贵州地方猪骨骼肌中3种microRNAs的表达差异 被引量：3

1

作者 刘畅 罗志宇 +1 位作者 冉雪琴 王嘉福 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2014年第3期112-116,共5页

为探明miR-1、miR-133、miR-206基因在不同品种猪肌肉组织中的表达及其与屠宰性能间的关系,以6月龄大白猪、糯谷猪、关岭猪及黔南黑猪的背最长肌为材料,采用实时荧光定量PCR方法,研究了3种microRNAs(miRNAs)在贵州地方猪种和大白猪背最... 为探明miR-1、miR-133、miR-206基因在不同品种猪肌肉组织中的表达及其与屠宰性能间的关系,以6月龄大白猪、糯谷猪、关岭猪及黔南黑猪的背最长肌为材料,采用实时荧光定量PCR方法,研究了3种microRNAs(miRNAs)在贵州地方猪种和大白猪背最长肌中的表达差异。结果表明:成年期miR-133的表达量高于另外2种miRNA分子。miR-133在糯谷猪中的表达量是大白猪的1.58倍(P<0.05),与其眼肌面积、花油重高度负相关,与屠宰率高度正相关。miR-206在糯谷猪中的表达量是大白猪的2.23倍(P<0.05),与其瘦肉率高度负相关,与板油重中度正相关。在关岭猪背最长肌中miR-133的表达量最高,是大白猪的2.67倍(P<0.05),miR-133和miR-206的表达量与眼肌面积、胴体重高度正相关,与花油重、板油重和脂肪比负相关;但miR-206的表达量明显低于其他猪种。不同品种猪中miR-133和miR-206存在差异表达,对地方猪品种的骨骼肌生长和脂肪沉积有一定的调节作用。 展开更多

关键词 MIR-1 miR-133 miR-206 贵州地方猪种 MIR-1 miR-133 miR-206

在线阅读 下载PDF 职称材料

转基因作物标记蛋白潜在致敏性的生物信息学预测 被引量：4

2

作者 赵杰宏 韩洁 赵德刚 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2010年第3期76-79,共4页

转基因作物表达的标记蛋白带来潜在致敏性顾虑。根据FAO/WHO决策方案,使用SDAP、Farrp和NCBI三大数据库对GUS、NptII和OPH的潜在致敏性进行评估。在线Blast或Fasta发现,OPH、GUS和NptII全序列或连续80aa的匹配性皆不存在致敏性可能。连... 转基因作物表达的标记蛋白带来潜在致敏性顾虑。根据FAO/WHO决策方案,使用SDAP、Farrp和NCBI三大数据库对GUS、NptII和OPH的潜在致敏性进行评估。在线Blast或Fasta发现,OPH、GUS和NptII全序列或连续80aa的匹配性皆不存在致敏性可能。连续6aa比对中,OPH有2个片段与大豆、小麦和橡胶树的前纤维蛋白或德国蟑螂过敏原相关蛋白存在序列一致;GUS有1个片段与埃及伊蚊唾液腺过敏原存在序列一致;NptII有1个片段与摇蚊血红蛋白过敏原存在序列一致,但匹配的6aa序列皆未在各蛋白抗原性决定部位,是假阳性结果。初步证明转基因植物表达的GUS、NptII和OPH不具有潜在的致敏性风险。 展开更多

关键词 遗传转化 标记蛋白 致敏性 生物信息学

在线阅读 下载PDF 职称材料

贵州苦丁茶新梢中可溶性糖含量变化分析 被引量：5

3

作者 罗大英 朱冬雪 杨远庆 《山地农业生物学报》 2003年第3期230-232,共3页

对贵州苦丁茶中的主要可溶性糖进行了研究。结果表明,苦丁茶各部位可溶性总糖含量为1 65～11 48g/100g,新梢的可溶性总糖含量为8 47～14 27g/100g,其中蔗糖为3 08～6 17g/100g,还原糖为1 78～3 92g/100g,果糖为0 76～1 47g/100g,前两者... 对贵州苦丁茶中的主要可溶性糖进行了研究。结果表明,苦丁茶各部位可溶性总糖含量为1 65～11 48g/100g,新梢的可溶性总糖含量为8 47～14 27g/100g,其中蔗糖为3 08～6 17g/100g,还原糖为1 78～3 92g/100g,果糖为0 76～1 47g/100g,前两者分别占可溶性总糖的43 2%～50 5%和25 4%～37 1%,果糖占还原糖的25 6%～41 6%。新梢在成熟过程中,可溶性总糖含量逐渐增高,成熟后逐渐降低。不同季节的新梢中,以夏梢糖含量最高,冬梢最低。 展开更多

