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g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达
被引量：
1
1
作者
夏海雄
李莉
+3 位作者
周艳华
任平平
何志旭
舒莉萍
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期57-63,共7页
目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(...
目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并将其显微注射入斑马鱼胚胎内,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;蛋白质印迹法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白的表达量;改良G6pd定量比值法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd酶活性。结果:g6pd基因在进化过程中相对保守,斑马鱼与人类的G6pd蛋白质相似度为88%,斑马鱼与小鼠的G6pd蛋白质相似度为87%。原位杂交试验结果显示,g6pd基因主要表达于斑马鱼的造血组织,显微注射g6pd-EGFP-p CS2+重组质粒后观察的结果与原位杂交试验结果一致。24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白相对表达量分别为1.44±0.03、1.47±0.05、1.54±0.02,差异无统计学意义(P>0.05);G6pd酶活性分别为1.74±0.17、1.75±0.12、1.71±0.22,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功观察到斑马鱼体内g6pd基因表达部位及其变化规律,并测定了不同发育时相斑马鱼胚胎中G6pd蛋白表达和酶活性,为建立斑马鱼G6PD缺乏症模型奠定了基础。
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关键词
葡糖磷酸脱氢酶缺乏
葡糖磷酸脱氢酶
原位杂交
DNA
重组
质粒
基因表达
斑马鱼
胚胎发育
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题名
g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达
被引量：
1
1
作者
夏海雄
李莉
周艳华
任平平
何志旭
舒莉萍
机构
贵州
医科
大学
组织工程与干细胞实验中心
贵州
医科
大学
基础医学院免疫学
教研室
贵州医科大学儿科学教研室
贵州
医科
大学
实验动物中心
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期57-63,共7页
基金
国家自然科学基金(31360285)
文摘
目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并将其显微注射入斑马鱼胚胎内,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;蛋白质印迹法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白的表达量;改良G6pd定量比值法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd酶活性。结果:g6pd基因在进化过程中相对保守,斑马鱼与人类的G6pd蛋白质相似度为88%,斑马鱼与小鼠的G6pd蛋白质相似度为87%。原位杂交试验结果显示,g6pd基因主要表达于斑马鱼的造血组织,显微注射g6pd-EGFP-p CS2+重组质粒后观察的结果与原位杂交试验结果一致。24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白相对表达量分别为1.44±0.03、1.47±0.05、1.54±0.02,差异无统计学意义(P>0.05);G6pd酶活性分别为1.74±0.17、1.75±0.12、1.71±0.22,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功观察到斑马鱼体内g6pd基因表达部位及其变化规律,并测定了不同发育时相斑马鱼胚胎中G6pd蛋白表达和酶活性,为建立斑马鱼G6PD缺乏症模型奠定了基础。
关键词
葡糖磷酸脱氢酶缺乏
葡糖磷酸脱氢酶
原位杂交
DNA
重组
质粒
基因表达
斑马鱼
胚胎发育
Keywords
Glucosephosphate dehydrogenase deficiency
Glucosephosphatedehydrogenase
In situ hybridization
DNA
recombinant
Plasmids
Gene expression
Zebrafish
Embryonic development
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达
夏海雄
李莉
周艳华
任平平
何志旭
舒莉萍
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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