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高糖促进小鼠肾小管上皮细胞DNMT3B表达并通过激活β-catenin信号通路促进纤维化相关蛋白分泌
被引量:
2
1
作者
屈玲玲
邹琴
+5 位作者
李清璇
李晓颖
刘忠强
周宇霞
郭兵
石明隽
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第7期608-615,共8页
目的观察高糖条件下小鼠肾小管上皮细胞(RTEC)中DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)对分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)表达的影响及对Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用。方法将体外培养的小鼠RTEC分为正常糖(NG)组和高糖(HG)组。RTEC分别转...
目的观察高糖条件下小鼠肾小管上皮细胞(RTEC)中DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)对分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)表达的影响及对Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用。方法将体外培养的小鼠RTEC分为正常糖(NG)组和高糖(HG)组。RTEC分别转染DNMT3B短发夹RNA(sh-DNMT3B)及DNMT3B过表达(DNMT3B-OE)质粒后,反转录PCR检测RTEC的DNMT3B、 SFRP1、Ⅳ型胶原蛋白(Col4)、纤连蛋白(FN)mRNA表达,Western blot法检测DNMT3B、 SFRP1、糖原合成酶3β(GSK3β)、磷酸化的GSK3β(p-GSK3β)、β-catenin、 Col4、 FN的蛋白表达。免疫荧光细胞化学染色检测DNMT3B和SFRP1在RTEC的表达和定位。结果与NG组相比,HG组RTEC中DNMT3B、β-catenin、 p-GSK3β、 Col4、 FN蛋白表达增加,SFRP1表达降低。与空载体组比较,敲低DNMT3B后,HG条件下RTEC的SFRP1 mRNA及蛋白表达均增加,β-catenin、 p-GSK3β、 Col4蛋白表达降低,FN的mRNA和蛋白表达均降低,而β-catenin mRNA表达无明显改变;过表达DNMT3B后,各指标表达情况与上述结果相反。DNMT3B及SFRP1在RTEC的细胞核及细胞质中均有表达,与NG组相比,HG组的细胞可见DNMT3B在细胞核内聚集,且与SFRP1的共定位增加。结论 HG刺激增加RTEC的DNMT3B表达,下调SFRP1表达,激活Wnt/β-catenin信号通路促进细胞外基质形成。
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关键词
肾脏纤维化
小鼠肾小管上皮细胞(RTEC)
DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)
分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)
Wnt
β联蛋白(β-catenin)
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题名
高糖促进小鼠肾小管上皮细胞DNMT3B表达并通过激活β-catenin信号通路促进纤维化相关蛋白分泌
被引量:
2
1
作者
屈玲玲
邹琴
李清璇
李晓颖
刘忠强
周宇霞
郭兵
石明隽
机构
贵州医科大学病理学与病理生理学教研室
贵州
省贵阳市第一人民医院肾内科
贵州
省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第7期608-615,共8页
基金
贵州省科技计划项目(黔科合LH字[2016]7353号,黔科合基础[2016]1117号)
贵阳市科技局基金项目(筑科合同[2017]30-23号)。
文摘
目的观察高糖条件下小鼠肾小管上皮细胞(RTEC)中DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)对分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)表达的影响及对Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用。方法将体外培养的小鼠RTEC分为正常糖(NG)组和高糖(HG)组。RTEC分别转染DNMT3B短发夹RNA(sh-DNMT3B)及DNMT3B过表达(DNMT3B-OE)质粒后,反转录PCR检测RTEC的DNMT3B、 SFRP1、Ⅳ型胶原蛋白(Col4)、纤连蛋白(FN)mRNA表达,Western blot法检测DNMT3B、 SFRP1、糖原合成酶3β(GSK3β)、磷酸化的GSK3β(p-GSK3β)、β-catenin、 Col4、 FN的蛋白表达。免疫荧光细胞化学染色检测DNMT3B和SFRP1在RTEC的表达和定位。结果与NG组相比,HG组RTEC中DNMT3B、β-catenin、 p-GSK3β、 Col4、 FN蛋白表达增加,SFRP1表达降低。与空载体组比较,敲低DNMT3B后,HG条件下RTEC的SFRP1 mRNA及蛋白表达均增加,β-catenin、 p-GSK3β、 Col4蛋白表达降低,FN的mRNA和蛋白表达均降低,而β-catenin mRNA表达无明显改变;过表达DNMT3B后,各指标表达情况与上述结果相反。DNMT3B及SFRP1在RTEC的细胞核及细胞质中均有表达,与NG组相比,HG组的细胞可见DNMT3B在细胞核内聚集,且与SFRP1的共定位增加。结论 HG刺激增加RTEC的DNMT3B表达,下调SFRP1表达,激活Wnt/β-catenin信号通路促进细胞外基质形成。
关键词
肾脏纤维化
小鼠肾小管上皮细胞(RTEC)
DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)
分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)
Wnt
β联蛋白(β-catenin)
Keywords
renal fibrosis
renal tubular epithelial cells(RTECs)
DNA methyltransferase 3B(DNMT3B)
secreted frizzled-related protein 1(SFRP1)
Wnt
β-catenin
分类号
R692 [医药卫生—泌尿科学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高糖促进小鼠肾小管上皮细胞DNMT3B表达并通过激活β-catenin信号通路促进纤维化相关蛋白分泌
屈玲玲
邹琴
李清璇
李晓颖
刘忠强
周宇霞
郭兵
石明隽
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
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