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CHOP在索拉菲尼联合辛二酰苯胺异羟肟酸诱导人肝癌细胞MHCC97L凋亡中的作用
被引量：
5
1
作者
蔡爽
韩冰
+7 位作者
郑璐
汤雷
陈雨丝
杨毅
赵金有
杨婷
杨勤
谢汝佳
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期222-228,共7页
目的:探讨CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)在索拉菲尼联合辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导人肝癌细胞MHCC97L凋亡中的作用。方法:采用CCK-8法检测索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞活力的影响;采用流式细胞术检测索拉菲尼联合SAHA对细胞...
目的:探讨CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)在索拉菲尼联合辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导人肝癌细胞MHCC97L凋亡中的作用。方法:采用CCK-8法检测索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞活力的影响;采用流式细胞术检测索拉菲尼联合SAHA对细胞周期及细胞凋亡的影响;应用Western blot法检测索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞中内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、活化转录因子4(ATF4)及CHOP蛋白表达的影响。此外,应用CHOP siRNA沉默CHOP后,采用流式细胞术观察索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞凋亡的影响。结果:索拉菲尼联合SAHA可使MHCC97L细胞活力明显下降(P<0.05),细胞周期结果显示细胞生长被阻滞在G 1期;Western blot结果显示索拉菲尼联合SAHA可显著上调上述内质网应激凋亡通路中相关蛋白的表达,同时流式细胞术检测发现索拉菲尼联合SAHA可显著促进MHCC97L细胞凋亡(P<0.01);CHOP siRNA能显著抑制索拉菲尼联合SAHA诱导的细胞凋亡。结论:索拉菲尼联合SAHA可显著抑制MHCC97L细胞生长并诱导其凋亡,机制可能与上调内质网应激凋亡通路中CHOP的表达有关。
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关键词
内质网应激
细胞凋亡
CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白
索拉菲尼
辛二酰苯胺异羟肟酸
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职称材料
钙蛋白酶2及自噬相关蛋白5对内质网应激诱导的肝细胞凋亡的影响
被引量：
1
2
作者
陈雨丝
韩冰
+9 位作者
郑璐
蔡爽
汤雷
杨毅
郭怡歆
梁猜
赵金有
杨婷
杨勤
谢汝佳
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期847-853,共7页
目的:探讨二硫苏糖醇(DTT)诱导大鼠正常肝细胞BRL-3A发生内质网应激(ERS)过程中钙蛋白酶2(calpain-2)及自噬相关蛋白5(Atg5)对肝细胞凋亡的影响。方法:采用2.0 mmol/L DTT处理BRL-3A细胞0、6、12和24 h,诱导细胞发生ERS;实时无标记细胞...
目的:探讨二硫苏糖醇(DTT)诱导大鼠正常肝细胞BRL-3A发生内质网应激(ERS)过程中钙蛋白酶2(calpain-2)及自噬相关蛋白5(Atg5)对肝细胞凋亡的影响。方法:采用2.0 mmol/L DTT处理BRL-3A细胞0、6、12和24 h,诱导细胞发生ERS;实时无标记细胞分析仪(RTCA)检测DTT对BRL-3A细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;real-time PCR检测calpain-2和Atg5的m RNA表达;Western blot检测calpain-2、Atg5、Atg7、Atg12和微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白水平的变化;免疫共沉淀(Co-IP)方法研究calpain-2与Atg5之间的相互作用。结果:不同浓度的DTT处理细胞后,细胞增殖受到显著抑制;流式细胞术检测凋亡发现,DTT处理BRL-3A细胞6、12和24 h后,细胞凋亡较0 h组显著增多(P<0.05)。流式细胞术检测细胞周期发现,DTT处理细胞后,细胞被阻滞在G1期(P<0.05)。DTT处理细胞6、12和24 h后,细胞中calpain-2和Atg5的m RNA表达水平较0 h组显著上调(P<0.05),calpain-2、Atg12和Atg7的蛋白水平也较0 h组显著升高,且LC3-II/LC3-I比值明显增大,而Atg5的表达较0 h组显著降低(P<0.05)。Co-IP发现,calpain-2抗体可以将Atg5蛋白从细胞裂解物中沉淀下来,Atg5抗体也可以将calpain-2从细胞裂解物中沉淀下来,证实calpain-2与Atg5之间存在相互作用。结论:calpain-2可能通过与Atg5之间的相互作用参与ERS诱导的肝细胞凋亡过程。
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关键词
肝细胞
内质网应激
细胞凋亡
自噬相关蛋白5
钙蛋白酶2
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职称材料
题名
CHOP在索拉菲尼联合辛二酰苯胺异羟肟酸诱导人肝癌细胞MHCC97L凋亡中的作用
被引量：
5
1
作者
蔡爽
韩冰
郑璐
汤雷
陈雨丝
杨毅
赵金有
杨婷
杨勤
谢汝佳
机构
