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Amiloride通过抑制缺氧诱导的NHE1表达而延缓calpain介导的ABCA1降解
被引量:
5
1
作者
莫显刚
张莉
+4 位作者
张洛超
王龙
向凝
杨涓
宋翔
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期1992-1997,共6页
目的:研究缺氧对钠氢交换体1(NHE1)表达、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和钙蛋白酶(calpain)活性的影响,探讨NHE1抑制剂阿米洛利(amiloride)对ABCA1降解的影响以及与calpain相关的机制。方法:RAW264.7细胞缺氧0、12、24和48 h。MTT法检测...
目的:研究缺氧对钠氢交换体1(NHE1)表达、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和钙蛋白酶(calpain)活性的影响,探讨NHE1抑制剂阿米洛利(amiloride)对ABCA1降解的影响以及与calpain相关的机制。方法:RAW264.7细胞缺氧0、12、24和48 h。MTT法检测细胞活力,real-time PCR及Western blot检测NHE1的表达。流式细胞术检测[Ca2+]i,荧光素法检测细胞内calpain活性。进而,经缺氧24 h处理的细胞,cycloheximide干预条件下,NHE1抑制剂amiloride处理6 h及12 h,检测ABCA1蛋白含量。最后,给予calpain抑制剂ALLN及细胞内钙螯合剂BAPTA共孵育12 h,检测ABCA1含量及calpain活性。结果:缺氧呈时间依赖方式抑制细胞增殖。缺氧促进NHE1表达上调,增加[Ca2+]i及calpain活性。缺氧加速ABCA1蛋白降解,而amiloride减缓ABCA1蛋白降解。ALLN及BAPTA升高ABCA1蛋白含量,降低calpain活性。结论:Amiloride延缓calpain介导的ABCA1降解,提示缺氧诱导NHE1表达可能至少部分参与ABCA1蛋白降解。
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关键词
三磷酸腺苷结合盒转运体A1
阿米洛利
钠氢交换体1
钙蛋白酶
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职称材料
题名
Amiloride通过抑制缺氧诱导的NHE1表达而延缓calpain介导的ABCA1降解
被引量:
5
1
作者
莫显刚
张莉
张洛超
王龙
向凝
杨涓
宋翔
机构
贵州医科大学附属医院老年病科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期1992-1997,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.31260250)
文摘
目的:研究缺氧对钠氢交换体1(NHE1)表达、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和钙蛋白酶(calpain)活性的影响,探讨NHE1抑制剂阿米洛利(amiloride)对ABCA1降解的影响以及与calpain相关的机制。方法:RAW264.7细胞缺氧0、12、24和48 h。MTT法检测细胞活力,real-time PCR及Western blot检测NHE1的表达。流式细胞术检测[Ca2+]i,荧光素法检测细胞内calpain活性。进而,经缺氧24 h处理的细胞,cycloheximide干预条件下,NHE1抑制剂amiloride处理6 h及12 h,检测ABCA1蛋白含量。最后,给予calpain抑制剂ALLN及细胞内钙螯合剂BAPTA共孵育12 h,检测ABCA1含量及calpain活性。结果:缺氧呈时间依赖方式抑制细胞增殖。缺氧促进NHE1表达上调,增加[Ca2+]i及calpain活性。缺氧加速ABCA1蛋白降解,而amiloride减缓ABCA1蛋白降解。ALLN及BAPTA升高ABCA1蛋白含量,降低calpain活性。结论:Amiloride延缓calpain介导的ABCA1降解,提示缺氧诱导NHE1表达可能至少部分参与ABCA1蛋白降解。
关键词
三磷酸腺苷结合盒转运体A1
阿米洛利
钠氢交换体1
钙蛋白酶
Keywords
Adenosine triphosphate-binding cassette transporter A1
Amiloride
Sodium-hydrogen exchanger 1
Calpain
分类号
R364.4 [医药卫生—病理学]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Amiloride通过抑制缺氧诱导的NHE1表达而延缓calpain介导的ABCA1降解
莫显刚
张莉
张洛超
王龙
向凝
杨涓
宋翔
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
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