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IgA肾病内皮源型一氧化氮合酶基因多态性分析
被引量：
3
1
作者
洪权
丁瑞
+1 位作者
陈香美
吕杨
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期1421-1422,1430,共3页
目的研究内皮型NO合酶(eNOS)基因多态性与IgA肾病的关系。方法采用聚合酶链反应法对北方地区(汉族:北京,天津,河北)296例IgA患者、310例正常对照两组人群的eNOS基因第4内含子的可变串联重复序列多态性(VNTR)4a/b多态性进行基因型分析,...
目的研究内皮型NO合酶(eNOS)基因多态性与IgA肾病的关系。方法采用聚合酶链反应法对北方地区(汉族:北京,天津,河北)296例IgA患者、310例正常对照两组人群的eNOS基因第4内含子的可变串联重复序列多态性(VNTR)4a/b多态性进行基因型分析,比较两组间基因频率、等位基因频率分布有无统计学差异。结果两组患者的eNOS基因的可变串联复序列表现为eNOS4a/4a,eNOS4b/4b,eNOS4a/4b3种基因型。IgA肾病患者组和正常对照组之间的eNOS基因4a/b的基因型和等位基因频率无显著性差异。结论eNOS基因内含子4VNTR多态性与IgA肾病血管病变的发生无明显关联。该多态性在IgA肾病遗传因素中的地位尚难以确定,其参与IgA肾病微血管病变的作用可能存在种族或地域异质性。
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关键词
IGA肾病
内皮型一氧化氮合酶
多态现象(遗传学)
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职称材料
利用PCR方法获得shRNA抑制内外源性基因的表达
被引量：
2
2
作者
洪权
吴镝
+3 位作者
陈香美
冯哲
孙学峰
张雪光
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第9期800-803,共4页
目的探讨PCR法获得的shRNA对外源性基因和内源性基因表达的抑制效果。方法选择绿色荧光蛋白(GFP)和大鼠肾脏系膜细胞高丰度表达的纤维连接蛋白(FN)分别作为外源性和内源性基因的靶基因,设计特异性引物,利用PCR扩增获得shGFPRNA和shFNRN...
目的探讨PCR法获得的shRNA对外源性基因和内源性基因表达的抑制效果。方法选择绿色荧光蛋白(GFP)和大鼠肾脏系膜细胞高丰度表达的纤维连接蛋白(FN)分别作为外源性和内源性基因的靶基因,设计特异性引物,利用PCR扩增获得shGFPRNA和shFNRNA。前者与pEGFP质粒共转染至293T细胞,48h后进行激光共聚焦检测细胞表达GFP阳性率;后者转染至大鼠系膜细胞(RMC)中,48h后提取总RNA逆转录成cDNA,经realtimeRTPCR检测FN的mRNA表达水平,提取细胞总蛋白进行Westernblot检测FN蛋白表达水平。结果PCR获得的shGFPRNA产物能有效抑制外源性基因GFP的表达,抑制效率可达70%±3.2%;shRNA转染组内源性基因FN的表达水平明显下降,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论PCR方法可快速简单、廉价地获得shRNA,对内源性或外源性基因进行特异性抑制。
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关键词
RNAi
小分子干扰
聚合酶链反应
纤连蛋白类
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职称材料
人尿酸转运蛋白基因的克隆与序列分析
被引量：
2
3
作者
洪权
吴镝
+1 位作者
陈香美
侯剀
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第6期623-625,629,共4页
目的获得编码人尿酸转运蛋白(humanuricacidtransporter,hUAT)的全长基因。方法从人肾小管上皮细胞株(HK-2)中提取总RNA,根据Genbank中hUAT基因序列设计特异性引物,然后通过RT-PCR法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pEGFP-C1连接...
