实验动物SPF实验室改革初探 被引量：1

1

作者 邹习俊 杨红宇 +5 位作者 舒莉萍 江滟 张硕 智妍 罗红 兰露莎 《贵州畜牧兽医》 2016年第6期33-34,共2页

实验动物广泛应用于医学、药学、遗传学、生物学等众多研究领域。随着科学技术的进步和发展．对实验动物的要求也越来越严格。SPF（Speciific Pathogen Free）动物即无特定病原体动物，因其不携带潜在感染或条件致病菌，能够保证实验数... 实验动物广泛应用于医学、药学、遗传学、生物学等众多研究领域。随着科学技术的进步和发展．对实验动物的要求也越来越严格。SPF（Speciific Pathogen Free）动物即无特定病原体动物，因其不携带潜在感染或条件致病菌，能够保证实验数据的精确性，已成为生命科学研究中被广泛使用的实验动物。 展开更多

关键词 实验动物 实验室 SPF 改革 无特定病原体 条件致病菌 科学技术 实验数据

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医学院校动物实验课程教学改革探索 被引量：4

2

作者 罗红 智妍 +3 位作者 邹习俊 张硕 兰露莎 杨红宇 《贵州畜牧兽医》 2020年第6期26-28,共3页

文章针对已有部分实验动物操作基础的学生如何开展医学院校《实验动物学》实验课程教学改革进行了探讨,在教学实践中首先对学生已有的理论知识结构及动手能力进行分析,并结合毕业后从事职业的特殊性精简教学内容,理论联系实际,创新性地... 文章针对已有部分实验动物操作基础的学生如何开展医学院校《实验动物学》实验课程教学改革进行了探讨,在教学实践中首先对学生已有的理论知识结构及动手能力进行分析,并结合毕业后从事职业的特殊性精简教学内容,理论联系实际,创新性地采用每种动物进行基本技能操作与应用相结合开展实验教学,不仅注重学生基本动手技能的培养,更注重加强培养学生运用所学知识开展科学研究的能力,并在此基础上引入《实验动物学》的新技术、新方法,拓宽学生的知识面,增加学生的学习兴趣,取得了良好的教学效果。 展开更多

关键词 动物实验 教学改革

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贵州省黔灵山卷蛾寄蝇族昆虫资源调查

3

作者 智妍 罗宇 +1 位作者 张春田 刘家宇 《贵州农业科学》 CAS 2020年第11期43-47,F0002,共6页

为贵阳及类似地区卷蛾寄蝇族昆虫的进一步开发利用提供参考,通过标本分类鉴定与文献资料相结合的方法,研究贵州省黔灵山卷蛾寄蝇族昆虫物种多样性及动物地理区系分布与类型。结果表明:贵州省黔灵山卷蛾寄蝇族昆虫共13属15种,包括:卷蛾... 为贵阳及类似地区卷蛾寄蝇族昆虫的进一步开发利用提供参考,通过标本分类鉴定与文献资料相结合的方法,研究贵州省黔灵山卷蛾寄蝇族昆虫物种多样性及动物地理区系分布与类型。结果表明:贵州省黔灵山卷蛾寄蝇族昆虫共13属15种,包括:卷蛾寄蝇属(Blondelia Robineau-Desvoidy)和利索寄蝇属(Lixophaga Townsend)2个贵州省新记录属,黄足突额寄蝇(Biomeigenia flava Chao)、短尾卷蛾寄蝇〔Blondelia siamense(Baranov)〕、筒腹奥斯沃寄蝇〔Oswaldia eggeri(Brauer-Bergenstamm)〕和软髭寄蝇〔Vibrissina debilitata(Pandellé)〕4个贵州省新记录种。黔灵山卷蛾寄蝇族昆虫在世界动物地理区划中的区属面貌共有3种区系型,在中国动物地理区划中的区属面貌共有7种区系型。 展开更多

关键词 卷蛾寄蝇族 寄蝇科 分类 名录 动物地理区系 黔灵山 贵州

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高校实验室的构成及建设管理 被引量：2

4

作者 罗红 邹习俊 +3 位作者 智妍 兰露莎 张硕 杨红宇 《贵州畜牧兽医》 2018年第2期39-41,共3页

针对高校实验室建设中存在的重硬件、轻软件,重建设、轻管理的现象,特别是对实验室的内涵建设认识不够等问题,通过分析高校实验室的构成体系,提出实验室构成的基本思路,强调实验室内涵建设的重要性,并结合目前在实验室管理中所采用的新... 针对高校实验室建设中存在的重硬件、轻软件,重建设、轻管理的现象,特别是对实验室的内涵建设认识不够等问题,通过分析高校实验室的构成体系,提出实验室构成的基本思路,强调实验室内涵建设的重要性,并结合目前在实验室管理中所采用的新技术、新办法,加强实验室的建设及管理。 展开更多