关键词 苦丁茶 新梢 可溶性糖 含量变化 还原糖 果糖 蔗糖

在线阅读 下载PDF 职称材料

贵州地方猪品种雌激素受体基因内含子1多态性 被引量：3

4

作者 冉雪琴 刘金娟 王嘉福 《山地农业生物学报》 2009年第3期230-234,共5页

为了探索雌激素受体(estrogen receptor,ESR)基因与贵州地方猪品种繁殖性状之间的关系,采用SSCP和RFLP方法,以大约克、外三元杂交猪和梅山猪为对照,对贵州地方猪品种香猪、糯谷猪和柯乐猪ESRα基因进行了多态性分析,共检测到AA、AB和BB ... 为了探索雌激素受体(estrogen receptor,ESR)基因与贵州地方猪品种繁殖性状之间的关系,采用SSCP和RFLP方法,以大约克、外三元杂交猪和梅山猪为对照,对贵州地方猪品种香猪、糯谷猪和柯乐猪ESRα基因进行了多态性分析,共检测到AA、AB和BB 3种基因型,测序结果证实,B等位基因产生的原因是:121 bp扩增片段中第54和57位碱基均突变为C,获得了1个Pvu Ⅱ酶切位点,使AA基因型多出一条带;A等位基因在国外猪品种中占优势,国内猪品种以B等位基因为主,香猪的BB基因型频率最高(79.4%),糯谷猪和柯乐猪均较低(30%、29.8%)。说明贵州地方猪品种的杂合度较高,应加强选育,B等位基因可能与低繁殖率相关。 展开更多

关键词 ESR基因 多态性 SSCP RFLP 猪品种 贵州

在线阅读 下载PDF 职称材料

贵州香猪生长激素cDNA的克隆及原核表达

5

作者 李景 冉雪琴 王嘉福 《贵州畜牧兽医》 2007年第6期1-3,共3页

应用RT-PCR技术从香猪垂体mRNA中扩增出完整的生长激素(growth hormone,GH)cDNA片段,将其克隆入载体质粒pTYB11中,构建了重组质粒pTYB11-xGH,经过IPTG诱导,在大肠杆菌ER2566中获得表达,并确定了最佳表达条件。通过亲合柱层析,得到了完... 应用RT-PCR技术从香猪垂体mRNA中扩增出完整的生长激素(growth hormone,GH)cDNA片段,将其克隆入载体质粒pTYB11中,构建了重组质粒pTYB11-xGH,经过IPTG诱导,在大肠杆菌ER2566中获得表达,并确定了最佳表达条件。通过亲合柱层析,得到了完整的香猪生长激素,为香猪GH的结构、功能及其分子水平的作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 生长激素 定点突变 蛋白表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

棉花GA 20-氧化酶基因转毛白杨的研究 被引量：10

6

作者 邓伟 吕立堂 +1 位作者 罗克明 李义 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1095-1100,共6页

以毛白杨为材料,研究了超量表达赤霉素合成酶基因(GA20-氧化酶基因)对毛白杨根、茎和叶的生长以及组织结构的影响,结果显示,表达GA20-氧化酶基因能显著提高毛白杨茎的生长,但是对根系的生长带来负面影响.同时,超量表达GA20-氧化酶基因... 以毛白杨为材料,研究了超量表达赤霉素合成酶基因(GA20-氧化酶基因)对毛白杨根、茎和叶的生长以及组织结构的影响,结果显示,表达GA20-氧化酶基因能显著提高毛白杨茎的生长,但是对根系的生长带来负面影响.同时,超量表达GA20-氧化酶基因促进了毛白杨茎木质部的生长,抑制了韧皮部和皮层的生长.研究结果表明GA20-氧化酶基因在毛白杨遗传改良中具有一定的应用价值. 展开更多

