽流感病毒特异性抗体和核酸检测。结果显示,在鸡血清和卵黄样本中,H7亚型禽流感表达特异性抗体的阳性率分别为1.2%(37/3 031)和2.3%(22/962);在2 123份鸡咽-肛拭子、环境样本和野鸟粪便中,均未检测出H7亚型禽流感病毒核酸。这些结果表明贵州省家禽、野鸟和环境土壤中尚未发现H7亚型禽流感病毒感染。 展开更多

关键词 H7亚型禽流感病毒 病原 调查

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贵州省羔羊死亡原因调查分析 被引量：2

3

作者 张霞 张华 +1 位作者 罗卫星 文明 《动物医学进展》 北大核心 2015年第10期130-134,共5页

为明确近年来贵州省山羊养殖场羔羊死亡原因,项目组于2013年9月至2014年8月先后深入6个地(州、市)72个山羊养殖场进行实地调查,采集死亡羔羊病料样本进行病原分离鉴定和收集血清样本进行抗体检测,结果显示,调查羊场羔羊总存栏3 735只,... 为明确近年来贵州省山羊养殖场羔羊死亡原因,项目组于2013年9月至2014年8月先后深入6个地(州、市)72个山羊养殖场进行实地调查,采集死亡羔羊病料样本进行病原分离鉴定和收集血清样本进行抗体检测,结果显示,调查羊场羔羊总存栏3 735只,死亡羔羊779只,死亡率20.86%,其中羔羊在冬、春、夏、秋四季的死亡率相应为14.16%、3.75%、0.91%和2.03%;引进品种山羊产羔的死亡率为31.86%,本地品种山羊为12.91%;疾病感染因素导致羔羊死亡占61.36%,母羊繁殖因素占20.80%,饲养管理因素占17.84%;从37只死亡羔羊分离鉴定出来的病原主要是大肠埃希菌、产气荚膜梭菌、肺炎链球菌和绵羊肺炎支原体,检出率分别为64.86%、29.73%、24.32%和18.92%。这些结果表明,引起贵州省羔羊死亡的原因较多,应采取综合防治措施,才能有效控制羔羊死亡的发生。 展开更多

关键词 羔羊 死亡原因 调查分析

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携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌诱导山羊免疫应答研究 被引量：1

4

作者 熊朝丽 张华 +3 位作者 程振涛 周碧君 王开功 文明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1970-1975,共6页

为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌诱导山羊免疫应答效果,将60只健康黑山羊随机分为3组,即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱毒疫苗,空白对照组不作任何处理;于... 为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌诱导山羊免疫应答效果,将60只健康黑山羊随机分为3组,即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱毒疫苗,空白对照组不作任何处理;于不同时间段采集山羊血液、呼吸道/消化道分泌液及组织样本进行检测。结果:(1)在免疫后7、15、30和45d的山羊消化道特异性SIgA含量中,重组细菌组明显高于弱毒疫苗组(P<0.05),45d时到达最高值(18.172±0.122)μg·L-1;(2)在诱导产生特异性P32抗体上,重组细菌组略低于弱毒疫苗组,但差异不明显(P>0.05);(3)在特异性淋巴细胞转化效率上,免疫15d前重组细菌组略低于弱毒疫苗组,但免疫30d后重组细菌组高于弱毒疫苗组,但差异均不显著(P>0.05);(4)在诱导产生特异性细胞因子方面,重组细菌组山羊血清IL-2含量低于弱毒疫苗组,差异极显著(P<0.01),血清IL-5含量高于弱毒疫苗组,差异极显著(P<0.01),血清TNF-β高于弱毒疫苗组,差异显著(P<0.05),而血清IFN-γ和TNF-α含量与弱毒疫苗组差异不显著(P>0.05)。上述结果表明,构建的携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门菌能诱导山羊产生较好的免疫应答反应。 展开更多

关键词 重组减毒沙门菌 免疫应答 山羊

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猪繁殖与呼吸综合征病毒不同基因扩增效果的比较研究 被引量：1

