目的骨质疏松症严重威胁着人们的生命健康,亟需清晰认识其病理机制。在破骨细胞主导的骨质过度流失中,骨微观结构的影响不可忽视,尤其是矿化胶原纤维,然而,骨质疏松骨纳米结构与破骨细胞间相互作用规律的研究仍较少。方法通过卵巢切除...目的骨质疏松症严重威胁着人们的生命健康,亟需清晰认识其病理机制。在破骨细胞主导的骨质过度流失中,骨微观结构的影响不可忽视,尤其是矿化胶原纤维,然而,骨质疏松骨纳米结构与破骨细胞间相互作用规律的研究仍较少。方法通过卵巢切除术构建骨质疏松骨大鼠模型,8周后取出股骨做宏观力学性能评价,原子力显微镜(AFM)表征抛光骨片试样的微观结构、力学性质。RAW264.7细胞共培养于不同生理状态的股骨片表面,含50 ng/m L RANKL的基本培养基诱导;第9天,取出骨片试样,AFM观察破骨细胞的行为及骨吸收情况、骨吸收陷窝表面。结果宏观力学测试结果表明骨质疏松大鼠股骨的力学性能发生退变,AFM结果显示,相较于健康骨,骨质疏松骨在纳米尺度的矿物聚集体颗粒尺寸较小,弹性模量较大,表明微观结构趋向于脆性发展。细胞实验显示,在骨质疏松骨中,破骨细胞与骨吸收陷窝数量、面积均较大,骨吸收陷窝区域的胶原暴露更明显,弹性模量较小,表明破骨细胞在骨质疏松骨中的骨吸收程度更强。结论骨质疏松骨微观结构及力学性能的退变会增强破骨细胞的骨吸收功能。本研究为深入揭示骨质疏松症的恶性循环发展机理提供了新的思路,未来工作将从动态力学刺激的角度探究骨质疏松症发生发展机制。展开更多
【目的】筛选出最适宜兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞的培养条件和最佳培养基组合，并对其原代细胞进行鉴定，为蚋类细胞系的建立打下基础。【方法】采用组织块和单细胞法对兴义维蚋蚋卵（胚胎）进行原代细胞培养，分析培养基、温度、pH...【目的】筛选出最适宜兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞的培养条件和最佳培养基组合，并对其原代细胞进行鉴定，为蚋类细胞系的建立打下基础。【方法】采用组织块和单细胞法对兴义维蚋蚋卵（胚胎）进行原代细胞培养，分析培养基、温度、pH、CO2和培养器皿对细胞培养的影响；并测定蚋卵（胚胎）及原代细胞的rDNA-ITS区序列，通过构建基于ITS区序列的蚋类系统发育进化树鉴定其种属来源。【结果】兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞最适宜的培养方法为组织块法，培养基为改良型Shields and Sang M3，pH 6.0-6.5，培养温度28℃，恒温生化培养箱和5% CO2培养箱对原代细胞培养无明显差异，培养器皿为经多聚赖氨酸（PLL）处理的一次性塑料培养皿/板。由基于ITS区序列构建的蚋类系统发育进化树可知，蚋卵（胚胎）及其原代培养细胞均来源于兴义维蚋。【结论】成功建立的兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞培养方法可在科研生产中进一步推广应用。展开更多
文摘目的骨质疏松症严重威胁着人们的生命健康,亟需清晰认识其病理机制。在破骨细胞主导的骨质过度流失中,骨微观结构的影响不可忽视,尤其是矿化胶原纤维,然而,骨质疏松骨纳米结构与破骨细胞间相互作用规律的研究仍较少。方法通过卵巢切除术构建骨质疏松骨大鼠模型,8周后取出股骨做宏观力学性能评价,原子力显微镜(AFM)表征抛光骨片试样的微观结构、力学性质。RAW264.7细胞共培养于不同生理状态的股骨片表面,含50 ng/m L RANKL的基本培养基诱导;第9天,取出骨片试样,AFM观察破骨细胞的行为及骨吸收情况、骨吸收陷窝表面。结果宏观力学测试结果表明骨质疏松大鼠股骨的力学性能发生退变,AFM结果显示,相较于健康骨,骨质疏松骨在纳米尺度的矿物聚集体颗粒尺寸较小,弹性模量较大,表明微观结构趋向于脆性发展。细胞实验显示,在骨质疏松骨中,破骨细胞与骨吸收陷窝数量、面积均较大,骨吸收陷窝区域的胶原暴露更明显,弹性模量较小,表明破骨细胞在骨质疏松骨中的骨吸收程度更强。结论骨质疏松骨微观结构及力学性能的退变会增强破骨细胞的骨吸收功能。本研究为深入揭示骨质疏松症的恶性循环发展机理提供了新的思路,未来工作将从动态力学刺激的角度探究骨质疏松症发生发展机制。
文摘【目的】筛选出最适宜兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞的培养条件和最佳培养基组合，并对其原代细胞进行鉴定，为蚋类细胞系的建立打下基础。【方法】采用组织块和单细胞法对兴义维蚋蚋卵（胚胎）进行原代细胞培养，分析培养基、温度、pH、CO2和培养器皿对细胞培养的影响；并测定蚋卵（胚胎）及原代细胞的rDNA-ITS区序列，通过构建基于ITS区序列的蚋类系统发育进化树鉴定其种属来源。【结果】兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞最适宜的培养方法为组织块法，培养基为改良型Shields and Sang M3，pH 6.0-6.5，培养温度28℃，恒温生化培养箱和5% CO2培养箱对原代细胞培养无明显差异，培养器皿为经多聚赖氨酸（PLL）处理的一次性塑料培养皿/板。由基于ITS区序列构建的蚋类系统发育进化树可知，蚋卵（胚胎）及其原代培养细胞均来源于兴义维蚋。【结论】成功建立的兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞培养方法可在科研生产中进一步推广应用。