关键词 杨树 超量表达 赤霉素 GA20-氧化酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

杜仲橡胶颗粒结合蛋白的分离、纯化及抗体制备 被引量：3

7

作者 王敏杰 韩玉珍 +2 位作者 刘卫平 傅永福 赵德刚 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第4期23-29,共7页

采用重复漂洗 离心法分离纯化了杜仲橡胶颗粒 ,SDS_PAGE分析发现杜仲橡胶颗粒含有十几种蛋白 ,其中以 5 6ku、30ku 2种蛋白的丰度较高 ,分别称之为EuRPP56 和EuRPP30 。对杜仲雌雄株的比较表明 ,杜仲雌株叶片、雌株树皮及果皮中橡胶颗... 采用重复漂洗 离心法分离纯化了杜仲橡胶颗粒 ,SDS_PAGE分析发现杜仲橡胶颗粒含有十几种蛋白 ,其中以 5 6ku、30ku 2种蛋白的丰度较高 ,分别称之为EuRPP56 和EuRPP30 。对杜仲雌雄株的比较表明 ,杜仲雌株叶片、雌株树皮及果皮中橡胶颗粒蛋白均是EuRPP30 含量高于EuRPP56 ,而雄株叶片、雄株树皮中正相反。进一步分离纯化了杜仲橡胶颗粒中丰度较高的 30ku蛋白 ,并制备了该蛋白的抗体。免疫细胞化学分析结果表明 ,在叶片的含胶细胞中有阳性反应 ,而其它细胞无阳性反应。 展开更多

关键词 杜仲 橡胶 颗粒 蛋白 分离纯化 抗体制备 雄株叶片 雄株树皮 杜仲胶

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸭瘟强毒人工感染雏鸭的显微和超微病理学变化 被引量：7

8

作者 刘忠伟 杨颖 +2 位作者 江楠 罗乐 文明 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第16期140-147,共8页

为了解鸭瘟病毒(DPV)人工感染雏鸭后的组织器官病变规律、感染后病毒分布情况及细胞超微结构变化,试验以DPV GZ强毒株人工感染90羽15日龄健康雏鸭,分别在感染后3、6、10、18、30、48、72、96、108 h剖杀,采用PCR技术进行病原鉴定,并通... 为了解鸭瘟病毒(DPV)人工感染雏鸭后的组织器官病变规律、感染后病毒分布情况及细胞超微结构变化,试验以DPV GZ强毒株人工感染90羽15日龄健康雏鸭,分别在感染后3、6、10、18、30、48、72、96、108 h剖杀,采用PCR技术进行病原鉴定,并通过光学显微镜和透射电镜进行病理组织显微和超微结构观察。结果显示,人工感染3 h后即可通过PCR技术检测出DPV核酸;透射电镜观察表明感染后10 h可在脾脏中首先观察到少量的病毒,30 h后胸腺开始发现病毒,病毒的数量随感染时间增加逐渐增加;感染18 h后,中枢免疫器官胸腺表现为淋巴细胞数量降低,组织间隙增大;脾脏组织病变严重,其余器官组织结构均出现程度较轻的组织损伤;感染后30 h,中枢免疫器官的淋巴细胞极度减少,器官组织结构模糊不清,出血较为严重;一些器官则出现细胞肿胀,肠道等器官组织也有细胞变性、出血等病理变化;在死亡鸭的肝脏、脾脏、十二指肠、胸腺发现数量极多的病毒。对照组鸭组织中未发现病理变化。这些研究结果可以为鸭瘟病毒的致病机制研究和鸭瘟的病理学诊断提供试验依据。 展开更多

关键词 鸭瘟病毒 雏鸭 组织病理变化 超微结构变化

在线阅读 下载PDF 职称材料

3个优质枇杷新品系的选育与栽培技术 被引量：3

9

作者 杨勇胜 李庆宏 +3 位作者 范付华 文晓鹏 邓勇 罗国伟 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第4期27-30,共4页

