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松油烯-4-醇干预KLF4信号改善高糖诱导VSMCs氧化应激损伤的实验研究 被引量:11
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作者 何丽 黄梅 +7 位作者 杨彩琴 陈娜 付凌云 蒋朝晖 王惠林 沈祥春 徐旖旎 张彦燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期839-844,共6页
目的探讨松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)氧化应激损伤的保护作用及可能机制。方法采用高糖(HG,24.5 mmol·L-1)刺激VSMCs细胞,不同剂量T4O预处理后,应用噻唑蓝(MTT... 目的探讨松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)氧化应激损伤的保护作用及可能机制。方法采用高糖(HG,24.5 mmol·L-1)刺激VSMCs细胞,不同剂量T4O预处理后,应用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,荧光探针2′、7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测KLF4、Nrf2和HO-1的表达水平。进一步采用siRNA技术实现KLF4的敲低表达,检测细胞活力、ROS水平,及其对Nrf2、HO-1蛋白表达的影响。结果松油烯-4-醇能够抑制高糖诱导的VSMCs异常增殖,降低ROS水平,下调高糖诱导VSMCs中KLF4的表达,并上调抗氧化信号Nrf2、HO-1的表达。进一步研究表明,siKLF4转染组明显下调KLF4表达,抑制VSMCs增殖,降低细胞内ROS水平,并上调Nrf2、HO-1的表达水平。结论松油烯-4-醇对高糖诱导的VSMCs氧化应激损伤具有保护作用,其机制与其抑制核转录因子KLF4的表达,上调Nrf2/HO-1抗氧化信号轴有关。 展开更多
关键词 松油烯-4-醇 血管平滑肌细胞 氧化应激 活性氧 Nrf2/HO-1 KLF4
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贵州省清镇市药用植物资源调查分析 被引量:3
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作者 何晶晶 骆沁羽 +2 位作者 梁语嫣 刘绍欢 沈祥春 《贵州农业科学》 CAS 2023年第12期103-111,共9页
【目的】探明贵州省清镇市野生药用植物资源的种类、分布及利用现状,为该区域药用植物资源可持续利用、保护及优势物种开发应用提供依据。【方法】依据第四次全国中药资源普查技术规范要求,采用野外调查、标本采集鉴定和拍摄图片等方法... 【目的】探明贵州省清镇市野生药用植物资源的种类、分布及利用现状,为该区域药用植物资源可持续利用、保护及优势物种开发应用提供依据。【方法】依据第四次全国中药资源普查技术规范要求,采用野外调查、标本采集鉴定和拍摄图片等方法,对清镇市药用植物资源进行收集,并对其种类组成、科结构、生活型、药用功效和药用部位等多样性进行研究。【结果】清镇市共有药用植物146科481属673种,其中,蕨类植物19科32属43种,包括槲蕨、有柄石韦和北京铁角蕨等;裸子植物7科12属13种,包括马尾松、金钱松和侧柏等;被子植物120科437属617种,包括车前、白及和虎杖等。【结论】清镇市药用植物种类较丰富,药用植物生活型、药用功效和药用部位类型多样,部分药用植物具有潜在的保护、开发和人工栽培利用价值。 展开更多
关键词 中药材 资源普查 药用植物 生活型 药用功效 药用部位 清镇市
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POLG抑制剂阻碍线粒体生物合成抑制三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭 被引量:3
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作者 刘行 樊双琴 +6 位作者 晏小敏 赵仕杰 王荣 沈祥春 周雪 张玥 陈妍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第10期1720-1728,共9页
