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耳蜗α_(1D) L-型电压门控钙通道剪切异构体的克隆和体外表达研究
被引量:
1
1
作者
申卫东
韩东一
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007年第2期192-197,共6页
目的克隆大鼠耳蜗毛细胞电压门控钙通道α1D剪切异构体并在体外表达。方法以耳蜗基底膜中组织总RNA为模板,利用长距离RT-PCR克隆耳蜗毛细胞表达的电压门控钙通道α1D剪切异构体,并利用异源表达系统在哺乳动物细胞系进行表达。结果克隆...
目的克隆大鼠耳蜗毛细胞电压门控钙通道α1D剪切异构体并在体外表达。方法以耳蜗基底膜中组织总RNA为模板,利用长距离RT-PCR克隆耳蜗毛细胞表达的电压门控钙通道α1D剪切异构体,并利用异源表达系统在哺乳动物细胞系进行表达。结果克隆的耳蜗毛细胞表达的α1D剪切异构体全长cDNA长达6.2kb,构建了哺乳动物表达载体,建立了稳定表达该剪切异构体的细胞系。结论内耳毛细胞表达组织特异性的α1D剪切异构体,该异构体在外源表达系统中的表达为今后研究耳蜗α1DL-型钙通道蛋白的电生理和药理特性奠定了基础。
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关键词
电压门控钙通道
耳蜗
剪切异构体
克隆
异源表达系统
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职称材料
大鼠内耳表达蛋白质组的2-DE分离和初步鉴定
被引量:
3
2
作者
申卫东
韩东一
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007年第1期85-88,共4页
目的通过制备、分离和鉴定正常情况下内耳表达的蛋白质,了解内耳的蛋白质组学特征。方法本研究以正常大鼠内耳组织为起始材料,通过2-DE分离内耳表达的蛋白质组,利用MALDI-TOF质谱仪对分离的蛋白质进行分析和鉴定。结果从20只新生大鼠内...
目的通过制备、分离和鉴定正常情况下内耳表达的蛋白质,了解内耳的蛋白质组学特征。方法本研究以正常大鼠内耳组织为起始材料,通过2-DE分离内耳表达的蛋白质组,利用MALDI-TOF质谱仪对分离的蛋白质进行分析和鉴定。结果从20只新生大鼠内耳组织提取到800μg蛋白质,在18cm×20cm的2-DE胶上可分离到300多个蛋白质斑点,质谱仪鉴定提示这些蛋白质分别属于细胞结构、细胞分裂、代谢相关、细胞信号传导、细胞因子相关蛋白质及未知蛋白质。结论本研究建立了大鼠内耳蛋白质组的分离和提取的方法,初步构建内耳2-DE参考图谱,并对其中的部分蛋白质进行了鉴定和分类,该图谱有助于内耳研究,尤其是不同状态下如疾病时内耳蛋白质表达变化的研究。
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关键词
大鼠
内耳
双向凝胶电泳
蛋白质组学
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职称材料
应用肉毒毒素A治疗腭肌阵挛性耳鸣临床分析
被引量:
7
3
作者
刘军
王洪田
+5 位作者
韩冰
孙勍
王国建
武文明
韩东一
杨伟炎
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
2006年第3期190-192,T0001,共4页
目的探讨肉毒毒素A对腭肌阵挛源性耳鸣的治疗作用。方法在鼻内窥镜下,将20U肉毒毒素A注射到4例腭肌阵挛性耳鸣患者患侧腭部肌肉内(腭帆张肌、腭帆提肌等),观察患者耳鸣的变化以及是否有并发症出现。同时回顾相关文献,对该病的病因、诊...
