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多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价
被引量：
2
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作者
李慧
王毅
+3 位作者
王艳
李华
陈峥宏
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期99-104,共6页
目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼...
目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。
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关键词
单增李斯特菌
多交叉置换扩增
lmo
0733基因
最低检测限
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职称材料
题名
多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价
被引量：
2
1
作者
李慧
王毅
王艳
李华
陈峥宏
叶长芸
机构
贵州医科大学基础医学院病原生物学微生物教研室
传染病预防控制国家重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期99-104,共6页
基金
国家重大传染病防治科技重大专项(No.2013ZX10004-101)、传染病预防控制国家重点实验室(No.2015SKLID507)和中国疾病预防控制中心传染病预防控制所(No.2016ZZKTB09)联合资助
文摘
目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。
关键词
单增李斯特菌
多交叉置换扩增
lmo
0733基因
最低检测限
Keywords
Listeria monocytogenes
multiple cross displacement amplification
lmo 0733 gene
limit of detection
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价
李慧
王毅
王艳
李华
陈峥宏
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
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