为培育出综合性状优良且适宜贵州地方栽培的枇杷新品种,改变贵州省枇杷生产品种完全依靠引进的现状,利用浙江大果型品种硬枝种和四川早熟品种早红3号作亲本进行有性杂交选育,通过1996—2008年连续选择,育成3个枇杷新品系,暂定名为彩霞... 为培育出综合性状优良且适宜贵州地方栽培的枇杷新品种,改变贵州省枇杷生产品种完全依靠引进的现状,利用浙江大果型品种硬枝种和四川早熟品种早红3号作亲本进行有性杂交选育,通过1996—2008年连续选择,育成3个枇杷新品系,暂定名为彩霞、红袖和金杯,新品系的果实均表现为肉质细腻、风味浓郁香甜,抗性强、结实早、丰产稳产,适宜贵州及周边省市温暖地带或有小气候条件的避冻区域种植。 展开更多

关键词 枇杷 新品系 杂交选育 品质

在线阅读 下载PDF 职称材料

从江香猪基因组中2个拷贝数变异区的多态性研究 被引量：3

10

作者 赵恒鑫 何树芳 +1 位作者 王嘉福 冉雪琴 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第10期19-22,共4页

为了研究从江香猪生长和繁殖差异与拷贝数变异拷贝数变异(copy number variation,CVN)之间的关系,采用实时荧光定量PCR方法,对从江香猪和大白猪基因组中的CNVR100与CNVR373的拷贝数进行了测定,并分析了从江香猪拷贝数与生长繁育性状之... 为了研究从江香猪生长和繁殖差异与拷贝数变异拷贝数变异(copy number variation,CVN)之间的关系,采用实时荧光定量PCR方法,对从江香猪和大白猪基因组中的CNVR100与CNVR373的拷贝数进行了测定,并分析了从江香猪拷贝数与生长繁育性状之间的相关性。结果表明,从江香猪和大白猪基因组中都检测到CNVR100和CNVR373;与大白猪相比,从江香猪的CNVR100拷贝数较低,CNVR373拷贝数较高;相关性分析结果显示,从江香猪2个CNVRs与其体长和胸围有一定的负相关关系,表明这2个CNVRs的多态性可能对从江香猪的生长有一定的影响。 展开更多

关键词 拷贝数变异 KIT基因 嗅觉受体 从江香猪

在线阅读 下载PDF 职称材料

杜仲叶和树皮总RNA的快速提取法 被引量：15

11

作者 周明兵 王红珍 赵德刚 《山地农业生物学报》 2003年第5期430-431,共2页

文中提出了一种适用于杜仲Eucommia ulmoides Olive树皮和树叶总RNA快速提取的方法,用本方法提取的杜仲树皮树叶的总RNA具有正常的光谱吸收,OD_(260)/OD_(280)为1.930。琼脂糖电泳后,28S RNA的亮度基本为18S RNA的亮度的2倍,说明提取的... 文中提出了一种适用于杜仲Eucommia ulmoides Olive树皮和树叶总RNA快速提取的方法,用本方法提取的杜仲树皮树叶的总RNA具有正常的光谱吸收,OD_(260)/OD_(280)为1.930。琼脂糖电泳后,28S RNA的亮度基本为18S RNA的亮度的2倍,说明提取的RNA完整,并未降解。同其它的方法比较,该法提取的RNA质量高、简便、快速、经济,可用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA文库的构建。 展开更多

关键词 杜仲叶 杜仲树皮 总RNA 快速提取法 改进CTAB

在线阅读 下载PDF 职称材料

罗汉松内生真菌的抑菌活性研究 被引量：2

12

作者 冉雪琴 何映霞 +2 位作者 孙端方 叶静 王嘉福 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期219-223,共5页