目的获得编码人尿酸转运蛋白(humanuricacidtransporter,hUAT)的全长基因。方法从人肾小管上皮细胞株(HK-2)中提取总RNA,根据Genbank中hUAT基因序列设计特异性引物,然后通过RT-PCR法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pEGFP-C1连接,经酶切及序列分析鉴定。结果成功扩增出980bp的hUAT全长基因,克隆到pEGFP-C1载体后酶切分析结果与预期一致,序列分析结果与Genbank上公布的hUAT序列完全一致。结论成功克隆出hUAT基因,序列分析结果完全正确,为对该基因进一步研究奠定了基础。
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关键词
尿酸转运蛋白
逆转录-聚合酶链反应
克隆
序列分析
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职称材料
题名
IgA肾病内皮源型一氧化氮合酶基因多态性分析
被引量：
3
1
作者
洪权
丁瑞
陈香美
吕杨
机构
解放军总医院肾病中心暨肾病重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期1421-1422,1430,共3页
基金
国家自然科学基金"创新研究群体"项目(30121005)~~
文摘
目的研究内皮型NO合酶(eNOS)基因多态性与IgA肾病的关系。方法采用聚合酶链反应法对北方地区(汉族:北京,天津,河北)296例IgA患者、310例正常对照两组人群的eNOS基因第4内含子的可变串联重复序列多态性(VNTR)4a/b多态性进行基因型分析,比较两组间基因频率、等位基因频率分布有无统计学差异。结果两组患者的eNOS基因的可变串联复序列表现为eNOS4a/4a,eNOS4b/4b,eNOS4a/4b3种基因型。IgA肾病患者组和正常对照组之间的eNOS基因4a/b的基因型和等位基因频率无显著性差异。结论eNOS基因内含子4VNTR多态性与IgA肾病血管病变的发生无明显关联。该多态性在IgA肾病遗传因素中的地位尚难以确定,其参与IgA肾病微血管病变的作用可能存在种族或地域异质性。
关键词
IGA肾病
内皮型一氧化氮合酶
多态现象(遗传学)
Keywords
IgA nephropathy
endothelial nitric oxide synthase
gene polymorphism
分类号
R692.3 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
利用PCR方法获得shRNA抑制内外源性基因的表达
被引量：
2
2
作者
洪权
吴镝
陈香美
冯哲
孙学峰
张雪光
机构
解放军总医院肾病中心暨肾病重点实验室
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第9期800-803,共4页
基金
国家自然科学基金(编号30370655)
国家"973"项目(编号G2000057000)资助课题
文摘
目的探讨PCR法获得的shRNA对外源性基因和内源性基因表达的抑制效果。方法选择绿色荧光蛋白(GFP)和大鼠肾脏系膜细胞高丰度表达的纤维连接蛋白(FN)分别作为外源性和内源性基因的靶基因,设计特异性引物,利用PCR扩增获得shGFPRNA和shFNRNA。前者与pEGFP质粒共转染至293T细胞,48h后进行激光共聚焦检测细胞表达GFP阳性率;后者转染至大鼠系膜细胞(RMC)中,48h后提取总RNA逆转录成cDNA,经realtimeRTPCR检测FN的mRNA表达水平,提取细胞总蛋白进行Westernblot检测FN蛋白表达水平。结果PCR获得的shGFPRNA产物能有效抑制外源性基因GFP的表达,抑制效率可达70%±3.2%;shRNA转染组内源性基因FN的表达水平明显下降,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论PCR方法可快速简单、廉价地获得shRNA,对内源性或外源性基因进行特异性抑制。
关键词
RNAi
小分子干扰
聚合酶链反应
纤连蛋白类
Keywords
RNA, small interfering, polymerase chain reaction, fibronectins
分类号
R781 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
人尿酸转运蛋白基因的克隆与序列分析
被引量：
2
3
作者
洪权
吴镝
陈香美
侯剀
机构
解放军总医院肾病中心暨肾病重点实验室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第6期623-625,629,共4页
基金
国家自然科学基金"创新研究群体"项目(30121005)
国家"973"项目(G2000057000)
国家自然科学基金(30100062)~~
文摘
目的获得编码人尿酸转运蛋白(humanuricacidtransporter,hUAT)的全长基因。方法从人肾小管上皮细胞株(HK-2)中提取总RNA,根据Genbank中hUAT基因序列设计特异性引物,然后通过RT-PCR法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pEGFP-C1连接,经酶切及序列分析鉴定。结果成功扩增出980bp的hUAT全长基因,克隆到pEGFP-C1载体后酶切分析结果与预期一致,序列分析结果与Genbank上公布的hUAT序列完全一致。结论成功克隆出hUAT基因,序列分析结果完全正确,为对该基因进一步研究奠定了基础。
关键词
尿酸转运蛋白
逆转录-聚合酶链反应
克隆
序列分析
Keywords
urate transporter
polymerase chain reaction, reverse transcriptional
clone
sequence analysis
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IgA肾病内皮源型一氧化氮合酶基因多态性分析
洪权
丁瑞
陈香美
吕杨
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用PCR方法获得shRNA抑制内外源性基因的表达
洪权
吴镝
陈香美
冯哲
孙学峰
张雪光
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人尿酸转运蛋白基因的克隆与序列分析
洪权
吴镝
陈香美
侯剀
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
2
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职称材料
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