5

作者 史开志 汪德生 +3 位作者 王开功 周碧君 李永明 文明 《中国动物检疫》 CAS 2009年第2期28-30,34,共4页

从PRRSV-ZB病毒株感染细胞培养物提取总RNA样本,以Oligo(dT)反转录后,针对PRRSVN、M和GP5基因进行PCR扩增。结果表明:N基因扩增效果明显高于GP5和M基因(p<0.05),N、M、GP5基因的最小检测量分别为0.1ug,0.1ug和0.4ug。对N、M和GP5基... 从PRRSV-ZB病毒株感染细胞培养物提取总RNA样本,以Oligo(dT)反转录后,针对PRRSVN、M和GP5基因进行PCR扩增。结果表明:N基因扩增效果明显高于GP5和M基因(p<0.05),N、M、GP5基因的最小检测量分别为0.1ug,0.1ug和0.4ug。对N、M和GP5基因的稳定性或保守性进行分析可见,M和N基因相对保守,GP5基因相对变异较大。本实验以N基因作目的基因,对11个临床发病猪场进行PRRS病原核酸检测,均扩增出377bp特异性条带。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N基因 M基因 GP5基因 扩增效果

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三穗麻鸭Cofilin2基因序列分析及其组织表达研究

6

作者 华敏 贺欣薇 +3 位作者 万润 程振涛 周碧君 文明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期858-865,共8页

为探究三穗麻鸭丝切蛋白2(Cofilin2)基因特征及其在鸭组织中的表达规律,试验根据GenBank中鸡Cofilin2基因序列设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增获得目的基因,利用生物信息学软件分析三穗麻鸭Cofilin2基因特征,实时荧光定量PCR方法检测... 为探究三穗麻鸭丝切蛋白2(Cofilin2)基因特征及其在鸭组织中的表达规律,试验根据GenBank中鸡Cofilin2基因序列设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增获得目的基因,利用生物信息学软件分析三穗麻鸭Cofilin2基因特征,实时荧光定量PCR方法检测Cofilin2基因在三穗麻鸭不同组织中的表达情况。结果显示,三穗麻鸭Cofilin2基因编码区大小为498bp,可编码166个氨基酸;三穗麻鸭Cofilin2基因序列与鸡、猕猴、牛、小鼠、安大略鲑、人和猪相应序列的同源性分别为94.4%、91.6%、91.6%、87.6%、77.7%、70.5%和69.5%;系统进化树显示,Cofilin2基因在不同物种进化过程中高度保守;Cofilin2基因编码蛋白的二级结构由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲组成,三级结构呈弯曲螺旋结构;实时荧光定量PCR检测显示,三穗麻鸭Cofilin2基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、胸腺、十二指肠、腿肌和法氏囊等组织器官中均有不同程度表达,其中心脏中表达量最高,法氏囊中表达量最低。本试验结果为三穗麻鸭抗病分子机理研究奠定了基础。 展开更多

关键词 三穗鸭 Cofilin2基因 克隆 实时荧光定量PCR

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贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定、毒力基因检测及耐药性分析 被引量：10

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作者 吴征卓 陈国权 +7 位作者 姚碧琼 施大军 阎朝华 王娜 王开功 周碧君 程振涛 文明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第11期4274-4283,共10页

为了解贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的流行血清型、毒力和耐药情况,本试验从贵州省三穗县6个规模养鸭场临床疑似RA感染的病鸭体内分离出6株分离菌,对病原菌进行分离鉴定、毒力基因检测和耐药性分析。细菌... 为了解贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的流行血清型、毒力和耐药情况,本试验从贵州省三穗县6个规模养鸭场临床疑似RA感染的病鸭体内分离出6株分离菌,对病原菌进行分离鉴定、毒力基因检测和耐药性分析。细菌分离鉴定结果显示,分离菌在巧克力琼脂培养基上长出表面光滑、圆形半透明的滴状菌落;革兰氏染色呈阴性短小杆菌,瑞氏染色呈两极浓染;分离菌均不具运动性,尿素、触酶和氧化酶试验均为阳性,符合RA生化特性,将6株分离菌分别命名为SS-RA1~SS-RA6;6株分离菌的16S rRNA基因序列与NCBI上RA参考菌株的基因序列相似性≥98%,说明6株分离菌均是RA;SS-RA1~SS-RA4为血清2型且含有8种毒力基因(OmpA、CAMP、wza、AS87_04050、Fur、SIP、TbdR1和luxE基因),SS-RA5和SS-RA6为血清11型,缺失AS87_04050基因,仅含有上述其余7种毒力基因;动物回归试验结果显示,攻毒组雏鸭均全部死亡,对照组雏鸭未表现明显临床症状,表明6株分离菌对雏鸭均有致病力;药敏试验结果显示,6株分离菌仅对羧苄西林、哌拉西林、头孢他啶、头孢氨苄、头孢曲松、头孢拉定和头孢哌酮7种抗菌药物敏感,对其他13种抗菌药物均表现不同程度的耐药,对氨基糖苷类和大环内酯类抗菌药物的耐药率为100%。本试验成功分离得到6株RA,为贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌病的疫苗选择和药物防治提供理论依据。 展开更多