关键词 实验室 构成 建设 管理

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不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数研究

5

作者 邹习俊 杨红宇 +4 位作者 江滟 智妍 兰露莎 朱颜鑫 邹乾 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期69-71,78,共4页

目的研究不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数。方法采用SD大鼠64只,雌雄各半,体重200-250 g,随机分为空白对照组（n=16）;模型组（n=48）。模型组分为高剂量组（n=16）：80 mg/kg野百合碱采... 目的研究不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数。方法采用SD大鼠64只,雌雄各半,体重200-250 g,随机分为空白对照组（n=16）;模型组（n=48）。模型组分为高剂量组（n=16）：80 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射;10 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周;中剂量组（n=16）：55 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射;8 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周;低剂量组（n=16）：30 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射,3 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周。动物饲养到第6周后,行肺动脉压和右心室内压检测,心系数和右心室肥厚指数测定。结果与对照组比较,低剂量平均肺动脉压和右室收缩压均无差异变化;中剂量组平均肺动脉压、右室收缩压均有差异变化（P〈0.05）,低剂量组心系数和右心室肥厚指数均无差异显著。中剂量组心系数差异极显著（P〈0.01）,右心室肥厚指数差异显著（P〈0.05）。结论说明采用一次性注射野百合碱55 mg/kg,联合连续注射8 mg/kg异丙肾上腺素1周。既保证了大鼠的存活率,又保证了肺动脉高压的成功形成,野百合碱和异丙肾上腺素能对大鼠产生肺动脉高压,导致心气虚弱。 展开更多

关键词 野百合碱 异丙肾上腺素 大鼠 血流动力学 心指数 右心肥厚指数

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利用吗啉代寡核苷酸技术下调早期斑马鱼胚胎lmna基因的初步研究 被引量：5

6

作者 刘丰 黄慧敏 +3 位作者 王志华 吴西军 何志旭 舒莉萍 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期85-90,共6页

目的利用吗啉代寡核苷酸技术建立下调斑马鱼lmna基因的技术方法。方法在斑马鱼lmna基因序列中选择靶点,设计针对斑马鱼lmna基因的吗啉代寡核苷酸序列(lmna-MO),构建能特异指示lmna基因表达的lmna-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并通过显微注射... 目的利用吗啉代寡核苷酸技术建立下调斑马鱼lmna基因的技术方法。方法在斑马鱼lmna基因序列中选择靶点,设计针对斑马鱼lmna基因的吗啉代寡核苷酸序列(lmna-MO),构建能特异指示lmna基因表达的lmna-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并通过显微注射方式将二者共注射入斑马鱼胚胎中,通过观察胚胎中绿色荧光表达量反应lmna基因表达量,并通过蛋白质印迹法检测胚胎中lamin蛋白表达量。结果蛋白质印迹法检测斑马鱼体内lamin蛋白的表达,分别有大小为69 KD和62 KD两种蛋白表达。设计并构建了lmna-MO和重组质粒lmnaEGFP-pCS^(2+),单独注射lmna-EGFP-pCS^(2+)质粒后观察到从6 hpf到96 hpf胚胎均有绿色荧光蛋白表达;二者共注射后观察到,与对照组相比,实验组从6 hpf至30 hpf胚胎中绿色荧光蛋白表达量均不同程度下降或消失;蛋白质印迹实验结果显示实验组胚胎内lamin蛋白表达量明显下降。表明已成功下调了斑马鱼胚胎lmna基因表达。结论可通过lmna-MO和重组质粒lmna-EGFP-pCS^(2+)共注射方法下调斑马鱼lmna基因表达,并通过绿色荧光蛋白表达量反映下调效果。该方法可为深入研究人核纤层病提供良好的动物模型。 展开更多

关键词 斑马鱼 LMNA 基因下调 吗啉代寡核苷酸技术

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重组甲型流感病毒NS2蛋白抑制感染小鼠肺组织干扰素的产生 被引量：3

7

作者 朱颜鑫 牟秋菊 +4 位作者 赵兵兵 罗红 智妍 兰露莎 江滟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1615-1619,共5页

