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大黄素抑制胃癌AGS细胞YAP1、FOXD1基因表达及相关机制 被引量:2
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作者 顾天 刘春宏 +4 位作者 张飞 钱薇 朱艳秋 褚明亮 刘杰民 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期59-64,71,共7页
目的探讨大黄素抑制胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭及癌基因YAP1、FOXD1基因表达的可能机制。方法培养胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS,使用不同浓度大黄素进行干预。通过CCK8实验、划痕实验、Transwell小室实验验证大黄素处理后AGS细... 目的探讨大黄素抑制胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭及癌基因YAP1、FOXD1基因表达的可能机制。方法培养胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS,使用不同浓度大黄素进行干预。通过CCK8实验、划痕实验、Transwell小室实验验证大黄素处理后AGS细胞的生物学表型变化。使用在线软件分析TCGA数据库中糖酵解代谢关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1在胃癌组织及正常组织中的表达情况。印迹法验证大黄素对AGS中糖酵解代谢关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1蛋白的影响变化。添加外源性糖酵解代谢产物丙酮酸,增强糖酵解代谢活性,验证癌基因YAP1和FOXD1的相应变化。结果胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS在不同浓度大黄素干预后,发现GES-1的大黄素半数致死量浓度明显高于AGS(P<0.05)。进一步的CCK8增殖实验、划痕实验、Transwell小室实验结果均发现大黄素可以明显抑制AGS的增殖、迁移、侵袭等肿瘤生物学能力(P<0.05)。TCGA生物信息数据库分析发现糖酵解途径关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1在胃癌组织中的表达明显高于胃正常组织的表达(P<0.05)。大黄素可以明显抑制糖酵解关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达(P<0.05)。补充外源性糖酵解代谢产物丙酮酸后,癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论大黄素对胃癌AGS细胞有显著的药理抑制作用,可以明显抑制其肿瘤生物学表型。大黄素在显著抑制糖酵解代谢关键酶HK2的同时,也显著抑制癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达。当添加外源性丙酮酸增强糖酵解代谢通路后,癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达显著升高。以上提示YAP1、FOXD1和糖酵解代谢的密切相关性,大黄素可能通过抑制胃癌AGS细胞糖酵解代谢,抑制癌基因YAP1和FOXD1。 展开更多
关键词 大黄素 胃癌 HK2 YAP1 FOXD1 糖酵解代谢
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二氢杨梅素对Bloom解旋酶结构和生物学活性的影响 被引量:2
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作者 刘金河 张望明 +2 位作者 晏文涛 许键炜 葛章文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1453-1460,共8页
目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检... 目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检测等方法和技术研究DMY对BLM解旋酶的生物学活性的影响。结果圆二色谱和紫外光谱结果显示,DMY能与BLM解旋酶结合,且有1个结合位点;在0~25μmol·L^-1浓度范围内,DMY对BLM解旋酶的二级结构的干扰能力成正相关,在25~75μmol·L^-1浓度范围内则相反。荧光偏振和自由磷检测实验显示,DMY能结合在BLM解旋酶上,进而抑制BLM解旋酶的解链活性。结论DMY能够竞争性结合于BLM解旋酶的DNA结合位点上,改变BLM解旋酶的空间结构,从而抑制BLM解旋酶与DNA的结合,进而抑制BLM解旋酶的生物学活性。 展开更多
关键词 二氢杨梅素 Bloom解旋酶 生化活性 构象 二级结构 圆二色谱 荧光偏振
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汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶生物学特性的影响 被引量:2
