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植物苯丙氨酸解氨酶表达调控机理的研究进展 被引量:38
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作者 黄小贞 赵德刚 《贵州农业科学》 CAS 2017年第4期16-20,共5页
植物苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC 4.3.1.5)是苯丙烷类化合物代谢的关键限速酶,在次生代谢物合成及抗逆过程中有重要作用。从植物苯丙氨酸解氨酶的基本特性、蛋白定位、基因特点以及组织表达模式等方面,对近几年PAL在次生代谢物的生物合成和... 植物苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC 4.3.1.5)是苯丙烷类化合物代谢的关键限速酶,在次生代谢物合成及抗逆过程中有重要作用。从植物苯丙氨酸解氨酶的基本特性、蛋白定位、基因特点以及组织表达模式等方面,对近几年PAL在次生代谢物的生物合成和信号调控中的研究进展进行综述,旨在为苯丙烷合成途径中重要关键酶基因的多样性、表达调控机制复杂性和次生代谢物积累的分子机理以及苯丙氨酸解氨酶的利用研究提供理论依据和应用参考。 展开更多
关键词 苯丙氨酸解氨酶 苯丙烷类代谢物 基因表达调控 泛素化
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激素处理对NtQPT干涉表达烟草种子萌发及生长影响研究 被引量:1
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作者 秦利军 冯所鸿 +1 位作者 杜致辉 赵德刚 《种子》 北大核心 2018年第8期16-22,共7页
以超量表达和干涉表达QPT转基因烟草种子及烟苗为材料,通过不同激素处理,探讨激素与QPT协同调节种子萌发、形态生长及激素应答理化指标变化的作用。结果表明,与野生型植株(WT)和超量表达植株(QPT)相比,低浓度(5mg/L)6-BA能显著提高干涉... 以超量表达和干涉表达QPT转基因烟草种子及烟苗为材料,通过不同激素处理,探讨激素与QPT协同调节种子萌发、形态生长及激素应答理化指标变化的作用。结果表明,与野生型植株(WT)和超量表达植株(QPT)相比,低浓度(5mg/L)6-BA能显著提高干涉植株(QPTi)种子发芽率、发芽势和发芽指数等种子萌发相关指标;而低浓度(5mg/L)ABA会抑制种子的萌发,与QPTi植株相比,ABA处理对WT和QPT烟株种子萌发抑制率较高。另外,以高浓度(40mg/L)6-BA或20mg/L ABA处理烟苗均能抑制转基因与非转基因植株株高、叶宽、叶长、茎围等形态指标的生长,6-BA对QPT和WT的叶长指标抑制最为显著,分别为15.59%和33.34%,ABA则对WT和QPTi的株高指标抑制最为明显。此外,高浓度的激素处理也同样会引起3种烟草植株SOD酶活及叶绿素a/b、类胡萝卜素及总叶绿素含量的差异变化。 展开更多
关键词 烟草 QPT基因 种子萌发 生长
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凉都红香椿外植体快繁体系的研究 被引量:4
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作者 曹娟 秦利军 苏跃 《种子》 北大核心 2018年第9期89-92,共4页
以贵州凉都红香椿成熟叶片和无菌苗叶片为材料,筛选可用于诱导叶片再生形成植株的愈伤组织诱导和分化的培养基分别为:MS+0.15 mg/L TDZ+0.3 mg/L NAA+1.0mg/L KT+3%蔗糖+7g/L琼脂和MS+0.1mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA+3%蔗糖+7g/L... 以贵州凉都红香椿成熟叶片和无菌苗叶片为材料,筛选可用于诱导叶片再生形成植株的愈伤组织诱导和分化的培养基分别为:MS+0.15 mg/L TDZ+0.3 mg/L NAA+1.0mg/L KT+3%蔗糖+7g/L琼脂和MS+0.1mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA+3%蔗糖+7g/L琼脂;同时筛选到以成熟香椿枝条为材料诱导腋芽生长的最适培养基为:MS+0.2mg/L GA3+0.02mg/L+3%蔗糖+7g/L琼脂。另外,研究还确定了香椿成熟叶片和枝条外植体的最佳消毒条件为:75%酒精处理45s,0.1%升汞灭菌6~8min后,用无菌水冲洗4~6次可降低外植体的污染率。 展开更多
关键词 红香椿 外植体 组织培养
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杜仲EuCHIT1基因表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 被引量:5
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作者 董旋 丁延庆 +1 位作者 冉昕 赵德刚 《山地农业生物学报》 2016年第5期9-12,共4页
