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人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体的构建及测序
被引量：
2
1
作者
董征学
彭代智
+7 位作者
刘敬
周新
田易
李芳
严泉
林恒
王勇
周光前
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期1007-1009,共3页
目的利用RNA干扰技术,以人CCL20基因为靶基因,设计CCL20基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定。方法设计并合成人CCL20基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经SpeⅠ和SalⅠ双酶切线性化的p...
目的利用RNA干扰技术,以人CCL20基因为靶基因,设计CCL20基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定。方法设计并合成人CCL20基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经SpeⅠ和SalⅠ双酶切线性化的pHSER dsRNA GFP SIN质粒上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。结果将合成的两对人CCL20基因特异性DNA寡核苷酸序列退火后,分别克隆到线性化的pHSER dsRNA GFP SIN载体质粒上。在氨苄青霉素培养基条件下,筛选出相应的阳性菌落,经DNA测序鉴定确实为所需序列。结论构建成功了2对人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体,可进一步用于干扰CCL20基因的mRNA转录,从而为制备CCL20基因表达抑制型的人角朊干细胞奠定基础。
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关键词
RNA干扰
慢病毒表达载体
CCL20基因
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职称材料
题名
人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体的构建及测序
被引量：
2
1
作者
董征学
彭代智
刘敬
周新
田易
李芳
严泉
林恒
王勇
周光前
机构
第三军医
大学
西南医院全军烧伤
研究
所
贝尔法斯特女王大学癌症研究和细胞生物学中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期1007-1009,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30471679)
创伤
烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金资助项目(200306)~~
文摘
目的利用RNA干扰技术,以人CCL20基因为靶基因,设计CCL20基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定。方法设计并合成人CCL20基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经SpeⅠ和SalⅠ双酶切线性化的pHSER dsRNA GFP SIN质粒上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。结果将合成的两对人CCL20基因特异性DNA寡核苷酸序列退火后,分别克隆到线性化的pHSER dsRNA GFP SIN载体质粒上。在氨苄青霉素培养基条件下,筛选出相应的阳性菌落,经DNA测序鉴定确实为所需序列。结论构建成功了2对人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体,可进一步用于干扰CCL20基因的mRNA转录,从而为制备CCL20基因表达抑制型的人角朊干细胞奠定基础。
关键词
RNA干扰
慢病毒表达载体
CCL20基因
Keywords
RNA interference
lentiviral vector
CCL20
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
Q781 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体的构建及测序
董征学
彭代智
刘敬
周新
田易
李芳
严泉
林恒
王勇
周光前
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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