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慢性阻塞性肺疾病大鼠气道成纤维细胞过表达HSG基因对Wnt和MAPK信号通路的影响
1
作者
杨义
周洵
+4 位作者
张军
李波
王新星
罗弦
葛正行
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2023年第22期2921-2927,共7页
目的研究在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmoriary disease,COPD)大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因(MFN2)对Wnt信号通路的影响。方法采用蛋白酶诱导的方式构建大鼠COPD模型,然后原代分离COPD模型大鼠气道成纤维细胞。构建...
目的研究在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmoriary disease,COPD)大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因(MFN2)对Wnt信号通路的影响。方法采用蛋白酶诱导的方式构建大鼠COPD模型,然后原代分离COPD模型大鼠气道成纤维细胞。构建HSG基因的表达载体,转染大鼠气道成纤维细胞,得到过表达HSG的大鼠气道成纤维细胞。实验一,采用Wnt信号途径激动剂佛波醇酯(TPA)处理细胞,WB、qPCR检测转染后HSG、Wnt5a的表达;实验二,采用MAPK信号途径激动剂EGF因子处理细胞,WB、qPCR检测转染后HSG、ERK1/2的表达;而且每个实验都进行ELISA检测细胞培养液中TGF-β1、PDGF、MMP-9的含量,流式检测细胞凋亡情况。结果COPD模型大鼠气道成纤维细胞分离成功。实验一二中,WB、qPCR检测显示过表达HSG能抑制基因Wnt5a和ERK1/2的表达,受相应激动剂处理后,这些基因表达上调而HSG表达受抑制;而ELISA检测结果显示,过表达HSG能降低TGF-β1、PDGF、MMP-9的含量,受相应激动剂处理后TGF-β1、PDGF、MMP-9的含量上升,而过表达HSG依然有抑制效果。流式检测细胞凋亡显示过表达HSG会明显上调细胞凋亡率,而相应的激动剂处理会降低过表达HSG促进细胞凋亡的效果。流式检测细胞周期显示过表达HSG对细胞周期的影响并不明显。结论在COPD大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因对Wnt和MAPK等信号途径均有抑制效果,而且过表达HSG基因有着促进成纤维细胞凋亡,可以推测促进HSG表达具有抑制COPD大鼠气道纤维化的效果。
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关键词
慢性阻塞性肺疾病
WNT信号通路
成纤维细胞
HSG
MAPK信号通路
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题名
慢性阻塞性肺疾病大鼠气道成纤维细胞过表达HSG基因对Wnt和MAPK信号通路的影响
1
作者
杨义
周洵
张军
李波
王新星
罗弦
葛正行
机构
贵州
中医药大学
贵州
中医药大学
第二
附属
医院
呼吸内科
贵州中医药大学第二附属医院科研教学部
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2023年第22期2921-2927,共7页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81473533)
贵州省重大应用基础研究(编号:黔科合J重大字[2015]2002)。
文摘
目的研究在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmoriary disease,COPD)大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因(MFN2)对Wnt信号通路的影响。方法采用蛋白酶诱导的方式构建大鼠COPD模型,然后原代分离COPD模型大鼠气道成纤维细胞。构建HSG基因的表达载体,转染大鼠气道成纤维细胞,得到过表达HSG的大鼠气道成纤维细胞。实验一,采用Wnt信号途径激动剂佛波醇酯(TPA)处理细胞,WB、qPCR检测转染后HSG、Wnt5a的表达;实验二,采用MAPK信号途径激动剂EGF因子处理细胞,WB、qPCR检测转染后HSG、ERK1/2的表达;而且每个实验都进行ELISA检测细胞培养液中TGF-β1、PDGF、MMP-9的含量,流式检测细胞凋亡情况。结果COPD模型大鼠气道成纤维细胞分离成功。实验一二中,WB、qPCR检测显示过表达HSG能抑制基因Wnt5a和ERK1/2的表达,受相应激动剂处理后,这些基因表达上调而HSG表达受抑制;而ELISA检测结果显示,过表达HSG能降低TGF-β1、PDGF、MMP-9的含量,受相应激动剂处理后TGF-β1、PDGF、MMP-9的含量上升,而过表达HSG依然有抑制效果。流式检测细胞凋亡显示过表达HSG会明显上调细胞凋亡率,而相应的激动剂处理会降低过表达HSG促进细胞凋亡的效果。流式检测细胞周期显示过表达HSG对细胞周期的影响并不明显。结论在COPD大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因对Wnt和MAPK等信号途径均有抑制效果,而且过表达HSG基因有着促进成纤维细胞凋亡,可以推测促进HSG表达具有抑制COPD大鼠气道纤维化的效果。
关键词
慢性阻塞性肺疾病
WNT信号通路
成纤维细胞
HSG
MAPK信号通路
Keywords
chronic obstructive pulmoriary disease
Wnt signaling pathway
fibroblast
HSG
MAPK signaling pathway
分类号
R563.9 [医药卫生—呼吸系统]
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1
慢性阻塞性肺疾病大鼠气道成纤维细胞过表达HSG基因对Wnt和MAPK信号通路的影响
杨义
周洵
张军
李波
王新星
罗弦
葛正行
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2023
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