为了研究药用植物内生真菌的次生代谢产物是否具有抑菌活性,以96株罗汉松内生真菌为研究材料,将菌丝及其培养液经氯仿—甲醇抽提后,采用杯碟法测定了全部菌株的抑菌活性。罗汉松内生真菌中49%的菌株具有抑菌作用,其中菌株LHS18、LHS42、... 为了研究药用植物内生真菌的次生代谢产物是否具有抑菌活性,以96株罗汉松内生真菌为研究材料,将菌丝及其培养液经氯仿—甲醇抽提后,采用杯碟法测定了全部菌株的抑菌活性。罗汉松内生真菌中49%的菌株具有抑菌作用,其中菌株LHS18、LHS42、LHS67、LHS92和LHS93抽提物经100倍稀释后对金黄色葡萄球菌仍有强的抑菌作用,菌株LHS30抽提物的100倍稀释溶液对大肠杆菌的生长有强烈的抑制作用。对抑菌活性较强的6株菌根据其ITS序列相似性进行了分子鉴定。菌株LHS18和LHS42鉴定为烟曲霉(Aspergillus fumigatus),LHS92为四孢脉孢菌(Neurospora tetrasperma),LHS30为丝枝霉(Aphanocladiumsp.),LHS67为拟茎点霉(Phomopsis liquidambari),LHS93未能鉴定出种属。研究结果提示,罗汉松内生真菌中49%菌株具有抑菌活性,其中6株菌对动物和人类的病原菌有强列的抑制作用,是挖掘高效抑菌物质的重要资源。 展开更多

关键词 罗汉松 药用植物 内生真菌 抑菌活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

杜仲树皮cDNA文库的构建与分析 被引量：6

13

作者 周明兵 侯磊 +2 位作者 朱冬雪 裴炎 赵德刚 《山地农业生物学报》 2004年第1期58-59,69,共3页

以杜仲EucommiaulmoidesOlive五六月份的幼嫩树皮为材料,提取总RNA,采用RT-PCR技术(逆转录—聚合酶链式反应)合成cDNA双链,以Uni-ZAPXRvector为载体,构建了杜仲树皮的cDNA文库,其文库的滴度为3.4×1010pfu·mL-1,含插入片段的... 以杜仲EucommiaulmoidesOlive五六月份的幼嫩树皮为材料,提取总RNA,采用RT-PCR技术(逆转录—聚合酶链式反应)合成cDNA双链,以Uni-ZAPXRvector为载体,构建了杜仲树皮的cDNA文库,其文库的滴度为3.4×1010pfu·mL-1,含插入片段的频率是99%,插入片段的分子长为400～2500bp,为进一步研究杜种特有的药用成分合成途径及杜仲胶合成途径的关键酶基因奠定了基础。 展开更多

关键词 杜仲 树皮 CDNA文库 RT—PCR技术 药用成分 酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

转基因表达有机磷水解酶(OPH)提高黄瓜降解蝇毒磷能力的初步研究 被引量：3

14

作者 赵杰宏 韩洁 赵德刚 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期182-186,共5页

为快速提高黄瓜降解有机磷农药残留的能力，选取能广泛降解有机磷农药的有机磷水解酶（OPH）为表达蛋白，构建CaMV35S启动子驱动有机磷水解酶基因（opd）的植物表达载体pSOP，经双酶切证明重组载体含有插入位置和方向皆正确的目的片段... 为快速提高黄瓜降解有机磷农药残留的能力，选取能广泛降解有机磷农药的有机磷水解酶（OPH）为表达蛋白，构建CaMV35S启动子驱动有机磷水解酶基因（opd）的植物表达载体pSOP，经双酶切证明重组载体含有插入位置和方向皆正确的目的片段。通过农杆菌介导遗传转化黄瓜子叶节，诱导和筛选出9株抗性苗，获得3株GUS染色和PCR阳性转化苗。酶活性分析表明，转基因黄瓜降解蝇毒磷能力是对照（非转基因株）的4．7～9．7倍，最高达到7．8μmol／（mg·min），有助于加快降解黄瓜中的有机磷农药残留，为食品安全研究提供借鉴。 展开更多

关键词 生物修复 遗传转化 有机磷水解酶(OPH) 农药残留

在线阅读 下载PDF 职称材料

转基因表达OPH提高番茄果实降解有机磷农药能力的研究 被引量：2

15

作者 赵杰宏 赵德刚 韩洁 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期213-216,225,共5页