关键词 鸭疫里默氏杆菌 分离鉴定 毒力基因 耐药性分析

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贵州省部分地区H7亚型禽流感监测与分析 被引量：3

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作者 秦雯 郑敏 +2 位作者 华敏 万润 文明 《中国兽药杂志》 北大核心 2017年第2期13-15,共3页

为了解贵州省H7亚型禽流感感染情况,采用HI试验对全省9个地区家禽血清样本进行血清抗体检测,PT-PCR方法对家禽咽-肛拭子、养禽场环境样本和野鸟粪便进行病原核酸检测。结果显示:在1570份家禽血清样本中,H7亚型禽流感血清抗体阳性率为0.4... 为了解贵州省H7亚型禽流感感染情况,采用HI试验对全省9个地区家禽血清样本进行血清抗体检测,PT-PCR方法对家禽咽-肛拭子、养禽场环境样本和野鸟粪便进行病原核酸检测。结果显示:在1570份家禽血清样本中,H7亚型禽流感血清抗体阳性率为0.45%(7/1570);在350份家禽咽-肛拭子和310份养殖场环境样本中,均未检测出H7亚型禽流感病毒核酸;在160份野鸟粪便中,有1份为H7亚型禽流感病毒核酸阳性,阳性率为0.63%(1/160)。试验提示,在贵州省养禽场中不存在H7亚型禽流感感染,但迁徙野禽中可能存在H7亚型禽流感隐性感染,应当引起重视。 展开更多

关键词 H7亚型禽流感 监测 贵州省

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坡岗自然保护区畜禽遗传资源调查研究 被引量：1

9

作者 刘妍罕 胡安东 +1 位作者 李宝贵 文明 《中国畜禽种业》 2021年第2期29-31,共3页

为摸清兴义市坡岗自然保护区畜禽遗传资源状况,挖掘畜禽特色乡土品种资源,本次考察采取收集整理历史资料、随机抽样调查、走访当地农户和分类统计相结合方式,对兴义市坡岗自然保护区所辖绒窝村、大菁村、岩峰村、郑屯村等的畜禽品种组... 为摸清兴义市坡岗自然保护区畜禽遗传资源状况,挖掘畜禽特色乡土品种资源,本次考察采取收集整理历史资料、随机抽样调查、走访当地农户和分类统计相结合方式,对兴义市坡岗自然保护区所辖绒窝村、大菁村、岩峰村、郑屯村等的畜禽品种组成、品系特征及资源存量分布进行调查。结果显示:该辖区畜禽分属2纲3目4科7属,主要品种有西门塔尔牛、贵州黑山羊、长白猪、杜洛克猪、四川白鹅、兴义鸭、瘤头鸭以及本地土鸡等,其中存栏牛1341头、羊78只、猪3457头、家禽13853羽。这次调查为兴义市坡岗自然保护区建设规划提供畜禽品种资源的基础资料。 展开更多

关键词 坡岗自然保护区 畜禽遗传资源 调查

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猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州流行株ORF5序列变异分析

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作者 方英 毛君婷 +4 位作者 史开志 王开功 周碧君 汪德生 文明 《山地农业生物学报》 2009年第1期36-40,共5页

