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SIRT1通过调节FOXO1/RAB7信号通路促进低氧诱导的胰腺癌细胞自噬 被引量:10
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作者 田舍 江建新 +2 位作者 喻超 李琳 孙诚谊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1545-1550,共6页
目的:探讨SIRT1对低氧诱导的胰腺癌细胞自噬的影响及FOXO1/RAB7信号通路在其中的作用。方法:利用Western blot和免疫荧光法检测SIRT1在低氧诱导的自噬胰腺癌细胞核内的表达情况。将下调 SIRT1 基因的小干扰RNA和过表达 SIRT1 的质粒转... 目的:探讨SIRT1对低氧诱导的胰腺癌细胞自噬的影响及FOXO1/RAB7信号通路在其中的作用。方法:利用Western blot和免疫荧光法检测SIRT1在低氧诱导的自噬胰腺癌细胞核内的表达情况。将下调 SIRT1 基因的小干扰RNA和过表达 SIRT1 的质粒转染到胰腺癌Panc-1细胞中,敲减和过表达 SIRT1 基因;激光共聚焦显微镜追踪双色LC3荧光蛋白表达,Western blot实验检测自噬相关蛋白LC3、p62及FOXO1/RAB7信号通路的蛋白表达情况。通过生物信息学GEPIA网站关联性分析预测SIRT1与FOXO1的相互作用,并进一步利用免疫共沉淀技术检测 SIRT1与FOXO1蛋白的相互作用。结果: SIRT1在低氧诱导的胰腺癌细胞核内表达增加。敲减SIRT1 的表达可以引起胰腺癌细胞自噬受抑制。过表达 SIRT1 能够增强Panc-1细胞中FOXO1和RAB7的蛋白表达水平( P <0.05),而当 SIRT1 表达下调时,FOXO1和RAB7表达受到抑制( P <0.05)。SIRT1与FOXO1蛋白存在相互作用。结论: SIRT1可能参与胰腺癌细胞自噬的调控,其机制可能与 FOXO1/RAB7信号通路有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 SIRT1蛋白 自噬 FOXO1/RAB7信号通路
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LincRNA00858靶向miR-3126-5p影响肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 雷林翰 郑迪杰 +5 位作者 吴纯宸 郑戬 谢华华 华豪 孙诚谊 喻超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期427-433,共7页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)Linc00858通过调控靶向小分子RNA-3126-5p(miR-3126-5p)影响肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Linc00858在肝癌组织、癌旁正常组织、人正常肝细胞LO2和人肝癌... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)Linc00858通过调控靶向小分子RNA-3126-5p(miR-3126-5p)影响肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Linc00858在肝癌组织、癌旁正常组织、人正常肝细胞LO2和人肝癌细胞系中的表达情况及两者相对关系。筛选出人肝癌细胞HUH-7和MHCC-97H作为研究对象,分别转染Linc00858过表达和干扰Linc00858表达的重组慢病毒,使用q RT-PCR测定转染效果,通过CCK-8实验、Transwell实验检测肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力,Western blot实验检测Linc00858对上皮-间质转化和细胞周期相关的蛋白表达水平的影响;生物信息学预测和双荧光素酶报告实验确定两者的结合关系。调整Linc00858的表达水平后,采用qRT-PCR法检测肝癌细胞中miR-3126-5p表达水平的变化,将miR-3126-5p mimics和miR-3126-5p inhibitor分别进行转染,通过上述方法再次检测肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力及相关蛋白表达情况。结果Linc00858在肝癌组织和细胞中的表达量高于癌旁正常组织和LO2;过表达Linc00858后HUH-7细胞增殖、迁移及侵袭能力明显上升,细胞周期蛋白E1(cyclin E1)、周期素依赖性激酶2(CDK2)和波形蛋白(Vimentin)的表达明显上升,P27和钙粘附蛋白E(E-cadherin)的表达明显下降;沉默Linc00858可以抑制MCHH-97H细胞增殖、迁移及侵袭能力,cyclin E1、CDK2和Vimentin的表达明显下降,P27和E-cadherin的表达明显上升;Linc00858靶向调控miR-3126-5p的表达,miR-3126-5p mimics能明显逆转过表达Linc00858对HUH-7细胞的增殖、迁移及侵袭能力以及相关蛋白表达水平;miR-3126-5p inhibitor可以逆转沉默Linc00858对MHCC-97H细胞的增殖、迁移及侵袭能力以及相关蛋白表达水平。结论Linc00858通过负向调控miR-3126-5p来促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 肝癌 长链非编码RNA 00858 小分子RNA-3126-5p 细胞侵袭 细胞迁移
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