目的探究线粒体DNA聚合酶γ(POLG)抑制剂扎西他滨(ddC)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的作用,并初步探讨其对线粒体生物合成的影响。方法MTT法测定ddC对细胞活力的影响;细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能... 目的探究线粒体DNA聚合酶γ(POLG)抑制剂扎西他滨(ddC)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的作用,并初步探讨其对线粒体生物合成的影响。方法MTT法测定ddC对细胞活力的影响;细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力;应用流式细胞术和V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞的凋亡水平;Western blot检测POLG、NADH脱氢酶亚基Ⅰ(NADH1)、NADH脱氢酶亚基Ⅱ(NADH2)、ATP合成酶亚基6(ATPase6)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COX-1)和细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ(COX-3)的蛋白表达水平;qPCR实验检测POLG的mRNA水平和mtDNA拷贝数;应用MitoTracker Green荧光探针和ATP定量试剂盒测定细胞的线粒体含量和ATP水平;将POLG的过表达载体转染到MDA-MB-231细胞中,用Western blot、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验验证POLG抑制剂对细胞的迁移和侵袭能力的影响。结果POLG在MDA-MB-231细胞中的表达高于人正常乳腺上皮MCF-10A细胞(P<0.01)。ddC剂量依赖性地抑制细胞活力,降低了MDA-MB-231细胞的迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.01),且在实验剂量下对正常乳腺上皮MCF-10A细胞无明显毒性。ddC可下调MDA-MB-231细胞内POLG蛋白(P<0.01)和mRNA水平(P<0.01),并降低mtDNA拷贝数(P<0.01)以及mtDNA编码的NADH1、NADH2、ATPase6、COX-1和COX-3蛋白表达(P<0.01)。ddC可抑制MDA-MB-231细胞的线粒体含量(P<0.01)和ATP水平(P<0.01)。在MDA-MB-231细胞内过表达POLG增强了细胞的迁移(P<0.05)和侵袭能力(P<0.05),而ddC对POLG过表达的MDA-MB-231细胞的迁移、侵袭能力未表现出明显抑制。结论ddC可下调MDA-MB-231中POLG的表达,阻碍线粒体生物合成和降低ATP水平,进而抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 迁移 侵袭 POLG抑制剂 线粒体生物合成 ATP合成
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太子参化学成分研究 被引量:26
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作者 张春丽 徐国波 +2 位作者 刘俊 廖尚高 何迅 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1132-1135,1164,共5页
为了解太子参的化学成分、明确其药效物质基础,采用大孔树脂、正相和反相硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等柱层析方法分离纯化得到10个化合物,根据理化性质和波谱数据分别鉴定为3-呋喃甲醇α-D-吡喃半乳糖苷(3-furanmethanolα-D-galac... 为了解太子参的化学成分、明确其药效物质基础,采用大孔树脂、正相和反相硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等柱层析方法分离纯化得到10个化合物,根据理化性质和波谱数据分别鉴定为3-呋喃甲醇α-D-吡喃半乳糖苷(3-furanmethanolα-D-galactopyranoside,1)、云杉新甙(piceid,2)、二氢阿魏酸甲酯(3)、苯甲酸(4)、咖啡因(5)、胸苷(6)、水杨酸(7)、二氢阿魏酸(8)、腺苷(9)和太子参环肽B(10)。其中1为新化合物,2~7为首次从该植物中分离得到。 展开更多
关键词 太子参 化学成分 3-呋喃甲醇α-D-吡喃半乳糖苷
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川芎、冰片配伍对脑缺血大鼠海马和下丘脑神经元的保护作用 被引量:6
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作者 喻斌 阮鸣 +3 位作者 许立 刘圣金 许惠琴 沈祥春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1302-1308,共7页
