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TIM-3介导免疫平衡失调与支气管哮喘发病的意义及机制研究 被引量:9
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作者 汤菲 安黎云 +2 位作者 王缚鲲 王宪灵 贾克然 《海南医学院学报》 CAS 2015年第1期14-17,共4页
目的:探讨TIM-3介导免疫平衡失调与支气管哮喘发病的意义及机制。方法:选取2013年1月~2014年6月在本院呼吸科就诊并诊断为支气管哮喘患者及正常健康人设为实验组和对照组,各50例,收集外周血,流式细胞仪检测两组人群外周血中辅助性T细... 目的:探讨TIM-3介导免疫平衡失调与支气管哮喘发病的意义及机制。方法:选取2013年1月~2014年6月在本院呼吸科就诊并诊断为支气管哮喘患者及正常健康人设为实验组和对照组,各50例,收集外周血,流式细胞仪检测两组人群外周血中辅助性T细胞17(T helper 17,Th17)及调节性T细胞(regulatory T cell,Treg细胞)比例,并检测TIM-3表达改变,分析其与支气管哮喘发病的相关性;并阻断TIM-3表达,观察其对Th17及Treg细胞的影响。结果:Tim-3抑制前,实验组患者Th17、Treg细胞比例以及Th17/treg值均高于对照组患者,差异有统计学意义(P〈0.01);Tim-3抑制后,实验组患者Th17细胞比例和Th17/treg值仍高于对照组患者,差异有统计学意义(P〈0.01),而Treg细胞比例和对照组无显著差别(P〉0.01);Tim-3抑制前后,实验组患者Th17、Treg细胞比例以及Th17/treg值均有显著变化,差异有统计学意义(P〈0.01)。相关性分析的结果表明外周血中Th17细胞比例同Treg细胞为负相关关系(r=-0.436,P〈0.05)。实验组及对照组患者外周血中CD4+Tim3+细胞占CD4+细胞比例分别是(5.22±0.95)%和(2.20±0.41)%,实验组显著高于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.01)。对照组患者Th17细胞有少量Tim-3[(0.18±0.05)%]表达,实验组患者外周血中Th17细胞基本无Tim-3表达,两组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:哮喘患者外周血中Th17细胞和Treg细胞比例失衡,可能为哮喘发生的重要诱导因素,Tim-3抑制后,实验组患者Th17细胞和Treg细胞比例有显著变化,暗示Tim-3的表达对这两种细胞数量有明显的调控作用。此外支气管哮喘患者外周血T淋巴细胞中TIM-3表达有显著增高。 展开更多
关键词 哮喘 TIM-3 辅助性T细胞17(Th17) 调节性T细胞
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白念珠菌磷酸甘油酸激酶1的原核表达及免疫原性分析 被引量:5
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作者 贺政新 陈晶 +4 位作者 冉向阳 陈兴 白云 谢晓民 侯天文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1079-1081,1086,共4页
目的构建白念珠菌基因磷酸甘油酸激酶1(PGK-1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,对其免疫原性进行分析。方法 PCR法获取白念珠菌SC5314的PGK-1基因,插入原核表达载体pET30a中,以重组质粒转染感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达后,SDS-... 目的构建白念珠菌基因磷酸甘油酸激酶1(PGK-1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,对其免疫原性进行分析。方法 PCR法获取白念珠菌SC5314的PGK-1基因,插入原核表达载体pET30a中,以重组质粒转染感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE检测蛋白的表达情况,并用Western blot法验证。用纯化获取的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA对蛋白的免疫原性进行评价。结果成功构建原核表达质粒pET-30a-pgk-1,诱导后表达的重组蛋白相对分子质量(M r)约为54 810。ELISA检测抗体效价约为1∶1 024。结论成功获得白念珠菌PGK-1重组蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 白念珠菌 原核表达 磷酸甘油酸激酶1 侵袭性念珠菌病
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自身免疫性疾病患者血清抗白念珠菌烯醇化酶IgG型抗体的检测和分析 被引量:3