目的探讨肉毒毒素A对腭肌阵挛源性耳鸣的治疗作用。方法在鼻内窥镜下,将20U肉毒毒素A注射到4例腭肌阵挛性耳鸣患者患侧腭部肌肉内(腭帆张肌、腭帆提肌等),观察患者耳鸣的变化以及是否有并发症出现。同时回顾相关文献,对该病的病因、诊断及治疗加以分析。结果用药后第三天,患者腭部肌肉阵挛和耳鸣均消失,疗效持续约3个月。耳鸣消失的同时出现轻度鼻咽部返流或发声困难,约一周后逐渐消失。结论阵挛的腭部肌肉内注射肉毒毒素A是治疗腭肌阵挛性耳鸣的有效方法。
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关键词
肉毒毒素A
肌阵挛
耳鸣
腭
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职称材料
豚鼠耳蜗Corti器外隧道的结构
被引量:
2
4
作者
孙建和
胡吟燕
翟所强
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
2008年第1期60-62,共3页
目的观察豚鼠耳蜗Corti器外隧道的解剖特征。方法健康杂色豚鼠11只,共22耳,借助火棉胶切片(5只10耳)和扫描电镜(6只12耳)观察和分析豚鼠耳蜗Corti器外隧道的解剖。结果豚鼠耳蜗Corti器外隧道的内侧壁在耳蜗基底回和第一回由第三排外毛...
目的观察豚鼠耳蜗Corti器外隧道的解剖特征。方法健康杂色豚鼠11只,共22耳,借助火棉胶切片(5只10耳)和扫描电镜(6只12耳)观察和分析豚鼠耳蜗Corti器外隧道的解剖。结果豚鼠耳蜗Corti器外隧道的内侧壁在耳蜗基底回和第一回由第三排外毛细胞和Deiter细胞的指状突起构成,外侧壁和顶壁由Hensen细胞构成。自耳蜗基底回逐渐向顶回,Deiter细胞的指状突起逐渐移向外侧,形成外隧道的外侧壁和顶壁。外隧道的内侧壁由第三排外毛细胞构成,Deiter细胞指突移向Hensen细胞构成外隧道的外侧壁和顶壁,外隧道腔隙逐渐缩小。第三、四回的外隧道完全被Deiter细胞所充填,Deiter细胞指突和Hensen细胞密切接触。结论豚鼠耳蜗Corti器外隧道的这种结构特征在研究Corti器的微细结构方面增加了新的认识。
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关键词
豚鼠耳蜗
CORTI器
外隧道
火棉胶切片
扫描电镜
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职称材料
光学成像甘氨酸对蜗核和前庭核神经元兴奋的抑制作用
5
作者
杨仕明
于宁
+3 位作者
杨伟炎
顾瑞
韩东一
山下敏夫
《中华耳科学杂志》
CSCD
2003年第1期44-47,共4页
目的 从神经细胞群的水平研究甘氨酸是否对蜗核(cochlear nucleus,CN)与前庭核(vestibular nucleus,VN)神经元核团的兴奋起抑制作用以及其作用方式。方法 从新生小鼠(1-3天)制备活体(in vitro)脑干组织切片,并用电压敏感染料(voltage-se...
目的 从神经细胞群的水平研究甘氨酸是否对蜗核(cochlear nucleus,CN)与前庭核(vestibular nucleus,VN)神经元核团的兴奋起抑制作用以及其作用方式。方法 从新生小鼠(1-3天)制备活体(in vitro)脑干组织切片,并用电压敏感染料(voltage-sensitive dye)进行染色,采用多位点光学记录系统(optical imaging)观察电刺激位听神经(第8颅神经,nⅧth)后传入兴奋的传导。结果 光学成像显示电刺激nⅧth后兴奋传导至脑干的CN核团和VN核团,并且光学方法可同步记录256个记录单元(elements)中神经兴奋传导的二维动态过程(n=35)。用甘氨酸受体桔抗剂-马钱子碱(50μM)浸泡组织切片后,在CN和VN中的光学信号与脑片在标准人工脑脊液中相比较有明显的增强(n=10)。马钱子碱对峰样快反应信号与慢反应信号的增强效应不同,在CN和VN的不同核团之间也有差异。在CN核团,快反应信号与慢反应信号增强幅度分别为154±34%(n=23,elements)和271±91%(n=23,elements),马钱子碱的增强效应与标准ACSF相比有显著性统计学差异(P<0.05)。在VN核团,慢反应信号增强幅度为149±56%(n=17,elements),也有显著性统计学差异(P<0.05)。但是,在VN核团,快反应信号增强幅度仅为102±14%(n=17,elements),与对照组相比较无显著性统计学差异(P>0.05)。另外,?