拟通过基因工程提高番茄果实降解有机磷农药残留的能力。构建了E8启动子基因驱动有机磷降解基因(OPD)的植物表达载体pSE8OP,经农杆菌介导遗传转化番茄子叶后,进行GUS染色、PCR和Southern blotting分析。证明OPD基因已整合进转基因植株... 拟通过基因工程提高番茄果实降解有机磷农药残留的能力。构建了E8启动子基因驱动有机磷降解基因(OPD)的植物表达载体pSE8OP,经农杆菌介导遗传转化番茄子叶后,进行GUS染色、PCR和Southern blotting分析。证明OPD基因已整合进转基因植株基因组中,为1个拷贝。HPLC比较分析发现,转基因番茄果实能显著提高降解毒死蜱和对硫磷的能力,大大减少了番茄中的农药残留。 展开更多

关键词 遗传转化 有机磷水解酶(OPH)农药残留 毒死蜱 对硫磷

在线阅读 下载PDF 职称材料

杜仲愈伤组织诱导与继代培养研究 被引量：4

16

作者 罗丽 赵德刚 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第7期2861-2863,3019,共4页

[目的]对杜仲进行愈伤组织诱导及继代培养,建立愈伤组织的培养系统。[方法]以杜仲子叶、幼叶、下胚轴为外植体,接种于不同培养基中诱导和继代。[结果]不同外植体愈伤组织的诱导率高低顺序为:下胚轴>子叶>幼叶。子叶和幼叶在MS+NAA... [目的]对杜仲进行愈伤组织诱导及继代培养,建立愈伤组织的培养系统。[方法]以杜仲子叶、幼叶、下胚轴为外植体,接种于不同培养基中诱导和继代。[结果]不同外植体愈伤组织的诱导率高低顺序为:下胚轴>子叶>幼叶。子叶和幼叶在MS+NAA 1.00 mg/L、MS+2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS+6-BA 1.00 mg/L+NAA 2.00 mg/L、MS+2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳;胚轴在MS+NAA 3.00 mg/L、MS+6-BA 1.00 mg/L+NAA 1.00 mg/L和MS+2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS+6-BA1.00 mg/L+NAA 2.00 mg/L、MS+6-BA 1.00 mg/L+NAA 1.00 mg/L和MS+2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳。[结论]杜仲的子叶、幼叶和胚轴可采用多条途径实现愈伤组织的诱导和继代增殖培养,为进一步筛选高产细胞系打下基础。 展开更多

关键词 杜仲 愈伤组织 继代培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

运用MTT比色法检测印楝素对果蝇S2细胞的毒力作用 被引量：2

17

作者 徐霖 杨明飞 +1 位作者 冉雪琴 王嘉福 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期72-75,共4页

采用MTT(四甲基偶氮唑蓝,methylthiazolyl-tetrazolium)法测定不同质量浓度印楝素(0.01,0.1,0.5,1.0,2.0 mg.L-1)作用不同时间(24,48,72,96 h)对果蝇S2细胞的抑制率.结果表明,印楝素低质量浓度处理时,对果蝇S2细胞有促进生长的作用,表... 采用MTT(四甲基偶氮唑蓝,methylthiazolyl-tetrazolium)法测定不同质量浓度印楝素(0.01,0.1,0.5,1.0,2.0 mg.L-1)作用不同时间(24,48,72,96 h)对果蝇S2细胞的抑制率.结果表明,印楝素低质量浓度处理时,对果蝇S2细胞有促进生长的作用,表现为低质量浓度促进效应;在质量浓度为0.1～2 mg.L-1处理剂量范围内,表现为明显的时间依赖性,随时间延长,抑制率增加.0.5 mg.L-1处理48 h抑制率达54%,为最佳作用条件. 展开更多

关键词 印楝素 果蝇S2细胞 细胞活性 MTT比色法

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用促卵泡激素基因SINE标记测定大约克猪纯合度 被引量：1

18

作者 李升 赵星艳 +3 位作者 张兆强 王三铭 王嘉福 冉雪琴 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第5期140-142,共3页

