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miR-92a靶向PTEN/PI3K/Akt通路抑制非小细胞肺癌细胞的自噬 被引量:9
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作者 胡爱妮 王豫萍 +3 位作者 路毅斌 杨梅 崔丽丽 王剑 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期1301-1307,共7页
目的探讨miR-92a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞自噬的影响及其可能的作用机制。方法收集2016年1月至2018年12月贵州中医药大学第二附属医院收治的53例NSCLC患者的癌组织和癌旁肺组织标本,RT-PCR和免疫组化检... 目的探讨miR-92a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞自噬的影响及其可能的作用机制。方法收集2016年1月至2018年12月贵州中医药大学第二附属医院收治的53例NSCLC患者的癌组织和癌旁肺组织标本,RT-PCR和免疫组化检测癌组织及癌旁组织内miR-92a、PTEN、p-PI3K、p-Akt和LC3-Ⅱ表达。将miR-92a-mimics(类似物)、miR-92a-NC(抑制剂对照)和miR-92a-inhibitor(抑制物)分别转染至A549细胞,48 h后吖啶橙染色检测细胞自噬,双荧光素酶报告实验验证miR-92a与PTEN的靶向关系,Western blot检测各转染组细胞内PTEN、p-PI3K、p-Akt和LC3-Ⅱ的蛋白表达。结果与癌旁肺组织比较,肺癌组织中miR-92a mRNA的表达显著升高(P<0.001),p-PI3K、p-Akt阳性细胞率也显著升高(P<0.001),PTEN、LC3-Ⅱ阳性细胞率显著降低(P<0.001)。miR-92a、PTEN和LC3-Ⅱ在不同性别、年龄中的表达差异无统计学意义(P>0.05),在存在淋巴结转移、TNMⅢ~Ⅳ期及分化程度较低的病灶中,miR-92a高表达者显著多于无淋巴结转移、TNMⅠ~Ⅱ期及分化程度较高的病灶(P<0.01);在存在淋巴结转移、TNMⅢ~Ⅳ期及分化程度较低的病灶中,PTEN和LC3-Ⅱ高表达者显著低于无淋巴结转移、TNMⅠ~Ⅱ期及分化程度较高的病灶(P<0.01)。miR-92a-mimics组细胞啶橙染色荧光最弱,miR-92a-inhibitor组最强。3组中miR-92a-mimics组p-Akt、p-PI3K蛋白表达最高(P<0.05),LC3-Ⅱ最弱(P<0.05),miR-92a-inhibitor组p-Akt、p-PI3K蛋白表达最弱(P<0.05),LC3-Ⅱ最强(P<0.05)。结论 miR-92a在非小细胞肺癌中通过靶向抑制PTEN表达,刺激PI3K/Akt信号通路活性,从而抑制细胞的自噬。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-92a PTEN PI3K/AKT信号通路 自噬
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耐受性树突状细胞通过降低Th1细胞和Th17细胞比例减轻CIA大鼠的关节炎症和病变 被引量:4
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作者 马贵兰 谭艳 +2 位作者 田娅玲 包伦敏 蒋红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期193-198,共6页
目的初步探讨核因子κB寡脱氧核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN decoy)诱导建立的耐受性树突状细胞(tolDC)对胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠1型辅助T(Th1)细胞、Th2细胞、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)的影响及干预效果。方法取SD雌性大鼠建立CI... 目的初步探讨核因子κB寡脱氧核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN decoy)诱导建立的耐受性树突状细胞(tolDC)对胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠1型辅助T(Th1)细胞、Th2细胞、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)的影响及干预效果。方法取SD雌性大鼠建立CIA大鼠模型,设CIA模型组、牛Ⅱ型胶原蛋白-诱骗剂-树突状细胞(Col2-decoy DC)处理组、空白对照组、Col2-decoy DC对照组。于初次免疫的第20天尾静脉注射tolDC进行处理,造模第7周处死大鼠。流式细胞术检测大鼠脾脏Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞、Treg比例,HE染色检测踝关节病变情况,并对关节炎指数(AI)进行评分。结果与CIA模型组相比,Col2-decoy DC组AI降低且踝关节病变减轻,脾脏CD4+T细胞中Th1细胞、Th17细胞百分率降低而Th2细胞、Treg百分率升高。结论tolDC通过降低CD4+T细胞中Th1细胞和Th17细胞比率减轻CIA大鼠炎症和关节病变。 展开更多