目的用大肠杆菌表达获得甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白2(NS2),并观察NS2蛋白对小鼠肺组织γ干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法构建p ET22b(+)/NS2原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),通过诱导表达、纯化获得NS2。将40只BALB/c小鼠... 目的用大肠杆菌表达获得甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白2(NS2),并观察NS2蛋白对小鼠肺组织γ干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法构建p ET22b(+)/NS2原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),通过诱导表达、纯化获得NS2。将40只BALB/c小鼠,随机分8组,分别为正常对照组、200μg/kg NS2联合病毒组、200μg/kg NS2联合RNA组、100μg/kg灭活病毒、0.2×半数致死量(LD50)病毒组、50μg/kg病毒RNA组、200μg/kg NS2组和100μg/kg NS2组,各组滴鼻给予小鼠处理。通过反转录PCR、Western blot法分别检测肺组织IFN-γ的mRNA和蛋白表达。结果在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达并纯化获得重组NS2;将NS2或/和IAV滴鼻给小鼠后,反转录PCR和Western blot法检测表明NS2联合病毒组的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白水平较病毒组均降低。结论 NS2抑制IAV所诱导的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白的水平。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 非结构蛋白 Γ干扰素

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下调lmna基因对斑马鱼胚胎髓系和红系造血干细胞发育的影响 被引量：1

8

作者 候仕芳 王志华 +2 位作者 王珺 何志旭 舒莉萍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期620-625,共6页

目的：探讨lmna基因下调对斑马鱼早期造血干细胞发育的影响。方法：显微注射法将Imna基因mRNA的吗啉代反义寡核苷酸注入单细胞期斑马鱼胚胎（实验组），显微注射无意义的吗啉代寡核苷酸作为对照组。待胚胎发育至受精18、24、30、36hpf... 目的：探讨lmna基因下调对斑马鱼早期造血干细胞发育的影响。方法：显微注射法将Imna基因mRNA的吗啉代反义寡核苷酸注入单细胞期斑马鱼胚胎（实验组），显微注射无意义的吗啉代寡核苷酸作为对照组。待胚胎发育至受精18、24、30、36hpf后收集胚胎进行实验。RT—PCR和全胚胎原位杂交方法检测斑马鱼髓系造血转录因子pu．1和红系造血转录因子gata1的变化。结果：RT—PCR结果显示，实验组pu.1和gata1表达均较对照组下降（均P〈0．05）。原位杂交结果显示，实验组pu.1和gata1蓝黑色阳性杂交信号较对照组变浅。结论：lmna基因下调会阻碍斑马鱼髓系造血干细胞和红系造血干细胞的发育。 展开更多

关键词 疯马鱼 核纤层蛋白A型 转录因子 基因 基因表达调控 造血干 细胞 寡核苷酸类 反义

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hoxb4转基因斑马鱼造血发育中rap1b基因的表达 被引量：1

9

作者 刘冉冉 杨小燕 +4 位作者 姬牧远 吴西军 范安然 舒莉萍 何志旭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期243-248,共6页

目的为了发现在早期造血发育中关键的调控因子,利用hoxb4转基因斑马鱼研究rap1b基因的表达变化情况,以期明确hoxb4与rap1b在早期造血发育中的关系。方法选取过表达hoxb4的斑马鱼系为研究对象,分为3组:实验组(表达hoxb4-EGFP的斑马鱼),... 目的为了发现在早期造血发育中关键的调控因子,利用hoxb4转基因斑马鱼研究rap1b基因的表达变化情况,以期明确hoxb4与rap1b在早期造血发育中的关系。方法选取过表达hoxb4的斑马鱼系为研究对象,分为3组:实验组(表达hoxb4-EGFP的斑马鱼),实验对照组(表达EGFP的斑马鱼),空白对照组(野生型斑马鱼)。通过流式分选技术将实验对照组和实验组18hpf(斑马鱼胚胎受精发育18 h)、24、30、36、48hpf胚胎中带有绿色荧光(enhanced green fluorescent protein,EGFP)信号的细胞分选出来,利用实时荧光定量PCR检测分选出的细胞中的rap1b基因的表达变化;然后收集野生型斑马鱼多时相胚胎,制备rap1b基因的反义m RNA探针,通过胚胎原位杂交观察探针在3组斑马鱼胚胎18、24、30、36、48hpf杂交信号表达部位。结果 q RT-PCR结果显示实验组30、36、48hpf的斑马鱼胚胎的rap1b基因的表达明显增强(P<0.05);制备了rap1b基因的反义m RNA探针,胚胎整体原位杂交结果显示:rap1b基因在3组斑马鱼胚胎18~48hpf之间神经发育和造血发育部位都有表达。结论在过表达hoxb4转基因斑马鱼中rap1b基因表达有明显的升高趋势,提示rap1b基因与hoxb4基因可能共同参与调节早期造血发育过程。 展开更多

