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抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
1
1
作者
刘江丽
李盈盈
+5 位作者
王佳雯
许喻鈞
张艳
黄江涛
胡祖权
曾柱
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第3期429-432,437,共5页
目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细...
目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1~5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×10^(4)以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。
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关键词
严重急性呼吸综合征冠状病毒2
核衣壳蛋白
单克隆抗体
免疫学检测
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职称材料
题名
抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
1
1
作者
刘江丽
李盈盈
王佳雯
许喻鈞
张艳
黄江涛
胡祖权
曾柱
机构
贵州医科大学生物与工程学院贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室/生物与医学工程重点实验室
贵州
医科
大学
省部共建药用植物功效与利用国家
重点
实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第3期429-432,437,共5页
基金
国家自然科学基金(编号:31660258)
贵州省科学技术基金(编号:黔科合支撑[2019]2787号
+1 种基金
黔科合平台人才[2016]5676)
国家级大学生创新创业训练项目(编号:202010660035)。
文摘
目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1~5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×10^(4)以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。
关键词
严重急性呼吸综合征冠状病毒2
核衣壳蛋白
单克隆抗体
免疫学检测
Keywords
severe acute respiratory syndrome coronavirus 2
nucleocapsid protein
monoclonal antibodies
immunological detection
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
刘江丽
李盈盈
王佳雯
许喻鈞
张艳
黄江涛
胡祖权
曾柱
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022
1
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