关键词 树突状细胞(DC) T细胞亚群 免疫耐受 胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)
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耐受性树突状细胞在胶原蛋白诱导性关节炎大鼠体内形成微嵌合体
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作者 包伦敏 马贵兰 +1 位作者 龙调玉 蒋红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期967-971,共5页
目的 寻找耐受性树突状细胞(tDC)输注到胶原蛋白诱导关节炎(CIA)模型大鼠后形成微嵌合体的证据。方法 骨髓来源的DC前体细胞经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)及核因子κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN decoy)诱导... 目的 寻找耐受性树突状细胞(tDC)输注到胶原蛋白诱导关节炎(CIA)模型大鼠后形成微嵌合体的证据。方法 骨髓来源的DC前体细胞经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)及核因子κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN decoy)诱导成tDC,再用1,1′-十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基三碳氰基碘化物(DiR)标记后输注到CIA大鼠体内。在细胞输注的第4 h、 24 h、 5 d、 10 d、 15 d,用小动物活体成像系统观察荧光强度和分布,第15天处死大鼠,检测主要脏器荧光信号。结果 tDC高表达OX62,低表达CD80和CD86。荧光信号主要集中在胸腹部和左后关节,胸腹部荧光信号在24 h最强,左后关节荧光信号在5 d最强。在细胞输注的15 d仍能检测到荧光,并且病足左后关节始终保持较强荧光信号。离体器官肺、肝、脾、肠系膜淋巴结中荧光信号较强,肾荧光信号较弱,心脏几乎没有荧光。结论 tDC在病足关节、肺、肝、脾、肠系膜淋巴结形成微嵌合体。 展开更多
关键词 耐受性树突状细胞(tDC) 胶原蛋白诱导性关节炎(CIA) 微嵌合 类风湿性关节炎(RA)
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耐受性树突状细胞对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞自噬的影响
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作者 李红红 万秀方 +3 位作者 袁锐 龙调玉 周燕 蒋红梅 《中国免疫学杂志》 2025年第9期2067-2073,2080,共8页
目的:探讨输注耐受性树突状细胞(tolDC)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞自噬的影响。方法:提取大鼠骨髓单核细胞,经IL-4、GM-CSF及NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导为tolDC,并负载BⅡC成为BⅡC-tolDC。SD大鼠随机分为正常对照组、CIA模型... 目的:探讨输注耐受性树突状细胞(tolDC)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞自噬的影响。方法:提取大鼠骨髓单核细胞,经IL-4、GM-CSF及NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导为tolDC,并负载BⅡC成为BⅡC-tolDC。SD大鼠随机分为正常对照组、CIA模型组及BⅡC-tolDC干预组,每组3只。正常雌性SD大鼠经牛Ⅱ型胶原乳剂免疫即为CIA模型组;CIA模型组在初次免疫第21天经尾静脉输注BⅡC-tolDC即为BⅡC-tolDC干预组,持续2周,每周记录各组大鼠关节炎指数。第35天处死大鼠,HE染色观察各组大鼠踝关节滑膜组织病理学改变;TRAP染色观察大鼠软骨组织破骨细胞数量变化;透射电子显微镜观察各组大鼠踝关节滑膜细胞自噬小体数量变化;ELISA检测各组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量变化;IHC检测各组大鼠踝关节滑膜细胞LC3、Beclin-1及ATG5蛋白表达情况。结果:牛Ⅱ型胶原成功构建了CIA大鼠模型,BⅡC-tolDC干预降低了CIA大鼠关节炎指数,抑制了滑膜炎症及滑膜组织异常增生,改善了关节骨及软骨损伤,减少了软骨组织破骨细胞数量及滑膜细胞自噬小体数量,同时降低了血清TNF-α、IL-1β含量和滑膜细胞LC3、Beclin-1及ATG5蛋白表达水平。结论:BⅡC-tolDC可能通过抑制CIA大鼠滑膜细胞自噬减轻CIA大鼠关节病变。 展开更多
关键词 耐受性树突状细胞 胶原诱导性关节炎 自噬 类风湿关节炎
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