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IgA肾病内皮源型一氧化氮合酶基因多态性分析 被引量:3
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作者 洪权 丁瑞 +1 位作者 陈香美 吕杨 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1421-1422,1430,共3页
目的研究内皮型NO合酶(eNOS)基因多态性与IgA肾病的关系。方法采用聚合酶链反应法对北方地区(汉族:北京,天津,河北)296例IgA患者、310例正常对照两组人群的eNOS基因第4内含子的可变串联重复序列多态性(VNTR)4a/b多态性进行基因型分析,... 目的研究内皮型NO合酶(eNOS)基因多态性与IgA肾病的关系。方法采用聚合酶链反应法对北方地区(汉族:北京,天津,河北)296例IgA患者、310例正常对照两组人群的eNOS基因第4内含子的可变串联重复序列多态性(VNTR)4a/b多态性进行基因型分析,比较两组间基因频率、等位基因频率分布有无统计学差异。结果两组患者的eNOS基因的可变串联复序列表现为eNOS4a/4a,eNOS4b/4b,eNOS4a/4b3种基因型。IgA肾病患者组和正常对照组之间的eNOS基因4a/b的基因型和等位基因频率无显著性差异。结论eNOS基因内含子4VNTR多态性与IgA肾病血管病变的发生无明显关联。该多态性在IgA肾病遗传因素中的地位尚难以确定,其参与IgA肾病微血管病变的作用可能存在种族或地域异质性。 展开更多
关键词 IGA肾病 内皮型一氧化氮合酶 多态现象(遗传学)
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三种不同方法固定的石蜡切片中RNA的分析 被引量:4
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作者 吕杨 陈香美 +5 位作者 尹忠 张雪光 王兆霞 冯哲 洪权 师锁柱 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期247-251,共5页
研究在 10 %中性福尔马林、丙酮、甲醇 氯仿 冰醋酸 3种方法固定的石蜡切片中提取RNA的质量和数量 .取 2 5 0g体重的Wistar大鼠的肾脏 ,分别采用 10 %中性福尔马林、丙酮、甲醇 氯仿 冰醋酸 3种方法固定 ,石蜡包埋 ,H E染色 ;采用RN... 研究在 10 %中性福尔马林、丙酮、甲醇 氯仿 冰醋酸 3种方法固定的石蜡切片中提取RNA的质量和数量 .取 2 5 0g体重的Wistar大鼠的肾脏 ,分别采用 10 %中性福尔马林、丙酮、甲醇 氯仿 冰醋酸 3种方法固定 ,石蜡包埋 ,H E染色 ;采用RNA裂解液、TRIZOL试剂 2种方法提取切片RNA ,逆转录为cDNA ,采用普通PCR和SYBRGREEN 1定量PCR分析RNA质量和数量 .结果表明 ,3种固定方法都可保持组织良好的结构和形态 ;采用 2种提取方法 ,均可经RT PCR扩增出 180bp大鼠磷酸甘油醛脱氢酶 (G3PDH)、5 6 5bpβ肌动蛋白 (β actin)、10 0bp纤溶酶系活化剂抑制物 1(PAI 1) ;但采用RNA裂解液时 ,比TRIZOL试剂可提取更多的RNA . 展开更多
关键词 固定 石蜡切片 RNA 定量PCR
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北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人代谢综合征患病率调查及危险因素分析 被引量:5
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作者 胡海鹰 赵砚池 +8 位作者 戴勤芳 周文利 王丽 陈洁 孙雪峰 林淑芃 席春生 乔晞 刘航 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第4期334-335,共2页
目的调查北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人代谢综合征(MS)的患病率,并分析其危险因素。方法采用流行病学现场调查和实验室检测相结合的方法,横断面分析196例自我评价健康的中、老年人MS的患病率和危险因素。结果196例中、老年人M... 目的调查北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人代谢综合征(MS)的患病率,并分析其危险因素。方法采用流行病学现场调查和实验室检测相结合的方法,横断面分析196例自我评价健康的中、老年人MS的患病率和危险因素。结果196例中、老年人MS总患病率为16.3%,中年组MS患病率为11.6%,老年组MS患病率为20.0%;196例中、老年人MS的发生与年龄、体质指数相关(P<0.01),而男性仅与体质指数相关(P<0.05),与年龄无关(P>0.05)。结论北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人MS的患病率较高,其危险因素为年龄与体质指数,男性MS防治的重点应放在40岁前。 展开更多
关键词 代谢综合征 患病率 危险因素 自我评价健康
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慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型的诱导 被引量:12
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作者 任文英 陈香美 +4 位作者 邱全瑛 陈扬荣 王新高 师锁柱 王兆霞 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第4期215-220,i001,共7页