目的研究川芎、冰片配伍对全脑缺血大鼠海马和下丘脑神经元的保护机制。方法将全脑缺血大鼠分为假手术组、模型组、川芎组(1.0 g·kg^-1)、冰片组(0.16 g·kg^-1)、川芎+冰片组。利用GC-MS方法检测海马/下丘脑的透析液中谷氨酸(... 目的研究川芎、冰片配伍对全脑缺血大鼠海马和下丘脑神经元的保护机制。方法将全脑缺血大鼠分为假手术组、模型组、川芎组(1.0 g·kg^-1)、冰片组(0.16 g·kg^-1)、川芎+冰片组。利用GC-MS方法检测海马/下丘脑的透析液中谷氨酸(glutamate,Glu)、甘氨酸(glycine,Gly)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)含量;激光共聚焦技术检测脑片中钙离子含量;TUNEL和电镜技术检测这两个脑区凋亡百分率和超微结构。结果川芎和冰片单用均可减少钙超载,缓解超微结构的改变,联合应用效果更佳。另外,川芎单用可减少两脑区的神经元凋亡指数、升高GABA。冰片仅降低两脑区的Glu,而它们的配伍还可进一步升高下丘脑Gly含量,也表现较好的协同关系。结论川芎和冰片配伍在缓解神经元兴奋毒、钙超载和超微结构异常方面具有较好的协同效应,但抗凋亡方面未见明显协同。 展开更多
关键词 川芎 冰片 配伍 全脑缺血/再灌注 兴奋毒 钙超载
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干扰核黄素代谢对细胞卵巢癌HO8910细胞顺铂敏感性的影响(英文) 被引量:1
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作者 杨如会 宋羽 +1 位作者 吴松泉 沈祥春 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期823-832,共10页
目的研究干预核黄素(RIB)代谢途径对卵巢癌HO8910细胞顺铂(DDP)敏感性的影响。方法采用慢病毒包装sh RNA载体干扰RIB转运体2(RFT2)和RIB竞争性抑制剂氯丙嗪(CHL)干预RIB代谢途径。HO8910卵巢癌细胞分为正常细胞对照组、sh RNA对照组、RF... 目的研究干预核黄素(RIB)代谢途径对卵巢癌HO8910细胞顺铂(DDP)敏感性的影响。方法采用慢病毒包装sh RNA载体干扰RIB转运体2(RFT2)和RIB竞争性抑制剂氯丙嗪(CHL)干预RIB代谢途径。HO8910卵巢癌细胞分为正常细胞对照组、sh RNA对照组、RFT2 sh RNA组、CHL 50μmol·L^(-1)组、DDP 20μmol·L^(-1)组、RFT2 shR NA+DDP组、CHL+DDP组和DDP+RIB 20μmol·L^(-1)组。各组细胞处理48 h后CCK-8方法检测细胞存活;结晶紫染色方法检测克隆形成能力;流式细胞仪检测凋亡、线粒体膜电位、活性氧(ROS)含量和CD44^+CD133^+细胞比例。结果与单独DDP处理组对比,RFT2 sh RNA或CHL联合DDP能明显降低HO8910细胞活性(P<0.01),减少细胞集落形成能力(P<0.01),降低细胞线粒体膜电位(P<0.01),增加细胞ROS含量和细胞凋亡比例(P<0.01),同时减少CD44^+CD133^+细胞比例(P<0.01),RIB可减弱DDP对HO8910细胞的作用(P<0.01)。结论干扰RIB代谢途径能增强DDP对卵巢癌HO8910细胞的杀伤作用,该作用与增强DDP氧化损伤和降低干细胞样肿瘤细胞比例有关;RIB可减弱DDP对HO8910细胞的作用。 展开更多
关键词 核黄素 氯丙嗪 核黄素转运体2 顺铂 卵巢癌
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艳山姜叶部一个新病害的鉴定及其化学防治 被引量:1
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作者 张旭 李启瑞 +3 位作者 肖涛 沈祥春 何明辉 龙庆德 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第1期41-46,共6页
【目的】在贵州民族药艳山姜的栽培过程中,发现一种艳山姜叶部未知病害,该病害严重地影响艳山姜药材的产量和品质,给药农造成了巨大的经济损失。因此,开展该病害病原菌的鉴定、化学药剂对该病原菌抑菌作用的初步研究,对制定病害防治对... 【目的】在贵州民族药艳山姜的栽培过程中,发现一种艳山姜叶部未知病害,该病害严重地影响艳山姜药材的产量和品质,给药农造成了巨大的经济损失。因此,开展该病害病原菌的鉴定、化学药剂对该病原菌抑菌作用的初步研究,对制定病害防治对策有重要意义。【方法】利用柯赫氏法则对病原菌进行了分离和回接;使用形态学及分子系统学方法对病原菌进行了分类鉴定;采用含药平板法研究了7种化学杀菌剂对该病原菌进行室内药效试验。【结果】分离鉴定该病害的病原菌为新拟盘多毛孢属真菌,并筛选了可行的化学防治药剂:75%百菌清,80%代森锰锌和57.6%冠菌清对病原菌的抑制效果不明显,25%咪鲜胺和70%甲基托布津的抑菌效果相对较好,EC_(50)分别为0.150 3μg/mL和0.872 3μg/mL。【结论】该病害为艳山姜上的首次报道,笔者将其命名为艳山姜褐斑病,致病菌为新拟盘多毛孢属真菌;25%咪鲜胺对该病原菌室内防治效果较好,可作为艳山姜褐斑病的防治备选化学药剂。 展开更多
