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溶瘤病毒Rigvir^(®)对结直肠癌细胞系在体外的影响及其机制的研究
1
作者 黄伊鑫 张汝一 +1 位作者 唐景玲 王新俊 《重庆医科大学学报》 北大核心 2025年第10期1353-1362,共10页
目的:探究溶瘤病毒Rigvir^(®)在体外对6种不同结直肠癌细胞系的杀伤作用及不同细胞系对Rigvir^(®)敏感性的差异,分析敏感细胞与不敏感细胞的差异基因及信号通路以探究其差异产生的原因并进行验证,根据实验结果初步探究溶瘤病... 目的:探究溶瘤病毒Rigvir^(®)在体外对6种不同结直肠癌细胞系的杀伤作用及不同细胞系对Rigvir^(®)敏感性的差异,分析敏感细胞与不敏感细胞的差异基因及信号通路以探究其差异产生的原因并进行验证,根据实验结果初步探究溶瘤病毒Rigvir^(®)对结直肠癌细胞的杀伤机制,为溶瘤病毒Rigvir^(®)作为新型免疫治疗药物治疗结直肠癌提供理论基础。方法:采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)试验定量检测Rigvir^(®)对细胞的细胞抑制率,通过Annexin V-FITCPI法检测敏感细胞系的细胞凋亡率并初步分析其杀伤机制,利用生物信息学技术分析敏感细胞与不敏感细胞的差异基因及信号通路并应用蛋白质印迹法(Western blot,WB)进行验证和检测凋亡因子表达情况。高表达差异信号通路上游因子,并应用实时定量逆转录酶链式反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和WB检测Rigvir^(®)对敏感细胞系过表达细胞株目的基因及目的蛋白表达量的影响。结果:SW480和HT29对溶瘤病毒Rigvir^(®)敏感,而对其余4种细胞系相对不敏感(P<0.001),但2个浓度梯度的Rigvir^(®)对HT29的抑制作用更加明显(P<0.001),在感染48 h后SW480细胞随感染时间的延长,细胞抑制率不再增加(F=52.010,P=0.147),但其对病毒浓度的变化较敏感(F=13.490,P<0.001)。相反,病毒浓度的变化对HT29细胞的抑制率无明显影响(F=8.450,P=0.281),但在48 h后随着感染时间的延长,抑制率仍继续升高(F=24.380,P<0.001)。敏感组细胞随着感染时间的延长,凋亡率逐渐增加(P<0.001),且均以细胞晚期凋亡和坏死细胞为主。通过生物信息学技术观察到PI3K/Akt/mTOR经典信号通路在敏感组与不敏感组之间差异明显,WB实验表明,应用Rigvir^(®)后,敏感细胞组PI3K/Akt/mTOR上游蛋白表达量明显降低(P<0.001)。细胞凋亡因子caspase-3及caspase-8表达量升高,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.001)。RTqPCR和WB结果表明,Rigvir^(®)作用于敏感细胞系HT29过表达细胞株后,PI3K/Akt/mTOR上下游信号分子(Akt,4EBP1和p70S6K)的表达量较对照组明显降低(P<0.05)。结论:Rigvir^(®)可以在体外有效杀伤部分结直肠癌细胞系(SW480、HT29),其作用机制部分是通过PI3K/Akt/mTOR经典信号通路诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 溶瘤病毒 结直肠癌 凋亡 PI3K/Akt/mTOR通路
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结直肠癌肿瘤引流淋巴结T细胞的特征及其功能 被引量：3
2
作者 唐景玲 杨远 +3 位作者 李晓云 杜航 王新俊 刘艳洁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期869-876,共8页
目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)肿瘤引流淋巴结(tumor-draining lymph node,TDLN)中T细胞的免疫学特性及其抗肿瘤作用。方法:收集2018年12月至2021年1月贵州医科大学附属医院收治的33例CRC患者的临床资料和淋巴结标本。采用... 目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)肿瘤引流淋巴结(tumor-draining lymph node,TDLN)中T细胞的免疫学特性及其抗肿瘤作用。方法:收集2018年12月至2021年1月贵州医科大学附属医院收治的33例CRC患者的临床资料和淋巴结标本。采用染料法示踪,配对采集CRC患者TDLN和非肿瘤引流淋巴结(non-TDLN,NTDLN)。用流式细胞术检测已制备成单细胞悬液的TDLN和NTDLN中免疫细胞亚群和功能表型差异,酶联免疫斑点法比较TDLN和NTDLN中肿瘤反应性T细胞比例,多色免疫荧光组织化学技术分析两种淋巴结中免疫细胞空间分布情况。体外扩增TDLN-T细胞,检测其T细胞亚群和表型变化以及肿瘤免疫反应能力。结果:与NTDLN相比,TDLN中含有更高比例肿瘤反应性T细胞(P<0.05),调节性T(Treg)细胞比例较高(P<0.01),但单核样髓源性抑制细胞比例较低(P<0.05),T细胞活化标志物ICOS、CD28和抑制标志物PD-1、TIGIT比例均显著升高(P<0.05或P<0.01)。Treg细胞和滤泡性T细胞主要分布在淋巴结皮质区和生发中心。TDLN-T细胞扩增后,以CD8^(+)T细胞为主(P<0.01),ICOS、CD28表达升高(P<0.05或P<0.01),肿瘤反应性T细胞比例升高(P<0.01)。结论:CRC的TDLN中T细胞处于免疫激活状态,同时高表达免疫抑制标志物;体外培养可以增加TDLN-T细胞活化水平,并提高抗肿瘤T细胞比例。 展开更多
关键词 结直肠癌 肿瘤引流淋巴结 免疫微环境 T细胞活化 T细胞抑制
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辛伐他汀治疗肝硬化门静脉高压症的作用机制及应用现状 被引量：5
3
作者 吴欢 伍龙 杨京 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期402-405,共4页
门静脉高压症被认为是继病因之后推动肝功能减退的重要生理环节。通过对相关文献的归纳总结得出,与传统防治门静脉高压症药物相比,辛伐他汀可通过诱导Kruppel样因子2及一氧化氮的表达,达到改善肝功能及降低肝硬化门静脉压力的作用,分析... 门静脉高压症被认为是继病因之后推动肝功能减退的重要生理环节。通过对相关文献的归纳总结得出,与传统防治门静脉高压症药物相比,辛伐他汀可通过诱导Kruppel样因子2及一氧化氮的表达,达到改善肝功能及降低肝硬化门静脉压力的作用,分析表明辛伐他汀在改善肝硬化门静脉血流动力学方面有广泛应用前景。 展开更多
关键词 肝硬化 门静脉高压症 辛伐他汀 治疗学 综述
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