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PARP-1在鱼藤酮诱导PC12细胞线粒体DNA损伤中的作用 被引量:5
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作者 肖靖淞 侯贵钟 +2 位作者 赛燕 张爱华 曹佳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期778-785,共8页
目的探讨PARP-1在鱼藤酮(rotenone)诱导大鼠PC12细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤中的作用。方法不同浓度(0、0.1、0.5、1.0、1.5μmol/L)鱼藤酮处理PC12细胞,TaqMan探针法PCR检测mtDNA缺失,qPCR法检测mtDNA拷贝数,Western blot检测PARP-1蛋白... 目的探讨PARP-1在鱼藤酮(rotenone)诱导大鼠PC12细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤中的作用。方法不同浓度(0、0.1、0.5、1.0、1.5μmol/L)鱼藤酮处理PC12细胞,TaqMan探针法PCR检测mtDNA缺失,qPCR法检测mtDNA拷贝数,Western blot检测PARP-1蛋白在PC12细胞内和线粒体内的表达水平。PARP-1选择性抑制剂PJ34预处理鱼藤酮染毒的PC12细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,TaqMan探针法PCR检测mtDNA缺失,qPCR法检测mtDNA拷贝数,四甲基罗丹明乙酯(TMRM)染色检测线粒体膜电位,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果 TaqMan探针法PCR和qPCR法检测结果显示,与对照组(0μmol/L鱼藤酮)比较,鱼藤酮处理可引起PC12细胞线粒体DNA缺失增加和线粒体DNA拷贝数降低(P<0.05)。同时,细胞和线粒体内的PARP-1蛋白表达被激活,Western bolt检测结果显示,PARP-1蛋白表达水平随鱼藤酮浓度增加而增加。与鱼藤酮单独处理组比较,PJ34预处理可提高鱼藤酮染毒引起的PC12细胞的活力下降(P<0.05),并降低线粒体DNA缺失和提高线粒体DNA拷贝数水平(P<0.05)。TMRM染色结果显示,PJ34预处理后线粒体膜电位水平提高(P<0.05);DCFH-DA探针检测结果显示,PJ34预处理后细胞内ROS水平下降(P<0.05)。结论鱼藤酮可诱导PC12细胞线粒体DNA的损伤,激活PC12细胞和线粒体内PARP-1蛋白的表达,PARP-1选择性抑制剂PJ34对鱼藤酮诱导的多巴胺神经元PC12细胞线粒体DNA的损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 鱼藤酮 帕金森病 PARP-1 PJ34 线粒体DNA
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重庆市大气细颗粒物中多环芳烃组分与男性精子DNA损伤的关联研究 被引量:4
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作者 王芙蓉 周妮娅 +3 位作者 陈卿 刘太秀 曹佳 张爱华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期17-24,共8页
目的探讨重庆市大气细颗粒物(PM2.5)中的多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)暴露对男性精子DNA的损害效应。方法研究对象来源于2013、2014年重庆市大学生男性生殖健康研究队列(male reproductive health in Chongqing col... 目的探讨重庆市大气细颗粒物(PM2.5)中的多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)暴露对男性精子DNA的损害效应。方法研究对象来源于2013、2014年重庆市大学生男性生殖健康研究队列(male reproductive health in Chongqing college students,MARHCS),检测采样期间大气PM2.5中的低环PAHs(2~4环)和高环PAHs(5~6环)各组分的含量;采用单细胞凝胶电泳实验检测精子DNA损伤;采用混合效应模型探讨PAHs各组分的暴露程度与男性大学生精子DNA损伤水平之间的关联。结果2013年大气细颗粒物中的PAHs组分以低环PAHs为主,其中菲、芴、芘的占比最高,而2014年大气细颗粒物中则以高环PAHs为主,如茚并[1,2,3-cd]芘、苯并[g,h,i]苝、苯并[a]芘等。在2014年,男性大学生的精子DNA损伤指标如彗星尾长、尾矩和Olive尾矩较2013年明显增加(P<0.05)。混合效应模型结果显示:低环PAHs中的荧蒽、苊烯、芘和总低环PAHs与精子DNA损伤指标中的彗星尾长和尾矩呈负相关。高环PAHs中的苯并[k]荧蒽、苯并[b]荧蒽和二苯并[a,h]蒽与精子DNA损伤指标中的彗星尾长呈正相关[β(95%CI):108.987(43.754~203.820)、158.700(65.957~303.272)、185.708(67.350~387.775),校正P均<0.05];与彗星尾矩呈正相关[β(95%CI):449.204(260.066~737.695)、683.108(374.515~1192.387)、683.108(374.515~1192.387),校正P均<0.05]。结论重庆市大气细颗粒物中的高环PAHs组分暴露,可能导致精子DNA损伤效应增加。 展开更多
关键词 大气细颗粒物 多环芳烃 精子DNA损伤 MARHCS队列
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亚砷酸钠抑制人肝细胞增殖并诱导其凋亡
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作者 孙宝飞 杨和平 +2 位作者 余佳 张爱华 骆衡 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1528-1539,共12页
砷是于环境中的强毒性重金属,会导致人类和动物的健康问题,包括肝的疾病。长期暴露于砷仍然是世界范围内的环境健康问题,影响着数亿人。虽然砷诱导的氧化应激和细胞凋亡已被证实,但其潜在细胞凋亡机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨亚砷... 砷是于环境中的强毒性重金属,会导致人类和动物的健康问题,包括肝的疾病。长期暴露于砷仍然是世界范围内的环境健康问题,影响着数亿人。虽然砷诱导的氧化应激和细胞凋亡已被证实,但其潜在细胞凋亡机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨亚砷酸钠(sodium arsenite,SA)诱导的肝中毒是否与DNA复制和修复途径的调节有关。MTT法和镜检法结果显示,SA对人肝细胞(L02)细胞增殖有抑制作用,而这种作用具有一定的时间及浓度依赖性。流式细胞仪检测不同浓度SA对L02细胞的影响,与对照组相比,高浓度的SA显著影响了L02细胞周期。此外,RNA测序结果表明,SA处理后的细胞差异表达基因集中在DNA复制过程和修复通路方面。同时,蛋白质印迹及实时定量PCR结果显示,SA可影响人RecQ DNA解旋酶和修复基因的表达,在我们的研究中,SA被证明在体外能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,引起DNA损伤并阻止人肝细胞L02的细胞周期。基于以上结果表明,砷中毒可能与DNA复制和修复途径的调节有关,这为了解砷中毒的分子机制提供了思路。 展开更多
关键词 人肝细胞 RecQ解旋酶 DNA修复途径
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