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过表达NHE1通过上调钙蛋白酶活性降低RAW264.7细胞ABCA1蛋白表达 被引量:4
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作者 莫显刚 王兰 +5 位作者 郭静 洪伟 龙世棋 张莉 向凝 杨涓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-16,共5页
目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细... 目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细胞内定位,酸负载p H回复检测NHE1活性,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白对RAW264.7细胞ABCA1蛋白水平及钙蛋白酶(calpain)活性的影响,加入calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN),Western blot法检测肝脏X受体激动剂TO-901317诱导ABCA1蛋白表达水平的影响。结果 Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞后,高表达NHE1-EGFP融合蛋白,定位在细胞质及细胞膜。NHE1-EGFP融合蛋白可降低ABCA1蛋白的表达水平并提高calpain活性,而calpain抑制剂ALLN能阻断ABCA1蛋白表达水平降低。结论 NHE1过表达通过上调calpain活性而降低ABCA1蛋白表达水平。 展开更多
关键词 钠氢交换体1(NHE1) 钙蛋白酶(calpain) RAW264.7细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1) TO-901317
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达格列净对动脉粥样硬化的影响以及与钠氢交换体1相关机制 被引量:2
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作者 张书萍 莫显刚 +4 位作者 张诗悦 陈举海 王兰 杨卉 刘大男 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期10-18,共9页
目的 探讨达格列净对载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)形成的影响以及与钠氢交换体1(NHE1)相关的机制。方法 6周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠24只,随机分为普通饮食组、高脂饮食组、高脂饮食+达格列净组(10 mg/(kg·d))以及... 目的 探讨达格列净对载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)形成的影响以及与钠氢交换体1(NHE1)相关的机制。方法 6周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠24只,随机分为普通饮食组、高脂饮食组、高脂饮食+达格列净组(10 mg/(kg·d))以及高脂饮食+格列美脲组(0.5 mg/(kg·d))。8周后,HE染色检测小鼠主动脉的AS斑块情况,定量PCR及免疫印迹法检测主动脉钠葡萄糖协同转运蛋白2(SGTL2)表达,免疫组化法检测主动脉NHE1表达。进而给予达格列净(10μmol/L)、阿米洛利(20μmol/L)以及脂多糖(100 ng/mL)干预小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞处理24 h,免疫印迹法检测NHE1蛋白表达以及SNARF-1/AM荧光法检测NH_(4)Cl诱导pH值回复率(NHE1活性);酶联免疫吸附法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10分泌情况。结果 高脂饮食+达格列净组主动脉的AS斑块面积显著低于高脂饮食组(P<0.05);各组主动脉斑块内均极低表达SGLT2(P<0.05);高脂饮食+达格列净组内斑块NHE1表达较高脂饮食组下降(P<0.05)。LPS+达格列净组RAW.7细胞的NHE1蛋白水平明显低于LPS组(P<0.05);SNARF-1荧光法提示达格列净处理后细胞内pH值降低(P<0.05),细胞NHE1活性显著降低(P<0.05);与LPS组相比,LPS+达格列净组细胞上清TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著减少(P<0.05),IL-10含量显著增加(P<0.05)。结论 达格列净通过抑制NHE1表达及其活性抑制AS斑块发展及细胞因子释放。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 钠-葡萄糖协同转运蛋白2 达格列净 钠氢交换体1 脂多糖 ApoE^(-/-)小鼠
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血管生成素1与急性缺血性卒中患者侧支循环的关系 被引量:17
