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冷冻猪肝细胞在生物型人工肝系统中的生存状态研究 被引量:3
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作者 周霖 薛毅珑 +4 位作者 楼敏 田磊 李雁凌 张佐云 杨永平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1247-1249,共3页
目的 研究冷冻复温后猪肝细胞在生物型人工肝支持系统(BALSS)中的生存状态。方法 用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞;将1×10 1 0 猪肝细胞冷冻保存在-196℃液氮中;1个月后复温,将等量的冷冻和新鲜猪肝细胞分别培养在BA... 目的 研究冷冻复温后猪肝细胞在生物型人工肝支持系统(BALSS)中的生存状态。方法 用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞;将1×10 1 0 猪肝细胞冷冻保存在-196℃液氮中;1个月后复温,将等量的冷冻和新鲜猪肝细胞分别培养在BALSS中,比较其形态、存活率和白蛋白、尿素、葡萄糖合成功能及对利多卡因的转化功能。结果 冷冻保存的猪肝细胞,复温后其存活率较高;在培养于BALSS时其生化功能、利多卡因转化功能及超微结构与新鲜肝细胞类似。结论 用该冻存方法保存的猪肝细胞可试用于BALSS系统。 展开更多
关键词 猪肝细胞 低温保存 生物型人工肝
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脊髓NO通路参与APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞蛛网膜下隙移植镇痛机理 被引量:1
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作者 徐龙河 薛毅珑 +2 位作者 罗芸 郭水龙 张宏 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期283-285,共3页
目的 通过观察APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (BCCs)移植对坐骨神经慢性挤压伤(CCI)大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)的影响 ,探讨脊髓NO通路是否参与APA微囊化BCCs蛛网膜下隙移植镇痛机理。方法 SD大鼠分为四组 ,每组 5只 ,即对照组... 目的 通过观察APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (BCCs)移植对坐骨神经慢性挤压伤(CCI)大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)的影响 ,探讨脊髓NO通路是否参与APA微囊化BCCs蛛网膜下隙移植镇痛机理。方法 SD大鼠分为四组 ,每组 5只 ,即对照组 (C组 ) ,正常大鼠 ;CCI组 ,右侧坐骨神经结扎 ;APA组 ,CCI模型后 1周 ,蛛网膜下隙移植 5 0 0~ 6 0 0个APA空囊 ;APA BCCs组 ,CCI模型后 1周蛛网膜下隙移植 5× 10 6个APA微囊化BCCs。测定各组移植后 1周的感觉异常和痛觉过敏阈值 ,感觉异常以VonFrey细丝触诱发痛阈值 (g)表示 ,痛觉过敏阈值用CO2 激光刺激痛阈值(ms)表示。动物处死后取脊髓冰冻切片 ,按照标准免疫组化法检测各组脊髓中nNOS的表达变化。结果 CCI组、APA组脊髓中nNOS活性较C组明显升高 (P <0 0 1) ,但CCI组和APA组间无显著差异 (P >0 0 5 ) ;APA BCCs组结扎侧触诱发痛阈值和CO2 痛阈值高于CCI组和APA组结扎侧 (P <0 0 1) ,同时脊髓中nNOS活性较CCI组和APA组明显降低 (P <0 0 1) ,与C组基本相同 (P >0 0 5 )。结论 CCI大鼠脊髓nNOS表达增加 ,APA微囊化BCCs蛛网膜下隙移植缓解CCI大鼠的触诱发痛和痛觉过敏 ,同时降低CCI大鼠脊髓nNOS表达 。 展开更多
关键词 脊髓NO通路 APA微囊化 牛肾上腺嗜铬细胞 蛛网膜下隙移植 镇痛 神经元型一氧化氮合酶 坐骨神经慢性挤压伤
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分泌人内皮抑素基因工程细胞系的建立 被引量:1
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作者 赵卉 潘静坤 +1 位作者 罗芸 薛毅珑 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第5期422-424,共3页
目的建立稳定的基因工程细胞系。方法将含有白细胞介素-2(IL-2)分泌肽的人endostatin全长cDNA插入真核表达载体pSNA2.0,产生重组质粒pSNA2.0/hEndostatin,利用阳离子脂质体介导将其转染到人HEK293细胞中,G418筛选后得到阳性克隆hED/293... 目的建立稳定的基因工程细胞系。方法将含有白细胞介素-2(IL-2)分泌肽的人endostatin全长cDNA插入真核表达载体pSNA2.0,产生重组质粒pSNA2.0/hEndostatin,利用阳离子脂质体介导将其转染到人HEK293细胞中,G418筛选后得到阳性克隆hED/293,采用Western-blot检测转染细胞上清中endostatin蛋白的表达。结果hED/293细胞株培养上清中有endosta-tin蛋白的表达,分子量为20000。结论重组pSNA2.0/hEndostatin真核表达载体构建正确,转染HEK293细胞后可有效的表达人endostatin蛋白,并能分泌到细胞外。 展开更多