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作者 贺政新 王廷廷 +3 位作者 单得志 张晓刚 王更银 王缚鲲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1113-1117,共5页
目的检测自身免疫性疾病患者血清中抗白念珠菌烯醇化酶(Eno)IgG型抗体表达情况。方法以重组白念珠菌Eno为包被抗原,建立ELISA检测方法并对反应条件优化,检测健康献血员对照组和自身免疫性疾病患者血清中抗白念珠菌Eno IgG型抗体。用West... 目的检测自身免疫性疾病患者血清中抗白念珠菌烯醇化酶(Eno)IgG型抗体表达情况。方法以重组白念珠菌Eno为包被抗原,建立ELISA检测方法并对反应条件优化,检测健康献血员对照组和自身免疫性疾病患者血清中抗白念珠菌Eno IgG型抗体。用Western blot法验证部分Eno抗体阳性血清的准确性。结果共检测自身免疫性疾病患者血清70份,其中抗白念珠菌Eno IgG型抗体阳性血清19份,总体阳性率为27.14%(19/70)。与对照组相比,自身免疫性疾病患者白念珠菌Eno IgG型抗体阳性率明显升高。其中,类风湿性关节炎患者白念珠菌Eno IgG型抗体阳性率为11.8%(2/17)、红斑狼疮患者阳性率为45.8%(11/24)。部分血清反应特异性得到Western blot验证。结论自身免疫性疾病患者血清抗白念珠菌Eno IgG型抗体阳性率较高,可能对白念珠菌Eno IgG型抗体应用于侵袭性念珠菌病诊断有干扰。 展开更多
关键词 自身免疫性疾病 烯醇化酶 白念珠菌 酶联免疫吸附 IGG抗体
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流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌方法的建立和应用 被引量:3
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作者 贺政新 陈晶 +2 位作者 王宪灵 赵博华 侯天文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期470-473,共4页
目的建立全血白细胞吞噬白念珠菌的流式细胞术检测方法。方法绘制白念珠菌生长曲线后,取生长对数中期的白念珠菌,以活体细胞示踪荧光探针二乙酰羧基荧光黄琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记,与以PC5标记的CD45单克隆抗体预标记的全血白细胞,... 目的建立全血白细胞吞噬白念珠菌的流式细胞术检测方法。方法绘制白念珠菌生长曲线后,取生长对数中期的白念珠菌,以活体细胞示踪荧光探针二乙酰羧基荧光黄琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记,与以PC5标记的CD45单克隆抗体预标记的全血白细胞,在37℃分别反应10、30、60min(MOI≈10∶1),以流式细胞术观察CD45阳性细胞对白念珠菌的吞噬情况。结果白念珠菌在液体酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YPD)中37℃、50mL/LCO2培养,第5~11h为对数生长期。10mmol/LCFDA-SE染色30min,可使白念珠菌均匀着色;CD45阳性细胞和标记的白念珠菌作用10、30、60min,CD45阳性细胞中中性粒细胞的吞噬率分别为(80.1±6.1)%、(83.8±7.7)%和(92.3±11.2)%;单核细胞的吞噬率为(11.2±3.6)%、(15.8±4.4)%和(27.7±6.8)%,淋巴细胞作为无明显吞噬作用内参,其吞噬率为(0.9±0.3)%、(0.8±0.4)%和(5.2±1.6)%。结论成功建立流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌的方法,全血白细胞与白念珠菌共孵育30min是较为合适的作用时间。 展开更多
关键词 流式细胞术 白念珠菌 吞噬
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酿酒酵母烯醇化酶单克隆抗体的制备、筛选与鉴定 被引量:1
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作者 贺政新 陈兴 +3 位作者 贺占国 白云 陈晶 侯天文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期176-178,共3页
烯醇化酶(enolase,ENO)是糖酵解过程中必需的关键酶,能催化磷酸甘油酸向磷酸烯醇式丙酮酸转变,也能在糖异生过程中催化逆向反应。白念珠烯醇化酶由440个氨基酸组成,相对分子质量(尬)47000左右。据研究,其含量分别约占白念珠菌... 烯醇化酶(enolase,ENO)是糖酵解过程中必需的关键酶,能催化磷酸甘油酸向磷酸烯醇式丙酮酸转变,也能在糖异生过程中催化逆向反应。白念珠烯醇化酶由440个氨基酸组成,相对分子质量(尬)47000左右。据研究,其含量分别约占白念珠菌孢子相和菌丝相的0.7%和2%[1],是白念珠菌含量最为丰富的蛋白质之一。 展开更多
关键词 白念珠菌 烯醇化酶 单克隆抗体
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