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作者 刘金河 张望明 +5 位作者 晏文涛 向天 罗维 杨凯琳 徐泽权 刘杰麟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期209-214,共6页
目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描... 目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描研究药物HL-49对BLM DNA解旋酶构象的影响,荧光偏振技术和孔雀绿-磷钼酸铵比色法分析HL-49对BLM解旋酶的DNA结合活性、DNA解链活性、ATPase活性。结果紫外光谱扫描结果显示,HL-49对BLM DNA解旋酶的三维构象影响不明显。荧光偏振法结果显示,HL-49对BLM解旋酶的DNA(dsDNA/ssDNA)结合活性的影响不明显,但随浓度的增加,与DNA相互结合的能力越强(P<0.01)。随着HL-49浓度的增加,BLM DNA解旋酶的DNA解链能力下降,K_(obs)值逐渐降低。孔雀绿-磷钼酸铵比色结果说明,随着HL-49浓度的增加或作用时间延长,HL-49能明显抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性。结论汉防己甲素衍生物HL-49通过与DNA的可逆性结合,抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性和DNA解链活性。 展开更多
关键词 汉防己甲素衍生物 Bloom解旋酶 生化活性 构象 荧光偏振 ATP酶活性
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慢性胃炎中P1-HNF4α和CDX2的相关性及与病理资料的相关分析 被引量:11
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作者 王琳 褚明亮 +2 位作者 刘杰民 胡建军 曹颖 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期838-843,共6页
目的探索P1-HNF4α、CDX2与慢性胃炎不同临床病理资料的关系及二者之间的相互关系。方法对294例慢性胃炎标本进行CDX2、P1-HNF4α免疫组化染色,结合慢性胃炎的不同临床病理资料进行分析。结果CDX2和P1-HNF4α蛋白表达阳性率和表达强度,... 目的探索P1-HNF4α、CDX2与慢性胃炎不同临床病理资料的关系及二者之间的相互关系。方法对294例慢性胃炎标本进行CDX2、P1-HNF4α免疫组化染色,结合慢性胃炎的不同临床病理资料进行分析。结果CDX2和P1-HNF4α蛋白表达阳性率和表达强度,在肠化生慢性胃炎组织中要高于非肠化生组织(均P<0.001)。在非肠化生组织,P1-HNF4α的表达强度和慢性胃炎的不同严重程度呈正相关(r_(s)=0.366,P<0.001)。141例^(14)C-尿素呼气试验结果显示男性HP感染阳性率明显高于女性(P=0.02)。在非肠化生标本组,CDX2的表达强度在HP感染阳性组均要高于HP感染阴性组(P=0.017)。在轻、中、重不同程度慢性胃炎组织中,CDX2和P1-HNF4α二者之间的表达强度都呈现正相关关系(均r_(s)>0.5,均P<0.001)。按年龄分组,CDX2的表达在≥40岁年龄组,阳性率高于<40岁年龄组(P=0.026)。按性别分组,CDX2的表达强度在男性组中要高于女性组(P=0.023)。按部位分组,CDX2和P1-HNF4α的阳性率在幽门部+胃角部最高,其他部位(贲门部+胃底部+胃体部)较低(均P<0.001)。除此之外,CDX2和P1-HNF4α的表达强度在幽门部+胃角部均高于其他部位(均P<0.05)。结论在慢性胃炎的部分临床病理特征中,P1-HNF4α与CDX2的表达具有相同的共性,且二者之间存在正相关关系,因此推测二者在慢性胃炎发生发展过程中可能共同发挥着重要作用。 展开更多
关键词 慢性胃炎 CDX2 P1-HNF4α
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基于网络药理学和分子对接研究山慈菇对肺癌的作用机制 被引量:5
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作者 钱薇 褚明亮 刘杰民 《特产研究》 2021年第5期53-62,74,共11页
本研究基于网络药理学和分子对接技术探索中药山慈菇的有效活性成分及其对肺癌疾病中的作用机制。通过检索TCMSP提取山慈菇的有效成分及其作用靶点,检索GeneCards数据库和Drugbank数据库提取肺癌疾病靶点信息,运用STRING数据库构建疾病... 本研究基于网络药理学和分子对接技术探索中药山慈菇的有效活性成分及其对肺癌疾病中的作用机制。通过检索TCMSP提取山慈菇的有效成分及其作用靶点,检索GeneCards数据库和Drugbank数据库提取肺癌疾病靶点信息,运用STRING数据库构建疾病和药物共同靶点蛋白-蛋白相互作用网络,使用Cytoscape3.7.1软件建立"成分-靶点-通路"网络探究山慈菇的抗癌作用机制,利用Matescape对共同靶点进行GO富集化分析和KEGG通路分析;运用AutoDock的可视化软件对活性成分与关键靶点进行分子对接结果验证。结果显示,获得山慈菇主要活性成分21个,筛选后得到有效活性成分6个和68个药物靶点,山慈菇与癌症疾病共同的靶点为32个。通过蛋白互作图发现CASP3、JUN、ESR1、PTGS2、MAPK14、PIK3CA和CASP8等可能是山慈菇作用于癌症疾病的关键靶点。分子对接结果表明与活性成分为2-甲氧基-9,10-二氢菲-4,5-二醇的关键靶点CASP3基因对接亲和度最高,为-33.07k J/mol。本研究初步验证了山慈菇的基本药理作用及其对肺癌的作用机制,为进一步的研究提供方向。 展开更多