通过RT—PCR扩增9株贵州省PRRSV流行毒株的ORF5基因，并将其连接到pMD18-T载体进行克隆测序得到目的基因序列。参考国内外毒株，分析其变异特点。结果表明，9株PRRSV贵州流行株都属于美洲型毒株，其ORF5序列之间同源性为99．5％～100．... 通过RT—PCR扩增9株贵州省PRRSV流行毒株的ORF5基因，并将其连接到pMD18-T载体进行克隆测序得到目的基因序列。参考国内外毒株，分析其变异特点。结果表明，9株PRRSV贵州流行株都属于美洲型毒株，其ORF5序列之间同源性为99．5％～100．0％。以GZCJ株为贵州省代表毒株，与美洲型参考毒株之间的同源性为89．7％～98．7％，与近年流行的毒株遗传距离较近，与早期流行毒株遗传距离较远，其发生了大量点突变。 展开更多

关键词 贵州省 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5序列 点突变 变异分析

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猪胸膜肺炎放线杆菌PCR分群研究

11

作者 李健华 周碧君 +2 位作者 文明 王开功 汪德生 《山地农业生物学报》 2009年第1期83-86,共4页

关键词 传染性胸膜肺炎放线杆菌 外膜脂蛋白A PCR 血清群

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饲喂发酵红薯渣饲料对鲤鱼生长性能、肠道形态及非特异性免疫的影响

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作者 张晨旭 王微 +7 位作者 曾成容 刘馨 杨芸芸 冯轶 陈江凤 姜海波 杨颖 文明 《中国饲料》 北大核心 2024年第13期109-115,共7页

为探究发酵红薯渣饲料对鲤鱼生长性能、肠道形态和非特异性免疫的影响,本试验利用益生菌发酵红薯渣后,按照添加比例0%、10%、20%和30%配制饲料,即对照组、10%添加组、20%添加组和30%添加组,分别投喂初始体重为(408.36±26.12)g鲤鱼... 为探究发酵红薯渣饲料对鲤鱼生长性能、肠道形态和非特异性免疫的影响,本试验利用益生菌发酵红薯渣后,按照添加比例0%、10%、20%和30%配制饲料,即对照组、10%添加组、20%添加组和30%添加组,分别投喂初始体重为(408.36±26.12)g鲤鱼,每组3个重复,每个重复10尾,试验期为42 d,测定试验鱼的生长性能、血清抗氧化指标和非特异性免疫指标以及切片观察免疫器官与肠道结构形态。结果显示:(1)与对照组比较,10%添加组和20%添加组鲤鱼特定增长率分别提高37.45%和40.17%(P <0.05)。(2)与对照组比较,10%添加组、20%添加组和30%添加组鲤鱼肠绒毛长度、肠绒毛长度/隐窝深度(V/C)和肌层厚度均极显著增加(P <0.01)。(3)与对照组比较,20%添加组鲤鱼脾脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量显著增加27.99%(P <0.05),30%添加组鲤鱼血清丙二醛含量显著降低29.55%(P <0.05),10%添加组和30%添加组鲤鱼脾脏溶菌酶(LZM)水平均显著降低(P <0.05)。(4)与对照组比较,20%添加组脾脏IFN-γ含量分别降低25.84%(P <0.05),30%添加组鲤鱼肾脏IL-1β含量显著提高27.84%(P <0.05)。上述结果表明,发酵红薯渣能改善鲤鱼肠道形态结构,促进营养物质消化吸收和增强非特异性免疫,从而利于鲤鱼生长,其中添加20%的发酵红薯渣效果最佳。 展开更多

关键词 鲤鱼 发酵红薯渣 生长性能 肠道形态 非特异性免疫

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oppCDF基因缺失对鼠伤寒沙门菌致病性的影响

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作者 叶景芬 张家莉 +3 位作者 陈世雄 杨婉 武绍碧 杨琦 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3519-3527,共9页