关键词 造血发育 HOXB4 rap1b 斑马鱼

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g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达 被引量：1

10

作者 夏海雄 李莉 +3 位作者 周艳华 任平平 何志旭 舒莉萍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期57-63,共7页

目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(... 目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并将其显微注射入斑马鱼胚胎内,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;蛋白质印迹法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白的表达量;改良G6pd定量比值法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd酶活性。结果:g6pd基因在进化过程中相对保守,斑马鱼与人类的G6pd蛋白质相似度为88%,斑马鱼与小鼠的G6pd蛋白质相似度为87%。原位杂交试验结果显示,g6pd基因主要表达于斑马鱼的造血组织,显微注射g6pd-EGFP-p CS2+重组质粒后观察的结果与原位杂交试验结果一致。24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白相对表达量分别为1.44±0.03、1.47±0.05、1.54±0.02,差异无统计学意义(P>0.05);G6pd酶活性分别为1.74±0.17、1.75±0.12、1.71±0.22,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功观察到斑马鱼体内g6pd基因表达部位及其变化规律,并测定了不同发育时相斑马鱼胚胎中G6pd蛋白表达和酶活性,为建立斑马鱼G6PD缺乏症模型奠定了基础。 展开更多

关键词 葡糖磷酸脱氢酶缺乏 葡糖磷酸脱氢酶 原位杂交 DNA 重组 质粒 基因表达 斑马鱼 胚胎发育

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基于网络药理学方法和分子对接技术探讨刺梨治疗高血脂症的作用机制 被引量：9

11

作者 季嘉城 袁敏艳 +4 位作者 张硕 唐丽 王鹏娇 张敏 高秀丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1572-1578,共7页

目的基于实验验证和网络药理学探究刺梨治疗高血脂症的效果和作用机制。方法构建高血脂大鼠模型,通过考察血脂指标和肝脏病理学变化来探究刺梨对高血脂症的治疗作用。采用文献检索法收集刺梨有效成分及靶点;利用GeneCards、OMIM、DrugB... 目的基于实验验证和网络药理学探究刺梨治疗高血脂症的效果和作用机制。方法构建高血脂大鼠模型,通过考察血脂指标和肝脏病理学变化来探究刺梨对高血脂症的治疗作用。采用文献检索法收集刺梨有效成分及靶点;利用GeneCards、OMIM、DrugBank数据库筛选疾病靶点;构建中药-活性成分-潜在靶点网络和蛋白互作(PPI)网络;使用DAVID软件进行靶点GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;使用AutoDock进行分子对接。结果刺梨能够明显改善高血脂大鼠的血脂异常和肝脏病理损伤;网络药理学结果显示RXRA、AKT1、ESR1、PIK3R1是刺梨降血脂的关键靶点;分子对接表明Roxburic acid、α-亚麻酸与RXRA、AKT1、ESR1、PIK3R1均有较好的结合性。结论结合药效学实验和网络药理学-分子对接,初步探索了刺梨对高血脂症的治疗作用和可能的作用机制,为深入研究药效物质基础、作用机制以及临床应用提供一定的基础。 展开更多

关键词 刺梨 高血脂症 动物实验 网络药理学 分子对接 作用机制

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杜洛克、长白、大约克猪性能对比试验 被引量：1

12

作者 兰露莎 罗卫星 陈大芳 《中国畜牧业》 2015年第14期51-52,共2页

我国是一个养猪大国，猪品种资源十分丰富。据调查，现有地方猪种60个，培育品种20个，还有引人我国并已适应我国气候和生产环境的杜洛克、长白、大约克等主要外来品种。从20世纪80年代开始，根据国内外市场对瘦肉型猪日益增长的需要，... 我国是一个养猪大国，猪品种资源十分丰富。据调查，现有地方猪种60个，培育品种20个，还有引人我国并已适应我国气候和生产环境的杜洛克、长白、大约克等主要外来品种。从20世纪80年代开始，根据国内外市场对瘦肉型猪日益增长的需要，以提高瘦肉率为主攻目标，用国外引进的瘦肉型猪品种为父本，用新培育猪种或地方良种猪为母本，以杂交为主要途径，开展了培育瘦肉型猪的研究，取得了重大科技成果，并积极推广应用于养猪生产。 展开更多