关键词 山慈菇 网络药理学 肺癌 分子对接 作用机制
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ABCA1通过激活EGFR/STAT3信号通路对胃癌上皮间质转化的影响 被引量:4
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作者 金泳 杜洪 +4 位作者 夏英 项婷婷 韦四喜 孙铭 黄海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1705-1711,共7页
目的探讨ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)对人胃癌侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法基于网络数据库进行生物信息学分析ABCA1在人胃癌中的表达及其与胃癌患者预后的关系。RT-qPCR检测25对临床胃癌组织样本中ABCA1表达情... 目的探讨ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)对人胃癌侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法基于网络数据库进行生物信息学分析ABCA1在人胃癌中的表达及其与胃癌患者预后的关系。RT-qPCR检测25对临床胃癌组织样本中ABCA1表达情况;RT-qPCR及Western blot分析ABCA1在不同人胃癌细胞系中的表达;利用基因沉默技术构建稳定低表达ABCA1胃癌细胞株。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot测定EMT及表皮生长因子受体(EGFR)/信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)信号通路相关蛋白的表达。结果生物信息学分析结果显示ABCA1在胃癌中高表达,且与胃癌的分级、分期及不良预后呈正相关。RT-qPCR结果显示ABCA1在胃癌组织和胃癌细胞HGC-27中高表达;Transwell实验结果表明,敲低ABCA1能够抑制HGC-27细胞侵袭和迁移。Western blot结果表明,ABCA1敲低组间质细胞标记蛋白(Vimentin、N-Cadherin)和EMT相关的转录因子(Twist、Zeb1及Snail)表达下调,而上皮细胞标记蛋白E-Cadherin表达上调。Western blot结果提示,与对照组相比,敲低ABCA1抑制了EGFR下游分子STAT3的表达,并使得EGFR及其下游分子STAT3磷酸化水平降低。结论ABCA1在胃癌中表达上调且与胃癌的侵袭、迁移、EMT及不良预后相关。ABCA1可能通过调节EGFR来影响STAT3的表达及激活,从而抑制胃癌细胞的侵袭、迁移及EMT。 展开更多
关键词 胃癌 ABCA1 侵袭 迁移 上皮间质转化
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蛋白酶体抑制剂MG132改善胶原诱导性关节炎模型大鼠炎症反应的研究
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作者 蹇孝丽 师萍 +2 位作者 周艳 冯琳琳 蒋红梅(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期2049-2052,共4页
目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症相关因子的影响。方法:48只雌性SD大鼠随机分为对照组、关节炎模型组、MG132干预组。于大鼠左足趾部皮内注射牛Ⅱ型胶原构建关节炎模型,干预组在关节炎模型基础上于皮下注... 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症相关因子的影响。方法:48只雌性SD大鼠随机分为对照组、关节炎模型组、MG132干预组。于大鼠左足趾部皮内注射牛Ⅱ型胶原构建关节炎模型,干预组在关节炎模型基础上于皮下注射MG132进行干预。建模后每周观察大鼠关节肿胀程度,并计算关节炎指数。第42天处死大鼠,取大鼠踝关节进行HE染色观察其病理改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10的水平。结果:牛Ⅱ型胶原成功诱导大鼠关节炎病变,MG132干预明显降低了关节炎指数,减少关节损坏、滑膜组织细胞增生及炎症反应,同时降低大鼠血清TNF-α、IL-6表达水平(P<0.01),提高IL-10表达水平(P<0.01)。结论:MG132能减轻胶原诱导性大鼠关节炎相关炎症指标,调节胶原诱导性关节炎模型大鼠血清促炎因子与抑炎因子的表达平衡,改善其炎症症状。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂MG132 胶原诱导性关节炎 炎症因子
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