[目的]沙门菌是常见的人畜共患病原菌,可引发多种食源性疾病,鼠伤寒沙门菌是沙门菌的重要血清型之一,具有重要的公共卫生研究意义。本试验旨在研究转运蛋白相关基因oppCDF对鼠伤寒沙门菌生物特性的影响,为新型沙门菌减毒疫苗的制备提供... [目的]沙门菌是常见的人畜共患病原菌,可引发多种食源性疾病,鼠伤寒沙门菌是沙门菌的重要血清型之一,具有重要的公共卫生研究意义。本试验旨在研究转运蛋白相关基因oppCDF对鼠伤寒沙门菌生物特性的影响,为新型沙门菌减毒疫苗的制备提供理论基础。[方法]本试验通过比较鼠伤寒沙门菌野生株及已成功构建的oppCDF基因缺失株的生化特性、遗传稳定性、耐药性、黏附性、侵袭力、半数致死量(LD_(50))及小鼠肝脏、脾脏载菌量,分析oppCDF基因与鼠伤寒沙门菌生物特性之间的关系。[结果]oppC、oppD和oppF基因分别缺失后鼠伤寒沙门菌生化特性未发生明显改变且能稳定遗传,表明oppCDF基因表型未发生变化;与野生株STM LT2相比,基因缺失株STM LT2ΔoppC对红霉素变为敏感、氯霉素敏感性降低,STM LT2ΔoppD对头孢氨苄敏感性降低,STM LT2ΔoppF对复方新诺明敏感性增强,3株基因缺失株均对氨苄西林不敏感。3株基因缺失株LD_(50)检测结果显示,与野生株STM LT2相比,STM LT2ΔoppC毒力下降,但STM LT2ΔoppD、STM LT2ΔoppF毒力分别上升1.6和8.6倍;STM LT2ΔoppC的黏附性显著降低(P<0.05),侵袭力降低,定植力极显著下降(P<0.01);STM LT2ΔoppD的黏附性、侵袭力降低,但定植力极显著上升(P<0.01);STM LT2ΔoppF的黏附性显著降低(P<0.05),但侵袭力显著增强(P<0.05),定植力极显著上升(P<0.01)。[结论]oppC基因缺失可降低鼠伤寒沙门菌的致病性,但oppD、oppF基因缺失可增强鼠伤寒沙门菌的致病性,以上结果为沙门菌的致病机制研究提供了理论基础。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 oppCDF基因 生物学特性 致病性

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三带喙库蚊携带猪繁殖与呼吸综合征病毒的初步证实 被引量：9

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作者 史开志 毛君婷 +3 位作者 王开功 周碧君 文明 李永明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期280-284,共5页

从3个临床发病猪场采集三带喙库蚊提取RNA样本,采用针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NSP2基因设计的引物进行RT-PCR检测,并进行克隆、测序和序列分析;同时取三带喙库蚊匀浆上清接种Marc-145细胞进行PRRSV的分离与鉴定。结果表明:从三... 从3个临床发病猪场采集三带喙库蚊提取RNA样本,采用针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NSP2基因设计的引物进行RT-PCR检测,并进行克隆、测序和序列分析;同时取三带喙库蚊匀浆上清接种Marc-145细胞进行PRRSV的分离与鉴定。结果表明:从三带喙库蚊提取的3份RNA样品均扩增出大小约为1 060 bp的特异性DNA条带,其序列与从相应猪场病猪分离得到的猪源PRRSV毒株高度同源,与国内参考株CH-1a株相应序列比较均缺失90个碱基。将3份三带喙库蚊匀浆上清接种Marc-145细胞后,均可观察到明显的细胞病变;以间接免疫荧光试验进行检测,可观察到培养细胞内的特异性荧光;采用RT-PCR反应可检出培养细胞内的PRRSV核酸。上述试验证实,三带喙库蚊可携带PRRSV,可能是引起PRRS传播与流行的重要途径之一。 展开更多

关键词 三带喙库蚊 猪繁殖与呼吸综合征病毒 RT—PCR检测 分离 鉴定

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奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：9

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作者 寨鸿瑞 田甜 +2 位作者 王开功 周碧君 文明 《动物医学进展》 CSCD 2008年第11期40-43,共4页