关键词 艳山姜 叶部新病害 化学防治 新拟盘多毛孢
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不同处理方法对透骨香种子萌发的影响
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作者 刘绍欢 何晶晶 +3 位作者 詹云慧 樊天珺 黄哲 王世清 《安徽农业科学》 CAS 2018年第33期25-27,30,共4页
[目的]采用不同浓度试剂对透骨香种子进行浸种处理,筛选出透骨香种子在此条件下发芽的最佳条件。[方法]采用不同浓度的C2H5OH、Na OH、KMn O4、GA3、Na Cl对透骨香种子分别浸种30、60、90、120 min,采用培养皿发芽试验,以发芽势、发芽... [目的]采用不同浓度试剂对透骨香种子进行浸种处理,筛选出透骨香种子在此条件下发芽的最佳条件。[方法]采用不同浓度的C2H5OH、Na OH、KMn O4、GA3、Na Cl对透骨香种子分别浸种30、60、90、120 min,采用培养皿发芽试验,以发芽势、发芽率以及发芽指数3个指标对不同处理进行评价。[结果]不同处理方法处理后的透骨香种子的发芽率均在80%以上,且发芽势、发芽指数相比对照组明显提高。其中用10 mg/m L Na OH浸种60 min的种子发芽势、发芽率均最高,分别为85%、96%,发芽指数为184.90,与对照组相比分别提高55.5、31百分点和105.63;而GA3对透骨香种子初期有一定的抑制作用,发芽势均比对照组小。[结论]透骨香种子育苗最佳处理方式为10 mg/m L Na OH浸种60 min。 展开更多
关键词 透骨香 发芽率 发芽势 发芽指数
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天麻素通过调控NF-кB/NLRP3信号通路对BV2细胞炎症损伤的保护作用 被引量:8
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作者 吴小盈 周雪 +4 位作者 胡晓霞 杨南赟 陶玲 沈祥春 常楚瑞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期918-923,共6页
目的探讨天麻素对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的调控作用以及相关机制。方法实验分为正常组,模型组(LPS,1μg/mL),天麻素低、高剂量组(10、100μmol/L),米诺环素组(1μmol/L)。MTT法检测细胞存活率,ELISA法检测细胞上清液... 目的探讨天麻素对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的调控作用以及相关机制。方法实验分为正常组,模型组(LPS,1μg/mL),天麻素低、高剂量组(10、100μmol/L),米诺环素组(1μmol/L)。MTT法检测细胞存活率,ELISA法检测细胞上清液中分泌物IL-1β、TNF-α水平,RT-qPCR法检测细胞IL-1β、TNF-αmRNA表达,Griess法检测细胞上清液NO水平,Western blot法检测细胞iNOS、TLR4、I-κBα、p-IκBα、胞核及胞浆NF-κB p65、NLRP3、cleaved caspase-1、cleaved IL-1β蛋白表达。免疫沉淀法检测NLRP3与ASC之间的相互作用以及NLRP3的泛素化水平;Western blot法检测ASC寡聚化水平。结果天麻素能够抑制LPS诱导的BV2细胞炎症相关因子NO、IL-1β、TNF-α的分泌,降低TNF-α、IL-1βmRNA表达,抑制NF-κB p65的入核,下调LPS诱导的BV2炎症相关蛋白iNOS、TLR4、p-IкBα、NLRP3、cleaved caspase-1、cleaved IL-1β的表达。同时天麻素可以促进NLRP3泛素化,抑制ASC的寡聚化,从而抑制NLRP3与ASC的结合,阻碍NLRP3炎症小体的组装。结论天麻素能抑制BV2小胶质细胞炎症损伤,其机制可能与抑制NF-κB活化及NLRP3炎症小体激活有关。 展开更多
关键词 天麻素 BV2小胶质细胞 炎症 脂多糖 NF-кB NLRP3
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红景天苷调控KLF4/eNOS信号抑制Hcy诱导内皮-间质转分化的作用 被引量:6
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作者 何丽 涂梦欣 +4 位作者 黄梅 彭剑青 姜丰 沈祥春 张彦燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期681-686,共6页