为了使猪种引进有便捷、准确的检测手段,采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法,检测了120头大约克种猪的纯合度。结果表明:受检母猪FSHβ基因的BB纯合基因型频率为82.5%,AB杂合基因型频率为17.5%,未检测到AA纯合基因... 为了使猪种引进有便捷、准确的检测手段,采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法,检测了120头大约克种猪的纯合度。结果表明:受检母猪FSHβ基因的BB纯合基因型频率为82.5%,AB杂合基因型频率为17.5%,未检测到AA纯合基因型,经计算B等位基因的频率明显高于A等位基因频率。表明,该批次大约克猪存在一定比例的内二元或内三元杂交猪,应加强管理,严格控制再引种的纯度。该检测方法适用于区分国内地方猪品种和欧洲猪品种的纯合度,为引种种猪的纯合度检测提供准确的鉴定手段,有良好的应用前景。 展开更多

关键词 大约克猪 FSHΒ基因 分子标记 SINE

在线阅读 下载PDF 职称材料

番茄果实特异性表达有机磷水解酶的农药降解活性分析 被引量：1

19

作者 赵杰宏 赵德刚 韩洁 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第5期77-80,共4页

为研究番茄果实中表达有机磷水解酶(OPH)降解有机磷农药的活性,经农杆菌介导,将携带表达元件E8-OPD的植物表达载体pSE8OP遗传转化番茄子叶,通过抗性筛选和分子检测,获得6株GUS染色和PCR扩增阳性的转基因番茄植株。酶活分析发现,酶促反... 为研究番茄果实中表达有机磷水解酶(OPH)降解有机磷农药的活性,经农杆菌介导,将携带表达元件E8-OPD的植物表达载体pSE8OP遗传转化番茄子叶,通过抗性筛选和分子检测,获得6株GUS染色和PCR扩增阳性的转基因番茄植株。酶活分析发现,酶促反应最适温度为30℃,稳定性较高。酶的最适保存pH值为9,最适试验pH值为8.0。与1 mmol/L Zn2+条件下酶活相比,Co2+提高了酶活2.1倍,Ca2+、Cu2+、Fe2+、Mg2+、Mn2+、EDTA、SDS、TritonX-100、β-ME和DTT都不同程度地抑制了酶活。检测重组表达OPH降解蝇毒磷、毒死蜱和对硫磷的酶活。表明,降解蝇毒磷的Km最低,为4.04μmol/L。重组表达OPH有助于提高番茄果实降解有机磷农药残留的能力。 展开更多

关键词 遗传转化 有机磷水解酶(OPH) 农药残留 有机磷农药降解基因(OPD)

在线阅读 下载PDF 职称材料

印楝素作用分子靶标的研究 被引量：1

20

作者 徐霖 冉雪琴 王嘉福 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期83-86,116,共5页

利用果蝇(Drosophila melanogaster)S2胚胎细胞系在细胞水平研究了印楝素A(Azadirachtin A)的可能分子靶标,运用基因芯片技术检测到印楝素作用后,细胞骨架肌动蛋白(Actin cytoskeleton)以及细胞骨架肌动蛋白相关蛋白因子(Actin-related ... 利用果蝇(Drosophila melanogaster)S2胚胎细胞系在细胞水平研究了印楝素A(Azadirachtin A)的可能分子靶标,运用基因芯片技术检测到印楝素作用后,细胞骨架肌动蛋白(Actin cytoskeleton)以及细胞骨架肌动蛋白相关蛋白因子(Actin-related protein)Act57B,Act42A,Arp14D,Arp53D,Actr13E,Act5C,Act87E均表达下调,调控蛋白因子TSR,CNC均表达上调.在此基础上,运用Western蛋白检测技术检测到药物处理24 h后,处理组的β-actin表达量为对照组的93.42%;药物处理32 h后,处理组的β-actin为对照组的91.46%.研究结果从分子水平进一步验证骨架肌动蛋白极有可能是印楝素的作用靶标蛋白. 展开更多

关键词 印楝素 细胞骨架肌动蛋白 基因芯片 蛋白检测 分子靶标

在线阅读 下载PDF 职称材料