关键词 大约克猪 杜洛克 对比试验 长白 培育品种 瘦肉型猪 地方猪种 养猪生产

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苗岭纳豆素胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：2

13

作者 向红霞 王鹏娇 +4 位作者 刘燕 张硕 孟小夏 王佳 高秀丽 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1025-1030,共6页

目的探讨苗岭纳豆素胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 48只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注模型组,阳性药物普萘洛尔组,苗岭纳豆素胶囊高、中、低剂量组;假手术组及模型组每天按1 m L/100 g灌胃生理盐水,普萘... 目的探讨苗岭纳豆素胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 48只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注模型组,阳性药物普萘洛尔组,苗岭纳豆素胶囊高、中、低剂量组;假手术组及模型组每天按1 m L/100 g灌胃生理盐水,普萘洛尔阳性组,高、中、低剂量组,药物用生理盐水配置,灌胃给药,每天2次。用8%水合氯醛麻醉,按结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支方法造模,缺血30 min,再灌注180 min,实时监测心电图ST段及T波的变化。假手术组只穿线不结扎冠状动脉前降支。再灌注末股动脉采血,检测血清中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(c Tn I)、超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等相关指标变化,同时利用TTC染色法对各组心肌梗死面积进行测定。结果与假手术组比较,模型组ST段明显抬高或T波高耸,血清中AST、LDH、CK-MB活性及c Tn I、MDA、TNF-α的量均明显升高,SOD活性显著降低,梗死面积显著增大(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,普萘洛尔组和苗岭纳豆素胶囊各剂量组抑制ST段抬升或T波增大,降低AST、LDH、CK-MB释放,同时显著抑制血清中c Tn I、MDA、TNF-α上升,提高SOD活力(P<0.01或P<0.05),并且心肌梗死面积明显减小(P<0.001)。结论苗岭纳豆素胶囊对心肌缺血再灌注损伤的心肌具有保护作用。 展开更多

关键词 苗岭纳豆素胶囊 溶栓激酶DCK 心肌缺血再灌注 梗死面积

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自发矮小症突变大鼠家系的建立及其主要生物学特性测定 被引量：2

14

作者 包峰云 龙红 +3 位作者 秦廷洋 霍春茂 唐克桐 张仕斌 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期792-799,共8页

目的 建立自发常染色体显性突变矮小症SD大鼠模型家系,测定其主要生物学特性数据。方法 将封闭群SD大鼠生产群中出现的矮小症突变个体扩群繁殖建立家系,统计后代中矮小症与正常个体的性状分离比例,鉴定其遗传模式;测定家系个体的体重、... 目的 建立自发常染色体显性突变矮小症SD大鼠模型家系,测定其主要生物学特性数据。方法 将封闭群SD大鼠生产群中出现的矮小症突变个体扩群繁殖建立家系,统计后代中矮小症与正常个体的性状分离比例,鉴定其遗传模式;测定家系个体的体重、体尺,主要脏器重量及指数,血液生理(18项)生化(20项)等指标以及繁殖性能等数据,明确突变个体的表型特征及生物学特性。结果 建立了自发常染色体显性突变的矮小症SD大鼠封闭群家系,家系暂时命名为SSR;成年(12周龄)SSR体重分别为野生型的57%(♂)和65%(♀),差异极具显著(P<0.01);成年SSR体长、尾长、胫骨长、股骨长等体尺数据以及主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、睾丸/卵巢)重量均显著低于野生型大鼠(P<0.01);成年SSR胫骨长、股骨长指数及主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、睾丸/卵巢)指数与野生型之间无显著性差异(P> 0.05);成年雌性SSR生殖器官发育正常,但不排卵。结论 建立了能稳定遗传的自发常染色体显性突变的矮小症SD大鼠家系,可作为人类生长发育及生殖功能研究的动物模型。 展开更多

关键词 矮小症 SD大鼠 动物模型 表型鉴定

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刺梨中鞣花酸的分离鉴定及提取工艺的优化 被引量：1

15

作者 刘玉杰 季嘉城 +6 位作者 张硕 唐丽 陈浪 张敏 王鹏娇 李韬 高秀丽 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第8期212-220,共9页