目的基于KLF4/eNOS信号,研究红景天苷(salidroside,SAL)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导内皮细胞间质转分化(EndMT)的作用及机制。方法(1)研究SAL对Hcy诱导EndMT的作用。不同剂量SAL预处理后,给予Hcy(1 mmol·L^(-1))共孵育48 h诱导EndMT... 目的基于KLF4/eNOS信号,研究红景天苷(salidroside,SAL)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导内皮细胞间质转分化(EndMT)的作用及机制。方法(1)研究SAL对Hcy诱导EndMT的作用。不同剂量SAL预处理后,给予Hcy(1 mmol·L^(-1))共孵育48 h诱导EndMT。采用Western blot检测VE-cadherin、α-SMA、KLF4及eNOS的蛋白水平,划痕修复实验检测细胞迁移能力,硝酸还原酶法检测细胞内NO水平,细胞免疫荧光技术检测KLF4表达及定位。(2)基于KLF4/eNOS信号,研究SAL抑制EndMT的信号机制。采用siRNA技术实现细胞内KLF4的沉默,Western blot检测VE-cadherin与α-SMA,KLF4及eNOS的蛋白水平。结果(1)SAL上调Hcy诱导的VE-cadherin及下调α-SMA的表达,降低细胞迁移能力,上调eNOS/NO信号轴水平,并抑制KLF4的表达及向胞核转位。(2)沉默KLF4可下调α-SMA及KLF4的表达,上调VE-cadherin和eNOS的表达。与SAL+siKLF4组比较,SAL组及siKLF4组对表型标志物的作用无明显差异。结论SAL抑制Hcy诱导的EndMT,其作用与调节KLF4/eNOS信号途径有关。 展开更多
关键词 红景天苷 人脐静脉内皮细胞 血管内皮功能 内皮-间质转分化 KLF4 ENOS
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艳山姜叶化学成分的研究 被引量:5
11
作者 游华林 周芹茹 +3 位作者 吴林菁 廖尚高 沈祥春 张嫩玲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期114-117,共4页
目的研究艳山姜Alpinia zerumbet(Pers.) Burtt.et Smith叶的化学成分。方法艳山姜叶95%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴... 目的研究艳山姜Alpinia zerumbet(Pers.) Burtt.et Smith叶的化学成分。方法艳山姜叶95%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为caryophyllene oxide(1)、α-tocopherol(2)、cassipourol(3)、2′,3′-dihydroxy propylpentadecanoate(4)、trans-cinnamic acid(5)、indole-3-aldehyde(6)、5,7-methoxyflavanone(7)、alpinetin(8)、dihydroflavokawin B(9)、2′-hydroxy-4′,6′-dimethoxychalcone(10)。结论化合物1~7为首次从该植物中分离得到。 展开更多
关键词 艳山姜 化学成分 分离鉴定
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松油烯-4-醇调节SIRT1/Nrf2信号抑制慢性肾病血管氧化应激损伤 被引量:2
12
作者 涂梦欣 尚雪祎 +6 位作者 张彦琦 陈虹雨 李金锦 何丽 文波 沈祥春 张彦燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1724-1730,共7页
目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD... 目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD小鼠模型用于信号机制研究。给药组以T4O低、高剂量(10 mg/kg和20 mg/kg)连续灌胃给药6周。收集小鼠血清检测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,采用HE染色观察小鼠胸主动脉和肾脏组织形态,试剂盒检测血管组织丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫荧光检测血管组织ROS水平;Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO-1及SIRT1的表达。