目的 诱导慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型。方法 选用 (DBA 2×C57BL 6J)F1小鼠 ,通过尾静脉注射其母鼠DBA 2淋巴细胞诱导模型 ,观察 12周。结果 F1小鼠注射母鼠淋巴细胞后 2周产生自身抗体 ,出现蛋白尿 ,4周血脂、血肌酐、... 目的 诱导慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型。方法 选用 (DBA 2×C57BL 6J)F1小鼠 ,通过尾静脉注射其母鼠DBA 2淋巴细胞诱导模型 ,观察 12周。结果 F1小鼠注射母鼠淋巴细胞后 2周产生自身抗体 ,出现蛋白尿 ,4周血脂、血肌酐、尿素氮轻度升高 ,肾脏病理仅有系膜细胞轻度增生 ,未见间质损害。 8周血生化指标明显改变 ,肾脏病理示肾小球系膜细胞中度增生 ,间质炎细胞浸润和肾小管大量蛋白管型 ,10~ 12周各项观察指标改变明显 ,病理出现局灶或弥漫肾小球硬化 ,免疫荧光示IgG、IgM、C3沿毛细血管壁及系膜区沉积。结论 慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型类似人类狼疮性肾炎 。 展开更多
关键词 慢性移植物抗宿主病 动物模型 狼疮性肾炎 狼疮样小鼠 医学实验
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阿托伐他汀对老年慢性阻塞性肺病大鼠心肌和血管损伤的影响 被引量:5
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作者 胡亦新 范利 +6 位作者 崔华 潘秀颉 师锁柱 智光 李亚娟 朱茂祥 杨陟华 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期351-354,共4页
目的观察慢性阻塞性肺病(COPD)对老年大鼠心肌、血管的氧化应激损伤作用及阿托伐他汀干预的影响。方法 18只22月龄SD大鼠随机分为空白对照组、COPD组、阿托伐他汀组[5mg/(kg·d)],每组6只。COPD组和阿托伐他汀组给予被动吸烟和气管... 目的观察慢性阻塞性肺病(COPD)对老年大鼠心肌、血管的氧化应激损伤作用及阿托伐他汀干预的影响。方法 18只22月龄SD大鼠随机分为空白对照组、COPD组、阿托伐他汀组[5mg/(kg·d)],每组6只。COPD组和阿托伐他汀组给予被动吸烟和气管内注射脂多糖。6周后,各组大鼠行心脏超声心动图检查,光镜下观察心肌组织学,采用比色法检测大鼠心肌、主动脉丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫组织化学法检测大鼠心肌、主动脉8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。结果与空白对照组比较,COPD组、阿托伐他汀组心肌组织HE染色无明显病理改变;COPD组、阿托伐他汀组主动脉管壁平滑肌细胞轻度增生。与空白对照组比较,COPD组、阿托伐他汀组大鼠心肌、主动脉8-OHdG表达明显增高(P<0.01),但阿托伐他汀组心肌、主动脉8-OHdG表达较COPD组明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,COPD组、阿托伐他汀组大鼠心肌、主动脉丙二醛含量均明显升高,SOD活性明显下降(P<0.05);与COPD组比较,阿托伐他汀组大鼠心肌、主动脉丙二醛含量明显降低,SOD活性明显升高(P<0.05)。结论 COPD可造成老年大鼠心肌、主动脉的氧化应激损伤,阿托伐他汀具有改善作用。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 氧化性应激 心肌 超氧化物歧化酶 危险因素 阿托伐他汀
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激光微切割与定量PCR技术分析肾脏病理切片RNA 被引量:2
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作者 吕杨 尹忠 +4 位作者 王兆霞 师锁柱 洪权 张雪光 陈香美 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期695-699,共5页
采用激光微切割与定量PCR技术,分析使用不同提取方法从不同固定方法固定的病理切片中提取的RNA.用70%乙醇、丙酮、甲醇、4%多聚甲醛固定肾脏冰冻切片,使用激光微切割技术切取肾小球,用硫氰酸胍方法(guanidinethiocyanatemethods,GTC)和T... 采用激光微切割与定量PCR技术,分析使用不同提取方法从不同固定方法固定的病理切片中提取的RNA.用70%乙醇、丙酮、甲醇、4%多聚甲醛固定肾脏冰冻切片,使用激光微切割技术切取肾小球,用硫氰酸胍方法(guanidinethiocyanatemethods,GTC)和Trizol试剂方法提取RNA,使用Taqman定量PCR方法分析比较各组RNA的量;选取丙酮固定的石蜡切片,使用激光微切割技术切取肾小球,采用RNA裂解液提取RNA,使用Taqman定量PCR方法,比较石蜡切片和冰冻切片中RNA含量.结果显示:提取沉淀性固定剂如乙醇、丙酮、甲醇固定的冰冻切片的RNA时,2种提取方法和3种固定方法对RNA含量的影响都无明显差异;但在提取4%多聚甲醛固定冰冻切片时,使用Trizol提取RNA含量明显高于使用GTC方法,且其含量与沉淀性固定剂固定的切片RNA含量无明显差异.石蜡切片中经激光微切割肾小球的RNA含量与冰冻切片经激光微切割肾小球的RNA含量无明显差异.结果提示:切片的固定方法和RNA的提取方法是影响切片RNA提取量的主要原因. 展开更多
关键词 激光微切割 定量PCR RNA 冰冻切片 石蜡切片