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作者 傅阳俊 方丽萍 +2 位作者 彭俊 邓秀梅 毛诗贤 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期408-413,共6页
目的探讨血管生成素1(Ang-1)与急性缺血性卒中患者侧支循环的关系。方法回顾性连续纳入2015年10月至2017年12月在贵州医科大学附属医院及附属白云医院神经内外科住院诊断为急性缺血性卒中(发病2 d内入院),并在入院2 d内行DSA提示大脑前... 目的探讨血管生成素1(Ang-1)与急性缺血性卒中患者侧支循环的关系。方法回顾性连续纳入2015年10月至2017年12月在贵州医科大学附属医院及附属白云医院神经内外科住院诊断为急性缺血性卒中(发病2 d内入院),并在入院2 d内行DSA提示大脑前循环梗死的患者89例,根据美国介入和治疗神经放射学学会/介入放射学学会(ASITN/SIR)侧支循环评估系统对患者DSA影像的侧支循环进行分级并分组,0~1级侧支循环差的患者入组A组(30例),2级侧支循环中等患者入组B组(30例),3~4级侧支循环好的患者入组C组(29例);另连续收集同期行DSA提示颅内外血管未见明显异常的患者31例作为对照组。收集研究对象的临床资料,包括姓名、年龄、性别、高血压史、糖尿病史、吸烟史、饮酒史,并采集研究对象入院2 d内,第7、14、21天晨起空腹血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中及Western Blot测定外周血单核细胞(PBMC)中Ang-1表达水平并进行各组间的比较。结果 4组患者年龄、性别、高血压史、糖尿病史、吸烟史、饮酒史差异均无统计学意义(均P>0.05)。4组患者不同时间血清总体Ang-1水平比较,差异有统计学意义(总体交互效应F=277.597,P<0.01);对照组入院后不同时间点血清Ang-1表达水平差异无统计学意义(F=1.452,P>0.05),而A、B、C组患者血清Ang-1水平在入院2 d内表达水平最高,之后逐渐下降(F值分别为23.896、31.805、18.039,均P<0.01)。同一时间点各组间患者血清Ang-1水平差异均有统计学意义(均P<0.05),A、B、C组血清Ang-1表达水平均较对照组增高(均P<0.05),且侧支循环越好,Ang-1的表达水平越高(均P<0.05)。入院2 d内对照组和A、B、C组患者PBMC Ang-1目的蛋白/内参的积分光密度值的比值(AR)分别为0.07±0.01、0.31±0.02、0.62±0.05、0.81±0.05,组间AR值差异有统计学意义(F=221.50,P<0.01);A、B、C组患者PBMC中Ang-1表达水平AR值均明显高于对照组,侧支循环越好,AR值越高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论急性缺血性卒中患者Ang-1表达水平升高。侧支循环较好的患者在急性缺血性卒中发展过程中Ang-1表达水平更高,Ang-1可能与急性缺血性卒中患者侧支循环的形成有关。 展开更多
关键词 血管生成素1 卒中 急性缺血性卒中 侧支循环
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琥珀酸脱氢酶缺陷型肾细胞癌的临床病理特征 被引量:1
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作者 武静 成元华 +2 位作者 张亚娟 成元冬 龚灵 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第14期2304-2307,共4页
目的探讨琥珀酸脱氢酶缺陷型肾细胞癌(SDH-deficient RCC)的临床病理特征。方法应用免疫组织化学EnVision二步法检测214例肾细胞癌(RCC)患者肿瘤组织中琥珀酸脱氢酶各亚单位(包括SDHA、SDHB、SDHC及SDHD,统称为SDHx)的蛋白表达情况,筛选... 目的探讨琥珀酸脱氢酶缺陷型肾细胞癌(SDH-deficient RCC)的临床病理特征。方法应用免疫组织化学EnVision二步法检测214例肾细胞癌(RCC)患者肿瘤组织中琥珀酸脱氢酶各亚单位(包括SDHA、SDHB、SDHC及SDHD,统称为SDHx)的蛋白表达情况,筛选出SDH-deficient RCC病例,进一步分析其临床病理特征。结果214例RCC中,SDHx表达缺陷(阴性)共7例,占3.3%(7/214)。其中,男2例,女5例,男:女=1:2.5,女性偏多;年龄41~77岁(中位年龄及平均年龄均为56岁);肿瘤位于左肾3例,右肾4例。其中,SDHA蛋白表达缺陷(阴性)2例,占0.9%(2/214);SDHB蛋白表达缺陷(阴性)3例,占1.4%(3/214);SDHC及SDHD蛋白表达缺陷(阴性)各1例,各占0.5%(1/214)。7例SDHx缺陷型病例具有以下病理特征:(1)透明细胞性肾细胞癌5例、嫌色细胞肾细胞癌及乳头状肾细胞癌各1例;(2)肿瘤细胞呈圆形或多边形,胞质透明或嗜酸性,胞质内可见嗜酸性絮状物;(3)肿瘤细胞Fuhrman核分级低者较多(包括I级和Ⅱ级共5例)。其余207例RCC病例,SDHx蛋白表达均为阳性。结论SDH-deficient RCC具有独特的临床病理特征,多为低级别核,以透明细胞性肾细胞癌多见。 展开更多
关键词 肾细胞癌 琥珀酸脱氢酶 免疫组织化学 预后 病理特征
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