构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸(6His)标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白(his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP)标签,分别将重组载体遗传... 构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸(6His)标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白(his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP)标签,分别将重组载体遗传转化大肠杆菌细胞BL21(DE3),在37℃、150 rpm条件下培养至菌液OD值为0.4~0.8后,转到16℃、150 rpm条件下以1 mM IPTG诱导培养12 h,表达产物经SDS-PAGE分析,pET-Eu-CHIT1/BL21( DE3)表达以包涵体形式存在36.03 kD融合蛋白,pMCSG-EuCHIT1/ BL21( DE3)成功表达可溶形式存在的77.21 kD融合蛋白。故可以使用pMCSG-EuCHIT1/ BL21( DE3)获得可溶的融合蛋白,为之后的EuCH-IT1的多克隆抗体的制备和及功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 杜仲 几丁质酶基因( EuCHIT1) 原核表达 可溶性蛋白
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过表达GmAP1.2转基因大豆的遗传转化及植株发育特性
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作者 周航 陈福禄 +2 位作者 傅永福 宋莉 张晓玫 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期833-839,共7页
为研究大豆GmAP1.2(Glyma.08G269800)的生物学功能,通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法将GmAP1.2基因遗传转化至大豆天隆1号,获得过表达GmAP1.2转基因植株;并对转基因大豆的株高、花器官、叶片等特性进行分析。结果表明,GmAP1.2过表... 为研究大豆GmAP1.2(Glyma.08G269800)的生物学功能,通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法将GmAP1.2基因遗传转化至大豆天隆1号,获得过表达GmAP1.2转基因植株;并对转基因大豆的株高、花器官、叶片等特性进行分析。结果表明,GmAP1.2过表达使转基因大豆比野生型(WT)早花31d,株高明显降低,且与野生型相比,GmAP1.2转基因大豆叶片变小,叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量分别增加了1.43、1.52和1.57倍,但未影响花器官结构。表明GmAP1.2不仅能够影响大豆的株型,还能影响叶片的大小和叶绿素的含量。本研究结果为进一步阐明大豆AP1基因在大豆中的功能与应用奠定了理论基础。 展开更多
关键词 大豆 GmAP1.2 转基因 开花时间 株高
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茶树COBRA基因家族全基因组鉴定及表达分析 被引量:2
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作者 艾安涛 李燕丽 +1 位作者 章文益 吕立堂 《茶叶学报》 2021年第3期95-104,共10页
COBRA基因编码糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,是次生壁加厚和纤维素含量的调节因子,对植物生长、纤维素含量等有重要作用。本研究通过对茶树基因组数据进行分析,成功的从中鉴定到COBRA基因,并对该基因家族成员的蛋白理化性质、亚细胞定位、进... COBRA基因编码糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,是次生壁加厚和纤维素含量的调节因子,对植物生长、纤维素含量等有重要作用。本研究通过对茶树基因组数据进行分析,成功的从中鉴定到COBRA基因,并对该基因家族成员的蛋白理化性质、亚细胞定位、进化关系、保守结构域、染色体定位等进行生物信息学分析,同时分析了茶树COBRA成员在PEG诱导的干旱胁迫、茉莉酸甲酯处理、盐胁迫、冷胁迫处理中的转录组数据,最后对茶树进行茉莉酸甲酯处理,基于荧光定量PCR技术的表达水平验证。结果表明:茶树COBRA基因有16个家族成员,相对分子质量24807.70~74813.12,等电点5.43~9.14,亚细胞定位显示在细胞膜和细胞外;根据系统进化树将茶树COBRA基因家族分为5类;保守结构域和motif分析发现相同亚家族的基因结构,保守结构域都属于COBRA基因家族;基因表达分析显示COBRA基因在不同茶树部位和胁迫的表达量有不同差异,说明茶树COBRA基因广泛参与茶树生长发育和非生物胁迫响应。实时荧光定量PCR显示经茉莉酸甲酯处理后,3个CsCOBRA基因表达量趋势大致与转录组数据一致,本研究将为进一步开展茶树COBRA基因家族的功能验证和抗逆作用机理研究等提供参考。 展开更多
关键词 茶树 COBRA基因家族 生物信息学 表达量分析
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