结果T4O可降低CKD小鼠血清BUN和CRE水平,改善肾脏病理损伤和主动脉血管形态结构,降低血管组织MDA含量,增加SOD含量,降低ROS水平;T4O干预能够促进Nrf2核易位及上调HO-1、NQO-1以及SIRT1的蛋白表达。分子机制研究表明,LV-SIRT1 RNAi+T4O+CKD组能够抑制T4O对CKD诱导的MDA和SOD含量的影响,部分抵消T4O上调Nrf2核易位以及SIRT1、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平的作用。结论T4O对CKD小鼠胸主动脉氧化应激损伤具有保护作用,其分子信号机制可能与调节SIRT1/Nrf2级联信号有关。 展开更多
关键词 松油烯-4-醇 慢性肾脏疾病 氧化应激 沉默调节蛋白1 核转录因子E2相关因子2 Nrf2/HO-1/NQO-1
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HIF-1α调控4-羟基他莫昔芬对乳腺癌MCF-7细胞敏感性的研究 被引量:2
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作者 陈宗跃 张璟钰 +4 位作者 张敏琴 樊双琴 沈祥春 陈妍 张玥 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第6期938-943,共6页
目的该研究通过建立人乳腺癌4-羟基他莫昔芬(4-OHT)耐药细胞系(MCF-7/TR),探究低氧诱导因子1α(HIF-1α)对乳腺癌MCF-7细胞4-OHT耐药的影响。方法采用他莫昔芬的体内活性形式4-OHT建立乳腺癌耐药细胞MCF-7/TR。MTT实验检测4-OHT对乳腺... 目的该研究通过建立人乳腺癌4-羟基他莫昔芬(4-OHT)耐药细胞系(MCF-7/TR),探究低氧诱导因子1α(HIF-1α)对乳腺癌MCF-7细胞4-OHT耐药的影响。方法采用他莫昔芬的体内活性形式4-OHT建立乳腺癌耐药细胞MCF-7/TR。MTT实验检测4-OHT对乳腺癌细胞MCF-7、MCF-7/TR细胞活力的影响,并测定耐药指数(RI);Western blot检测MCF-7、MCF-7/TR细胞中HIF-1α蛋白的表达水平;采用MTT法和流式细胞术AV/PI双染法检测,HIF-1α抑制剂(LW6)或siRNA HIF-1α干预作用后4-OHT对MCF-7/TR细胞的影响以及HIF-1α稳定剂(FG-4592)处理后4-OHT对MCF-7细胞的影响。结果结果显示,MCF-7/TR耐药细胞株成功构建,其RI为(5.56±0.80);与MCF-7细胞相比,MCF-7/TR细胞中HIF-1α高表达,且4-OHT作用后MCF-7/TR细胞中HIF-1α的表达水平上调;给予LW6或沉默HIF-1α的表达后,HIF-1α的表达下调增强了4-OHT对MCF-7/TR细胞的抑制作用;给予FG-4592后,HIF-1α的表达上调可降低4-OHT对MCF-7细胞的抑制作用。结论HIF-1α在乳腺癌MCF-7细胞4-OHT耐药中发挥重要作用,靶向HIF-1α可能是增加乳腺癌细胞对他莫昔芬敏感性的有效途径。 展开更多
关键词 乳腺癌 耐药 4-羟基他莫昔芬 低氧诱导因子1Α
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松油烯-4-醇改善自噬流障碍对高糖诱导的VSMCs炎性损伤的保护作用 被引量:1
14
作者 黄梅 涂梦欣 +5 位作者 张彦琦 陈虹雨 吴林菁 沈祥春 徐旖旎 张彦燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期532-536,共5页
目的基于改善自噬流障碍,研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎性损伤的作用及涉及的分子信号。方法采用划痕实验分析VSMCs迁移能力,ELISA法检测细胞培养上清液IL-1β... 目的基于改善自噬流障碍,研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎性损伤的作用及涉及的分子信号。方法采用划痕实验分析VSMCs迁移能力,ELISA法检测细胞培养上清液IL-1β、IL-6的水平;Western blot检测炎症相关分子NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18及自噬相关信号p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-Beclin1的蛋白表达。结果T4O可抑制高糖诱导的VSMCs迁移,减少促炎因子IL-1β、IL-6的分泌与释放,抑制p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-1β、IL-18的蛋白表达,同时下调p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及p-Beclin1的表达水平。采用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)干预VSMCs自噬通量后,T4O预处理可明显抑制CQ介导的上述炎症因子及自噬相关信号的蛋白表达水平。结论T4O通过改善自噬流障碍,抑制高糖诱导的VSMCs炎性损伤。 展开更多