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关键词
光学记录
电压敏感染料
蜗核
前庭核
甘氨酸
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职称材料
题名
耳蜗α_(1D) L-型电压门控钙通道剪切异构体的克隆和体外表达研究
被引量:
1
1
作者
申卫东
韩东一
机构
解放军总医院耳鼻咽喉-头颈外科耳鼻咽喉科研究所
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007年第2期192-197,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:30271398)
文摘
目的克隆大鼠耳蜗毛细胞电压门控钙通道α1D剪切异构体并在体外表达。方法以耳蜗基底膜中组织总RNA为模板,利用长距离RT-PCR克隆耳蜗毛细胞表达的电压门控钙通道α1D剪切异构体,并利用异源表达系统在哺乳动物细胞系进行表达。结果克隆的耳蜗毛细胞表达的α1D剪切异构体全长cDNA长达6.2kb,构建了哺乳动物表达载体,建立了稳定表达该剪切异构体的细胞系。结论内耳毛细胞表达组织特异性的α1D剪切异构体,该异构体在外源表达系统中的表达为今后研究耳蜗α1DL-型钙通道蛋白的电生理和药理特性奠定了基础。
关键词
电压门控钙通道
耳蜗
剪切异构体
克隆
异源表达系统
Keywords
Voltage-gated Ca^2+ channel
Cochlea
Splicing isoform
Clone
Heterogenous expression system
分类号
R339.16 [医药卫生—人体生理学]
R349.64 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
大鼠内耳表达蛋白质组的2-DE分离和初步鉴定
被引量:
3
2
作者
申卫东
韩东一
机构
解放军总医院
耳
鼻
咽喉
-
头颈
外科
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007年第1期85-88,共4页
文摘
目的通过制备、分离和鉴定正常情况下内耳表达的蛋白质,了解内耳的蛋白质组学特征。方法本研究以正常大鼠内耳组织为起始材料,通过2-DE分离内耳表达的蛋白质组,利用MALDI-TOF质谱仪对分离的蛋白质进行分析和鉴定。结果从20只新生大鼠内耳组织提取到800μg蛋白质,在18cm×20cm的2-DE胶上可分离到300多个蛋白质斑点,质谱仪鉴定提示这些蛋白质分别属于细胞结构、细胞分裂、代谢相关、细胞信号传导、细胞因子相关蛋白质及未知蛋白质。结论本研究建立了大鼠内耳蛋白质组的分离和提取的方法,初步构建内耳2-DE参考图谱,并对其中的部分蛋白质进行了鉴定和分类,该图谱有助于内耳研究,尤其是不同状态下如疾病时内耳蛋白质表达变化的研究。
关键词
大鼠
内耳
双向凝胶电泳
蛋白质组学
Keywords
Rat
Inner ear
, Two direction eleetrophoresis
Proteomies.
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
R343.3 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
应用肉毒毒素A治疗腭肌阵挛性耳鸣临床分析
被引量:
7
3
作者
刘军
王洪田
韩冰
孙勍
王国建
武文明
韩东一
杨伟炎
机构
解放军总医院
耳
鼻
咽喉
-
头颈
外科
出处
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
2006年第3期190-192,T0001,共4页
文摘
目的探讨肉毒毒素A对腭肌阵挛源性耳鸣的治疗作用。方法在鼻内窥镜下,将20U肉毒毒素A注射到4例腭肌阵挛性耳鸣患者患侧腭部肌肉内(腭帆张肌、腭帆提肌等),观察患者耳鸣的变化以及是否有并发症出现。同时回顾相关文献,对该病的病因、诊断及治疗加以分析。结果用药后第三天,患者腭部肌肉阵挛和耳鸣均消失,疗效持续约3个月。耳鸣消失的同时出现轻度鼻咽部返流或发声困难,约一周后逐渐消失。结论阵挛的腭部肌肉内注射肉毒毒素A是治疗腭肌阵挛性耳鸣的有效方法。
关键词
肉毒毒素A
肌阵挛
耳鸣
腭
Keywords
Botulinum toxin A
Myoclonus
Tinnitus
Palatal
分类号
R764.45 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
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职称材料
题名
豚鼠耳蜗Corti器外隧道的结构
被引量:
2
4
作者
孙建和
胡吟燕
翟所强
机构
解放军总医院
耳
鼻
咽喉
-
头颈
外科
出处
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
2008年第1期60-62,共3页
文摘