贵州医科大学贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室基础医学院病理生理学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期222-228,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81560105)
贵州医科大学2018年度学术新苗培养及创新探索专项项目培育项目(黔科合平台人[2018]5779-19号)
文摘
目的:探讨CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)在索拉菲尼联合辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导人肝癌细胞MHCC97L凋亡中的作用。方法:采用CCK-8法检测索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞活力的影响;采用流式细胞术检测索拉菲尼联合SAHA对细胞周期及细胞凋亡的影响;应用Western blot法检测索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞中内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、活化转录因子4(ATF4)及CHOP蛋白表达的影响。此外,应用CHOP siRNA沉默CHOP后,采用流式细胞术观察索拉菲尼联合SAHA对MHCC97L细胞凋亡的影响。结果:索拉菲尼联合SAHA可使MHCC97L细胞活力明显下降(P<0.05),细胞周期结果显示细胞生长被阻滞在G 1期;Western blot结果显示索拉菲尼联合SAHA可显著上调上述内质网应激凋亡通路中相关蛋白的表达,同时流式细胞术检测发现索拉菲尼联合SAHA可显著促进MHCC97L细胞凋亡(P<0.01);CHOP siRNA能显著抑制索拉菲尼联合SAHA诱导的细胞凋亡。结论:索拉菲尼联合SAHA可显著抑制MHCC97L细胞生长并诱导其凋亡,机制可能与上调内质网应激凋亡通路中CHOP的表达有关。
关键词
内质网应激
细胞凋亡
CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白
索拉菲尼
辛二酰苯胺异羟肟酸
Keywords
Endoplasmic reticulum stress
Apoptosis
CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein
Sorafenib
Suberoylanilide hydroxamic acid
分类号
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
钙蛋白酶2及自噬相关蛋白5对内质网应激诱导的肝细胞凋亡的影响
被引量：
1
2
作者
陈雨丝
韩冰
郑璐
蔡爽
汤雷
杨毅
郭怡歆
梁猜
赵金有
杨婷
杨勤
谢汝佳
机构
贵州
医科
大学
贵州省
常见
慢性
疾病
发病
机制及
药物
研究
重点
实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期847-853,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81560105)
贵州医科大学2018年度学术新苗培养及创新探索专项项目培育项目(黔科合平台人[2018]5779-19号)。
文摘
目的:探讨二硫苏糖醇(DTT)诱导大鼠正常肝细胞BRL-3A发生内质网应激(ERS)过程中钙蛋白酶2(calpain-2)及自噬相关蛋白5(Atg5)对肝细胞凋亡的影响。方法:采用2.0 mmol/L DTT处理BRL-3A细胞0、6、12和24 h,诱导细胞发生ERS;实时无标记细胞分析仪(RTCA)检测DTT对BRL-3A细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;real-time PCR检测calpain-2和Atg5的m RNA表达;Western blot检测calpain-2、Atg5、Atg7、Atg12和微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白水平的变化;免疫共沉淀(Co-IP)方法研究calpain-2与Atg5之间的相互作用。结果:不同浓度的DTT处理细胞后,细胞增殖受到显著抑制;流式细胞术检测凋亡发现,DTT处理BRL-3A细胞6、12和24 h后,细胞凋亡较0 h组显著增多(P<0.05)。流式细胞术检测细胞周期发现,DTT处理细胞后,细胞被阻滞在G1期(P<0.05)。DTT处理细胞6、12和24 h后,细胞中calpain-2和Atg5的m RNA表达水平较0 h组显著上调(P<0.05),calpain-2、Atg12和Atg7的蛋白水平也较0 h组显著升高,且LC3-II/LC3-I比值明显增大,而Atg5的表达较0 h组显著降低(P<0.05)。Co-IP发现,calpain-2抗体可以将Atg5蛋白从细胞裂解物中沉淀下来,Atg5抗体也可以将calpain-2从细胞裂解物中沉淀下来,证实calpain-2与Atg5之间存在相互作用。结论:calpain-2可能通过与Atg5之间的相互作用参与ERS诱导的肝细胞凋亡过程。
关键词
肝细胞
内质网应激
细胞凋亡
自噬相关蛋白5
钙蛋白酶2
Keywords
Hepatocytes
Endoplasmic reticulum stress
Apoptosis
Autophagy-related protein 5
Calpain-2
分类号
R3632 [医药卫生—病理学]
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CHOP在索拉菲尼联合辛二酰苯胺异羟肟酸诱导人肝癌细胞MHCC97L凋亡中的作用
蔡爽
韩冰
郑璐
汤雷
陈雨丝
杨毅
赵金有
杨婷
杨勤
谢汝佳
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
钙蛋白酶2及自噬相关蛋白5对内质网应激诱导的肝细胞凋亡的影响
陈雨丝
韩冰
郑璐
蔡爽
汤雷
杨毅
郭怡歆
梁猜
赵金有
杨婷
杨勤
谢汝佳
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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