关键词 松油烯-4-醇 血管平滑肌细胞 炎性损伤 自噬 NF-κB 高糖
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毛壳属真菌的次生代谢产物及其生物活性研究进展 被引量:14
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作者 徐国波 张青艳 周孟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期515-525,共11页
毛壳属真菌是一类资源极为丰富的真菌,种名超过400多种。研究发现其次生代谢产物结构新颖,生物活性突出,是新药或其先导化合物的重要来源。迄今为止,从毛壳属代谢物中分离鉴定的化合物已超过300个,包含细胞松弛素、azaphilone类、二酮... 毛壳属真菌是一类资源极为丰富的真菌,种名超过400多种。研究发现其次生代谢产物结构新颖,生物活性突出,是新药或其先导化合物的重要来源。迄今为止,从毛壳属代谢物中分离鉴定的化合物已超过300个,包含细胞松弛素、azaphilone类、二酮哌嗪类、色原酮、蒽醌等结构类型,大多具有细胞毒、抗炎、抗微生物等生物活性。本文从化合物结构及其生物活性等方面综述2011-2016年间毛壳属真菌天然产物的研究概况。 展开更多
关键词 毛壳属真菌 次生代谢产物 化学成分 生物活性
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透骨香果实内源抑制物质研究 被引量:1
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作者 刘绍欢 万政敏 +1 位作者 何晶晶 沈祥春 《安徽农业科学》 CAS 2022年第20期155-157,186,共4页
[目的]研究透骨香果实(果皮和种子)中所含的内源抑制物质活性及其所存在部位。[方法]以白菜种子为试验对象,在不同温度、溶剂、浓度、浸提次数及时间的条件下对透骨香种子和果皮的浸提液进行生物活性测定。[结果]透骨香果实存在内源抑... [目的]研究透骨香果实(果皮和种子)中所含的内源抑制物质活性及其所存在部位。[方法]以白菜种子为试验对象,在不同温度、溶剂、浓度、浸提次数及时间的条件下对透骨香种子和果皮的浸提液进行生物活性测定。[结果]透骨香果实存在内源抑制物质,所得浸提液对试验种子的萌发和生长的抑制强弱为果皮浸提液>种子浸提液,水浸提液>甲醇浸提液;浸提液浓度越高,抑制越强;随着浸提次数增多,抑制作用逐渐减弱;浸提温度、提取时间对其有一定抑制作用。[结论]透骨香果实所含的内源抑制物质可能是种子萌发周期长、发芽率低的重要原因。 展开更多
关键词 透骨香 果皮 种子 内源抑制物质
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G蛋白偶联雌激素受体抑制剂增加他莫昔芬诱导T-47DTR耐药细胞凋亡
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作者 张敏琴 宋雨萱 +7 位作者 樊双琴 任爽 张玥 陈妍 沈祥春 刘同征 张敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期96-100,共5页
目的研究G蛋白偶联雌激素受体(G-protein coupled estrogen receptor,GPER)抑制剂G15对乳腺癌他莫昔芬耐药细胞T-47DTR敏感性的影响。方法采用他莫昔芬在体内活性形式4-羟基他莫昔芬(4-OHT)进行实验。MTT实验检测乳腺癌他莫昔芬耐药细胞... 目的研究G蛋白偶联雌激素受体(G-protein coupled estrogen receptor,GPER)抑制剂G15对乳腺癌他莫昔芬耐药细胞T-47DTR敏感性的影响。方法采用他莫昔芬在体内活性形式4-羟基他莫昔芬(4-OHT)进行实验。MTT实验检测乳腺癌他莫昔芬耐药细胞系T-47DTR及其亲本细胞系T-47D对他莫昔芬的敏感性;膜浆分离分析抑制剂G15对GPER蛋白表达的变化;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染分析4-OHT联用G15对T-47DTR细胞凋亡的影响;Western blot分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved-caspase-3、caspase-9、cleaved-caspase-9的表达水平。结果(1)相比于亲本细胞T-47D,T-47DTR耐药细胞对4-OHT的抵抗性显著增强。(2)给予4-OHT(2μmol·L^(-1)),与对照组相比,GPER在细胞膜分布增加,表明在T-47DTR耐药细胞中GPER被激活;与单用4-OHT相比,联用G15(5μmol·L^(-1))显著减少GPER表达。(3)GPER抑制剂G15能增加T-47DTR耐药细胞凋亡率同时下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达。结论GPER抑制剂G15增加T-47DTR细胞的凋亡恢复耐药细胞对他莫昔芬的敏感性。 展开更多