目的:本研究旨在建立刺梨中鞣花酸的分离纯化方法,并对提取鞣花酸的酸水解法进行工艺优化。方法:以刺梨干果为原料,通过超声辅助提取法提取单宁酸,加酸进行水解制得粗鞣花酸,并通过甲醇重结晶进行纯化,采用高效液相色谱测定其纯度,及核... 目的:本研究旨在建立刺梨中鞣花酸的分离纯化方法,并对提取鞣花酸的酸水解法进行工艺优化。方法:以刺梨干果为原料,通过超声辅助提取法提取单宁酸,加酸进行水解制得粗鞣花酸,并通过甲醇重结晶进行纯化,采用高效液相色谱测定其纯度,及核磁共振波谱法(NMR)、红外光谱法(IR)、质谱法(MS)、高效液相色谱法(HPLC)、紫外光谱法(UV)对提取得到的鞣花酸进行结构确证,另外,以得率为指标,以酸浓度、提取温度、提取时间、液料比为自变量,在单因素实验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法确定刺梨鞣花酸的酸水解工艺条件。结果:从刺梨中提取得到了鞣花酸提取物,通过HPLC分析测定其纯度达到92%,鞣花酸提取物的最大吸收波长254 nm,分子离子峰m/z 301.00,红外吸收各波数与标准品一致,并利用^(1)H-NMR,^(13)C-NMR确定了其结构。通过响应面法得到了酸水解法制取鞣花酸的最优工艺:酸浓度5%,提取温度127℃,液料比为8:1 mL/g,提取时间9.8 h,在此条件下刺梨鞣花酸的得率为30.2%±2.3%(与预测值相比P>0.05)。结论:本研究建立了一种刺梨中鞣花酸简便高效的纯化方法并对其进行了结构确证,并获得了酸水解法制取鞣花酸的最优工艺,为刺梨资源的开发利用提供了参考。 展开更多

关键词 刺梨 鞣花酸 提取 纯化 鉴定 工艺优化

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自发矮小症雌性SD大鼠不孕的机制初探 被引量：1

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作者 龙红 霍春茂 +4 位作者 李康 包峰云 秦廷洋 赵玉佳 张仕斌 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1415-1422,共8页

目的 探讨自发矮小症雌性SD大鼠(short stature rat,SSR)不孕的原因及其致病机理研究。方法 以成年野生型SD雌性大鼠和SSR雌性大鼠为研究对象,采用阴道涂片法观察动情周期变化;采用同期发情超数排卵方法比较促排卵效果;测定卵巢、子宫... 目的 探讨自发矮小症雌性SD大鼠(short stature rat,SSR)不孕的原因及其致病机理研究。方法 以成年野生型SD雌性大鼠和SSR雌性大鼠为研究对象,采用阴道涂片法观察动情周期变化;采用同期发情超数排卵方法比较促排卵效果;测定卵巢、子宫重量及体重、卵巢、子宫指数;测定血清中AMH、E2、FSH、LH、FSH/LH含量;对卵巢组织进行转录组学测序以分析基因表达差异。结果 SSR雌性大鼠动情周期无异常,SSR雌性大鼠体重显著低于野生型,其卵巢指数和子宫指数显著高于野生型。排卵结果显示,野生型SD大鼠平均排卵数量显著高于SSR雌性不孕大鼠(P<0.001);野生型SD大鼠血清AMH(P<0.01)、E2(P<0.05)水平显著高于SSR雌性不孕大鼠,血清FSH(P<0.01)、LH(P<0.01)及FSH/LH(P<0.05)水平显著低于SSR雌性不孕大鼠,PROG则不显著;转录组测序获得250个差异表达基因,其中有190个上调基因、60个下调基因。GO和KEGG分析结果显示,差异表达基因主要富集在IL-17信号通路(IL-17 signaling pathway)、p53信号通路(p53 signaling pathway)和细胞因子-细胞因子受体相互作用(cytokine-cytokine receptor interaction)等。利用CytoHubba插件的MCC、MNC、EPC和Degree计算法分别筛选前10的重要节点,取交集最后得到9个Hub基因,分别为Cxcl1、Cxcl2、IL1a、IL1b、Cd80、Mmp13、Mmp8、Fgf3、Ptgs2。结论 SSR雌性大鼠不孕可能与卵巢储备功能下降和卵巢低反应有关,同时筛选出Cxcl1、Cxcl2、IL1a、IL1b、Cd80、Mmp13、Mmp8、Fgf3和Ptgs2与不孕相关,为进一步探究不孕机制奠定理论基础。 展开更多

关键词 自发矮小症雌性SD大鼠 不孕 转录组测序 Hub基因

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