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S100A8/A9通过Wnt/β-catenin促进口腔鳞癌的侵袭迁移 被引量:3
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作者 蒋岑 马洪 +3 位作者 胡赟 周可 孙俊泽 鲍玲娜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第12期1971-1978,共8页
目的研究外源性钙结合蛋白A8/A9(S100A8/A9)通过Wnt/β-catenin促进口腔鳞癌(OSCC)细胞CAL-27和SCC-25迁移和侵袭能力。方法分别或共同添加S100A8、S100A9蛋白培养CAL-27、SCC-25,蛋白印记法(Western blot)检测β-catenin的表达情况;免... 目的研究外源性钙结合蛋白A8/A9(S100A8/A9)通过Wnt/β-catenin促进口腔鳞癌(OSCC)细胞CAL-27和SCC-25迁移和侵袭能力。方法分别或共同添加S100A8、S100A9蛋白培养CAL-27、SCC-25,蛋白印记法(Western blot)检测β-catenin的表达情况;免疫荧光鉴定添加S100A8/A9蛋白培养CAL-27、SCC-2548 h后β-catenin的表达;加入20μg/ml Wnt/β-catenin通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK-1),Western blot和实时定量荧光PCR(qPCR)检测β-catenin的表达;采用Transwell实验比较正常对照组(Control组)、添加S100A8/A9蛋白组、加入DKK-1组、加入DKK-1并添加S100A8/A9蛋白回复组的细胞侵袭和迁移能力;Western blot实验检测细胞髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)和细胞周期蛋白D(cyclinD1)的表达。结果S100A8、A9能激活Wnt/β-catenin通路,与S100A8和S100A9分别培养相比,共同培养时CAL-27和SCC-25细胞中的β-catenin表达随着时间上调,qPCR结果与Western blot结果一致;在免疫荧光实验中,SCC-25及CAL-27细胞的细胞质和细胞核内均观察到β-catenin表达量变化,SCC-25及CAL-27细胞内β-catenin蛋白在48 h表达量增加(P<0.05);加入DKK-1,Western blot和qPCR显示β-catenin的表达降低(P<0.001);添加S100A8/A9组细胞迁移和侵袭数多于Control组(P<0.001),添加DKK-1抑制剂组细胞侵袭迁移数量减少,加入DKK-1并添加S100A8/A9蛋白回复组细胞侵袭迁移数量减少,提示DKK-1能够抑制外源性S100A8/A9蛋白对SCC-25及CAL-27细胞的侵袭迁移能力的促进作用,差异有统计学意义(P<0.001);加入Wnt/β-catenin通路抑制剂DKK-1,Western blot实验显示Wnt/β-catenin通路关键分子c-Myc和cyclinD1的表达降低(P<0.001)。结论外源性S100A8/A9蛋白可通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进SCC-25和CAL-27细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 S100A8/A9 WNT/Β-CATENIN DKK-1 侵袭 迁移
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钙卫蛋白调控口腔鳞癌细胞侵袭迁移作用机制 被引量:1
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作者 孙俊泽 马洪 +1 位作者 胡赟 鲍玲娜 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期769-774,共6页
目的:研究钙卫蛋白(S100A8/A9蛋白)对OSCC细胞迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法:CCK8法检测不同浓度S100A8/A9蛋白处理细胞后的增殖活性,确定合适浓度后,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,Western blot和细胞免疫荧光... 目的:研究钙卫蛋白(S100A8/A9蛋白)对OSCC细胞迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法:CCK8法检测不同浓度S100A8/A9蛋白处理细胞后的增殖活性,确定合适浓度后,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,Western blot和细胞免疫荧光染色检测1μg/ml S100A8/A9蛋白下OSCC细胞内p-p38MAPK表达分布,RT-qPCR检测OSCC细胞中与侵袭转移相关基因的表达情况。结果:1μg/ml S100A8/A9蛋白作用下,OSCC细胞增殖活性增加(P<0.05),细胞迁移和侵袭数增多(P<0.001);S100A8/A9抑制剂组细胞迁移和侵袭数减少(P<0.001);p-p38MAPK蛋白表达上调(P<0.05);S100A8/A9组MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达上调,抑制剂组MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达下调(P<0.001)。结论:1μg/ml S100A8/A9蛋白可能通过活化p38MAPK通路促进OSCC细胞迁移和侵袭,上调MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA。 展开更多
关键词 钙卫蛋白 侵袭 迁移 基质金属蛋白酶 P38丝裂原活化蛋白激酶
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