关键词 乳腺癌 他莫昔芬 耐药 GPER G15 凋亡
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不同海拔蜘蛛香挥发油GC-MS分析 被引量:5
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作者 龙庆德 杨南赟 +4 位作者 龙春升 曾凡利 李启瑞 张旭 沈祥春 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第10期182-185,I0030,共5页
目的 对不同海拔的蜘蛛香挥发油进行GC-MS分析,探究海拔高度对蜘蛛香挥发性成分的影响。方法 采集11批不同海拔蜘蛛香阴干并提取挥发油,采用GC-MS法分析不同海拔蜘蛛香挥发性成分。结果 各海拔挥发油提取率在0.13%~0.45%,相似度结果在0.... 目的 对不同海拔的蜘蛛香挥发油进行GC-MS分析,探究海拔高度对蜘蛛香挥发性成分的影响。方法 采集11批不同海拔蜘蛛香阴干并提取挥发油,采用GC-MS法分析不同海拔蜘蛛香挥发性成分。结果 各海拔挥发油提取率在0.13%~0.45%,相似度结果在0.853~0.995,11批样品有24种共有化合物,24个共有峰的变异系数值在13.29%~112.75%,不同海拔蜘蛛香所含挥发性成分含量随着海拔的变化而变化。结论 在海拔2300~2500 m,蜘蛛香挥发油提取率高,化合物含量较高,该条件下的光照强度、土壤条件及生长环境更适宜蜘蛛香生长。 展开更多
关键词 蜘蛛香 挥发油 不同海拔
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22-nt端粒RNA片段所形成反向平行G-四链体的构型影响要素分析
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作者 钟明清 沈祥春 肖潮达 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1291-1299,共9页
不同构象的G-四链体通常展现出与蛋白质结合能力不同,进而发挥出不同的生理功能,分析G-四链体的构型影响要素,对探究其生理功能有重要意义。不同于DNA,RNA序列在以往的研究中均呈现平行G-四链体结构,前期研究中我们发现并报道了目前唯... 不同构象的G-四链体通常展现出与蛋白质结合能力不同,进而发挥出不同的生理功能,分析G-四链体的构型影响要素,对探究其生理功能有重要意义。不同于DNA,RNA序列在以往的研究中均呈现平行G-四链体结构,前期研究中我们发现并报道了目前唯一能形成反向平行G-四链体的RNA序列,22-nt端粒RNA片段(ORN-N,A_(1)G_(2)G_(3)G_(4)U_(5)U_(6)A_(7)G_(8)G_(9)G_(10)U_(11)U_(12)A_(13)G_(14)G_(15)G_(16)U_(17)U_(18)A_(19)G_(20)G_(21)G_(22))。分析ORN-N的构型影响因素将极大拓展对RNA特性的认识。因此,本研究旨在系统性的探索能够影响ORN-N构型的因素。使用圆二色谱和熔融曲线监测糖环2′-羟基对ORN-N构型和稳定性的影响,发现ORN-N中不同核苷糖环2′-羟基对于反向平行G-四链体的作用不同。U_(6)、A_(7)、G_(16)的糖环2′-羟基对ORN-N的拓扑构象-维持至关重要,G_(3)、A_(13)、A_(19)的糖环2′-羟基具有稳定其构象的作用,而U_(17)的糖环2′-羟基降低了ORN-N的稳定性,此与以往研究中糖环2′-羟基不利于RNA序列形成反向平行G-四链体构型不同。将ORN-N环中的核苷U进行5-甲基化修饰,通过圆二色谱和熔融曲线监测其构象和稳定性,发现环中部分U碱基5-甲基化能稳定ORN-N的构象。使用5%~40%PEG模拟细胞内分子拥挤环境,通过圆二色谱监测其构象,结果与以往研究不同,分子拥挤环境并不能稳定反向平行RNA G-四链体,相反ORN-N的构象发生了翻转。综上,在ORN-N中糖环2′-羟基、环序列甲基化以及分子拥挤环境对反向平行RNA G-四链体的构型具有极其重要的影响。 展开更多
关键词 反向平行RNA G-四链体 圆二色谱 糖环2′-羟基 环序列甲基化 分子拥挤环境
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