为了解贵阳市某乳业有限公司奶牛场隐性乳房炎流行情况及其主要病原菌,采用CMT方法检出隐性乳房炎乳样后,对阳性乳样进行细菌分离与鉴定,同时对其主要病原菌进行了体外药敏试验。结果表明,该公司奶牛场隐性乳房炎的感染率为40%,主要病... 为了解贵阳市某乳业有限公司奶牛场隐性乳房炎流行情况及其主要病原菌,采用CMT方法检出隐性乳房炎乳样后,对阳性乳样进行细菌分离与鉴定,同时对其主要病原菌进行了体外药敏试验。结果表明,该公司奶牛场隐性乳房炎的感染率为40%,主要病原菌为葡萄球菌属和链球菌属细菌,其敏感的抗菌药物有先锋V霉素、利福平、丙氟哌酸、氟哌酸、新霉素、卡那霉素、庆大霉素等,经临床用药观察,有效地控制了该公司奶牛场隐性乳房炎。 展开更多

关键词 奶牛 隐性乳房炎 细菌 鉴定 药敏试验

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鸡马立克病病毒强毒与疫苗毒PCR鉴别检测方法的建立 被引量：8

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作者 汪德生 罗明星 +2 位作者 史开志 曾佑玲 李永明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第7期26-30,共5页

在Ⅰ型马立克病病毒（MDV）基因组中针对132 bp串联重复序列的两侧合成一对引物,应用PCR技术对临床病例采集的疑似马立克病肿瘤病变鸡肝组织和1日龄接种CVI988弱毒疫苗的健康雏鸡羽髓样本进行检测。结果表明,从临床病例采集的10份肝脏组... 在Ⅰ型马立克病病毒（MDV）基因组中针对132 bp串联重复序列的两侧合成一对引物,应用PCR技术对临床病例采集的疑似马立克病肿瘤病变鸡肝组织和1日龄接种CVI988弱毒疫苗的健康雏鸡羽髓样本进行检测。结果表明,从临床病例采集的10份肝脏组织,7份扩增出一条314 bp的条带,相当于2个拷贝数的132 bp串联重复序列;在接种疫苗健康雏鸡的羽髓样本中,扩增出与CVI988弱毒一致的PCR图谱,相当于6个~8个或更多拷贝数的132 bp串联重复序列。根据PCR图谱的差异即可鉴别MDV强毒株与CVI988疫苗弱毒株。 展开更多

关键词 马立克病病毒 CVI988弱毒疫苗 PCR

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禽淋巴细胞性白血病的诊断与病毒亚群鉴定 被引量：6

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作者 罗明星 周碧君 +6 位作者 李永明 汪德生 史开志 杨峰 赵航 袁圣 付鸣剑 《中国动物检疫》 CAS 2009年第3期35-37,共3页

采用病理组织学方法对某商品蛋鸡场送检的发病鸡进行实验室诊断,在肿胀的肝、脾、肾和法氏囊组织切片中观察到成淋巴细胞增生病变。使用禽白血病A、B亚群抗体检测试剂盒对血清样本进行间接ELISA试验,抗体阳性率达到44.4%(12/27)。采集1... 采用病理组织学方法对某商品蛋鸡场送检的发病鸡进行实验室诊断,在肿胀的肝、脾、肾和法氏囊组织切片中观察到成淋巴细胞增生病变。使用禽白血病A、B亚群抗体检测试剂盒对血清样本进行间接ELISA试验,抗体阳性率达到44.4%(12/27)。采集12只病死鸡的肝脏材料提取DNA样本,11份样本中扩增出ALV-A亚群特异性的病原核酸(691bp),检出率达到91.6%(11/12)。将扩增的目的基因克隆与测序,截取gp85基因片段可变区序列与ALV-A、B、C、D和E亚群参考毒株的相应序列进行比较,同源性分别达到89.0-89.6%、67.1-67.7%、69.1-70.1%、69.1-69.5%和70.9-72.0%。结果证实本次疫病是由ALV-A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病。 展开更多

关键词 禽白血病病毒 A亚群 血清学检测 病理组织学检查 PCR鉴定 淋巴细胞性白血病

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敲除小RNA gcvB后沙门菌的转录组分析 被引量：2

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作者 刘丽娟 董然然 +6 位作者 王开功 程振涛 文明 温贵兰 李晨 杨琦 周碧君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期840-850,共11页