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利用PCR方法获得shRNA抑制内外源性基因的表达 被引量:2
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作者 洪权 吴镝 +3 位作者 陈香美 冯哲 孙学峰 张雪光 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期800-803,共4页
目的探讨PCR法获得的shRNA对外源性基因和内源性基因表达的抑制效果。方法选择绿色荧光蛋白(GFP)和大鼠肾脏系膜细胞高丰度表达的纤维连接蛋白(FN)分别作为外源性和内源性基因的靶基因,设计特异性引物,利用PCR扩增获得shGFPRNA和shFNRN... 目的探讨PCR法获得的shRNA对外源性基因和内源性基因表达的抑制效果。方法选择绿色荧光蛋白(GFP)和大鼠肾脏系膜细胞高丰度表达的纤维连接蛋白(FN)分别作为外源性和内源性基因的靶基因,设计特异性引物,利用PCR扩增获得shGFPRNA和shFNRNA。前者与pEGFP质粒共转染至293T细胞,48h后进行激光共聚焦检测细胞表达GFP阳性率;后者转染至大鼠系膜细胞(RMC)中,48h后提取总RNA逆转录成cDNA,经realtimeRTPCR检测FN的mRNA表达水平,提取细胞总蛋白进行Westernblot检测FN蛋白表达水平。结果PCR获得的shGFPRNA产物能有效抑制外源性基因GFP的表达,抑制效率可达70%±3.2%;shRNA转染组内源性基因FN的表达水平明显下降,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论PCR方法可快速简单、廉价地获得shRNA,对内源性或外源性基因进行特异性抑制。 展开更多
关键词 RNAi 小分子干扰 聚合酶链反应 纤连蛋白类
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外源性人TIMP-1基因在转基因小鼠染色体上的整合及定位 被引量:2
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作者 朱晗玉 陈香美 +2 位作者 马润林 张冬芬 任建功 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期37-42,共6页
为探讨外源基因人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(human tissue inhibitor of metalloproteinase-1,hTIMP-1)基因在转基因小鼠家系染色体上的整合和精确定位,应用Southern印迹检测外源基因在染色体上整合的位点及拷贝数,结果表明,外... 为探讨外源基因人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(human tissue inhibitor of metalloproteinase-1,hTIMP-1)基因在转基因小鼠家系染色体上的整合和精确定位,应用Southern印迹检测外源基因在染色体上整合的位点及拷贝数,结果表明,外源基因是以单拷贝、单位点形式整合;应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测F4~F20代转基因小鼠中外源基因的整合.结果证明,该家系转基因小鼠自F4代起是纯合子,外源基因整合在17号染色体E区;反向PCR法(Inverse PCR,IPCR)克隆出约3.8kb外源基因整合位点处的侧翼序列.分析表明,外源基因整合在17号染色体E1.3区,ALK(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因第23个内含子区域、结果提示,获得的转基因小鼠为纯系,外源基因hTIMP-1已稳定整合在转基因小鼠染色体上,并能遗传给后代. 展开更多
关键词 转基因动物模型 基质金属蛋白酶组织抑制物-1 荧光原位杂交 反向PCR
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人尿酸转运蛋白基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 洪权 吴镝 +1 位作者 陈香美 侯剀 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期623-625,629,共4页
目的获得编码人尿酸转运蛋白(humanuricacidtransporter,hUAT)的全长基因。方法从人肾小管上皮细胞株(HK-2)中提取总RNA,根据Genbank中hUAT基因序列设计特异性引物,然后通过RT-PCR法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pEGFP-C1连接... 目的获得编码人尿酸转运蛋白(humanuricacidtransporter,hUAT)的全长基因。方法从人肾小管上皮细胞株(HK-2)中提取总RNA,根据Genbank中hUAT基因序列设计特异性引物,然后通过RT-PCR法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pEGFP-C1连接,经酶切及序列分析鉴定。结果成功扩增出980bp的hUAT全长基因,克隆到pEGFP-C1载体后酶切分析结果与预期一致,序列分析结果与Genbank上公布的hUAT序列完全一致。结论成功克隆出hUAT基因,序列分析结果完全正确,为对该基因进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 尿酸转运蛋白 逆转录-聚合酶链反应 克隆 序列分析
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