目的观察豚鼠耳蜗Corti器外隧道的解剖特征。方法健康杂色豚鼠11只,共22耳,借助火棉胶切片(5只10耳)和扫描电镜(6只12耳)观察和分析豚鼠耳蜗Corti器外隧道的解剖。结果豚鼠耳蜗Corti器外隧道的内侧壁在耳蜗基底回和第一回由第三排外毛细胞和Deiter细胞的指状突起构成,外侧壁和顶壁由Hensen细胞构成。自耳蜗基底回逐渐向顶回,Deiter细胞的指状突起逐渐移向外侧,形成外隧道的外侧壁和顶壁。外隧道的内侧壁由第三排外毛细胞构成,Deiter细胞指突移向Hensen细胞构成外隧道的外侧壁和顶壁,外隧道腔隙逐渐缩小。第三、四回的外隧道完全被Deiter细胞所充填,Deiter细胞指突和Hensen细胞密切接触。结论豚鼠耳蜗Corti器外隧道的这种结构特征在研究Corti器的微细结构方面增加了新的认识。
关键词
豚鼠耳蜗
CORTI器
外隧道
火棉胶切片
扫描电镜
Keywords
Guinea pig cochlea
Corti's organ
Outer tunnel
Celloidin section
SEM
分类号
R339.16 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
光学成像甘氨酸对蜗核和前庭核神经元兴奋的抑制作用
5
作者
杨仕明
于宁
杨伟炎
顾瑞
韩东一
山下敏夫
机构
解放军总医院
耳
鼻
咽喉
-
头颈
外科
日本关西医
科
大学
耳
鼻
咽喉
科
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2003年第1期44-47,共4页
基金
国家自然科学基金(30000189)
军队"十五"科研基金(01Q050)
解放军总医院"中青年学科带头人工程"课题基金
文摘
目的 从神经细胞群的水平研究甘氨酸是否对蜗核(cochlear nucleus,CN)与前庭核(vestibular nucleus,VN)神经元核团的兴奋起抑制作用以及其作用方式。方法 从新生小鼠(1-3天)制备活体(in vitro)脑干组织切片,并用电压敏感染料(voltage-sensitive dye)进行染色,采用多位点光学记录系统(optical imaging)观察电刺激位听神经(第8颅神经,nⅧth)后传入兴奋的传导。结果 光学成像显示电刺激nⅧth后兴奋传导至脑干的CN核团和VN核团,并且光学方法可同步记录256个记录单元(elements)中神经兴奋传导的二维动态过程(n=35)。用甘氨酸受体桔抗剂-马钱子碱(50μM)浸泡组织切片后,在CN和VN中的光学信号与脑片在标准人工脑脊液中相比较有明显的增强(n=10)。马钱子碱对峰样快反应信号与慢反应信号的增强效应不同,在CN和VN的不同核团之间也有差异。在CN核团,快反应信号与慢反应信号增强幅度分别为154±34%(n=23,elements)和271±91%(n=23,elements),马钱子碱的增强效应与标准ACSF相比有显著性统计学差异(P<0.05)。在VN核团,慢反应信号增强幅度为149±56%(n=17,elements),也有显著性统计学差异(P<0.05)。但是,在VN核团,快反应信号增强幅度仅为102±14%(n=17,elements),与对照组相比较无显著性统计学差异(P>0.05)。另外,?
关键词
光学记录
电压敏感染料
蜗核
前庭核
甘氨酸
Keywords
optical recording
voltage - sensitive dye
cochlear nucleus
vestibular nucleus
glycine
分类号
R76 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
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1
耳蜗α_(1D) L-型电压门控钙通道剪切异构体的克隆和体外表达研究
申卫东
韩东一
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007
1
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职称材料
2
大鼠内耳表达蛋白质组的2-DE分离和初步鉴定
申卫东
韩东一
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007
3
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职称材料
3
应用肉毒毒素A治疗腭肌阵挛性耳鸣临床分析
刘军
王洪田
韩冰
孙勍
王国建
武文明
韩东一
杨伟炎
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
2006
7
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职称材料
4
豚鼠耳蜗Corti器外隧道的结构
孙建和
胡吟燕
翟所强
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
2008
2
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职称材料
5
光学成像甘氨酸对蜗核和前庭核神经元兴奋的抑制作用
杨仕明
于宁
杨伟炎
顾瑞
韩东一
山下敏夫
《中华耳科学杂志》
CSCD
2003
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