为筛选与沙门菌小RNA gcvB相关的靶基因,采用高通量的转录组测序(RNA-seq)技术对野生型沙门菌和敲除小RNA gcvB沙门菌的mRNA进行对比分析,全面地预测GcvB的靶基因的数量与种类,通过GO和KEGG数据库对筛选基因进行比对注释,进一步分析筛... 为筛选与沙门菌小RNA gcvB相关的靶基因,采用高通量的转录组测序(RNA-seq)技术对野生型沙门菌和敲除小RNA gcvB沙门菌的mRNA进行对比分析,全面地预测GcvB的靶基因的数量与种类,通过GO和KEGG数据库对筛选基因进行比对注释,进一步分析筛选基因的主要功能及涉及的生物过程。并利用荧光定量PCR对部分差异表达基因进行验证。结果显示:差异表达基因共1 244个,其中基因表达上调678个,基因表达下调566个。GO富集分析显示,差异表达基因主要涉及氧化还原活性、铁离子结合、运动活性等分子功能,细菌鞭毛的细胞成分,细胞呼吸、钴胺素代谢过程和钴胺素生物合成过程等生物过程。KEGG数据库分析显示,差异表达基因主要参与细菌趋化性、卟啉和叶绿素代谢、不同环境中的微生物代谢、双组分系统、甲烷代谢等14个信号通路。对筛选出的10个差异表达基因进行荧光定量PCR验证,结果显示:差异表达基因相对表达量与RNA-seq测序结果基本一致。本研究为进一步探明小RNA gcvB与靶基因相互作用、小RNA的调控机制,以及沙门菌致病机制奠定了基础。 展开更多

关键词 沙门菌 小RNAgcvB 转录组测序 靶基因

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山羊痘病毒诱导BHK-21细胞凋亡的检测 被引量：2

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作者 程振涛 岳筠 +5 位作者 周碧君 王开功 文明 李永明 许乐仁 朱时杰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期49-54,共6页

为验证山羊痘病毒诱导BHK-21细胞出现凋亡现象的存在,分别采用HE染色、凋亡试剂盒检测、流式细胞仪检测和DNA Ladder检测,对山羊痘病毒感染的BHK-21细胞培养物进行细胞凋亡检测。不同方法检测结果均显示,山羊痘病毒感染BHK-21细胞组相... 为验证山羊痘病毒诱导BHK-21细胞出现凋亡现象的存在,分别采用HE染色、凋亡试剂盒检测、流式细胞仪检测和DNA Ladder检测,对山羊痘病毒感染的BHK-21细胞培养物进行细胞凋亡检测。不同方法检测结果均显示,山羊痘病毒感染BHK-21细胞组相同时间细胞凋亡数明显高于对照组。表明山羊痘病毒可诱导BHK-21细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 山羊痘病毒 BHK-21细胞 细胞凋亡 检测

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猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查与RT-PCR鉴定 被引量：10

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作者 史开志 王开功 +5 位作者 杨鹤峰 岳筠 徐春志 韩健保 罗阿东 周思旋 《山地农业生物学报》 2007年第5期403-408,共6页

对贵州省11个猪场出现的疑似猪繁殖与呼吸综合征病例进行流行病学调查和病原RT-PCR鉴定,结果表明,发病仔猪主要表现高热,死亡率为40.35%(642/1 591);3个种猪场的待产母猪群发生繁殖障碍,流产率为8.11%(38/469);成年猪群发病率为24.47%(1... 对贵州省11个猪场出现的疑似猪繁殖与呼吸综合征病例进行流行病学调查和病原RT-PCR鉴定,结果表明,发病仔猪主要表现高热,死亡率为40.35%(642/1 591);3个种猪场的待产母猪群发生繁殖障碍,流产率为8.11%(38/469);成年猪群发病率为24.47%(162/662),死亡率为4.35%(30/662);感染猪群PRRS血清抗体平均阳性率为28.12%(45/160)。对病死猪病料进行PRRS病原核酸鉴定,其平均检出率为84.44%(38/45),变异毒株试剂盒检测显示,11个临床发病猪场病例是由变异毒株引起的高致病性猪繁殖与呼吸综合征。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 流行病学 血清抗体 RT-PCR 核酸鉴定

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