关键词 内皮抑素 真核表达载体 人胚胎肾细胞HEK293 细胞系
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APA微囊低温保存中降温方法的建立 被引量:3
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作者 田磊 潘静坤 +2 位作者 高宇红 崔忻 薛毅珑 《中国康复理论与实践》 CSCD 2006年第6期487-488,共2页
目的探讨海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙(APA)微囊低温保存的降温方法。方法用静电法制作APA微囊,分别以程控降温法、冰箱梯度法或直接液氮法降温,最终将APA微囊保存于液氮中。复温后,在显微镜下观察APA微囊的破损情况,并用荧光标记的葡... 目的探讨海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙(APA)微囊低温保存的降温方法。方法用静电法制作APA微囊,分别以程控降温法、冰箱梯度法或直接液氮法降温,最终将APA微囊保存于液氮中。复温后,在显微镜下观察APA微囊的破损情况,并用荧光标记的葡聚糖检测APA微囊膜通透性的变化。结果程控降温组为微囊完好率(91.2±1.57)%、皱缩率(3.1±0.81)%、破损率(5.7±2.62)%;冰箱梯度组为微囊完好率(85.3±1.42)%、皱缩率(5.2±0.74)%、破损率(9.5±3.81)%;直接冻存组为微囊完好率(14.5±1.57)%、皱缩率(84.1±3.47)%、破损率(1.4±2.62)%。冻存复温后,各组完好的APA微囊膜通透性无改变。结论程控降温法可较好地低温保存APA微囊并维持其通透特性。 展开更多
关键词 海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙(APA)微囊 低温保存 膜通透性
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APA微囊化BCCs移植逆转神经性疼痛大鼠背根神经节Nav1.8 mRNA表达下调 被引量:1
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作者 徐龙河 薛毅珑 +2 位作者 罗芸 郭水龙 张宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期524-528,共5页
目的 观察APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (BCCs)移植对坐骨神经慢性挤压伤 (CCI)大鼠背根神经节 (DRG)Nav1 8mRNA表达的影响。方法 SD大鼠分为 4组 ,每组5只 ,即对照组 (C组 ) ,正常大鼠 ;CCI组 ,右侧坐骨神经结扎 ;APA组 ,CCI模型后 7d ... 目的 观察APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (BCCs)移植对坐骨神经慢性挤压伤 (CCI)大鼠背根神经节 (DRG)Nav1 8mRNA表达的影响。方法 SD大鼠分为 4组 ,每组5只 ,即对照组 (C组 ) ,正常大鼠 ;CCI组 ,右侧坐骨神经结扎 ;APA组 ,CCI模型后 7d ,蛛网膜下腔移植 5 0 0~ 6 0 0个APA空囊 ;APA BCCs组 ,CCI模型后 7d蛛网膜下腔移植 5× 10 6个APA微囊化BCCs。测定各组移植前和移植后 7d的触诱发痛阈值 (g)和CO2 激光刺激痛阈值 (ms)。移植后 7d行为学测定后取DRG冰冻切片 ,按照原位杂交法检测各组DRG中Nav1 8mRNA表达的变化。结果 CCI组和APA组大鼠L4和L5DRGNav1 8杂交信号较C组明显降低 (P <0 0 1) ,两组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。APA BCCs组扎侧触诱发痛阈值和CO2 痛阈值高于CCI组和APA组结扎侧 (P <0 0 1) ,同时DRG中Nav1 8杂交信号较CCI组和APA组明显升高 (P <0 0 1) ,于C组差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 APA微囊化BCCs蛛网膜下腔移植可使CCI大鼠DRG中表达量下降的Nav1 8mRNA恢复正常表达 ,APA微囊化BCCs蛛网膜下腔移植的镇痛作用和促进DRG中Nav1 展开更多
关键词 嗜铬细胞 微囊 异种移植 背根神经节 NAV1.8
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裸鼠皮下脑胶质瘤模型的复制与生长特性的观察
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作者 潘静坤 赵卉 +2 位作者 田磊 罗芸 薛毅珑 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第11期1019-1020,F0003,共3页
目的建立裸鼠皮下C6脑胶质瘤模型,了解其生长特性。方法将C6脑胶质细胞的培养悬液注射于裸鼠左侧腋下区皮下。观察接种区皮下肿瘤的生长状况,测量肿瘤直径并计算肿瘤体积,绘制肿瘤体积-时间生长曲线。HE染色和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免... 目的建立裸鼠皮下C6脑胶质瘤模型,了解其生长特性。方法将C6脑胶质细胞的培养悬液注射于裸鼠左侧腋下区皮下。观察接种区皮下肿瘤的生长状况,测量肿瘤直径并计算肿瘤体积,绘制肿瘤体积-时间生长曲线。HE染色和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色观察肿瘤细胞的生长及转移状况。结果瘤细胞接种后第7天,裸鼠腋下区开始出现肿瘤,并呈加速生长。20d后,皮下肿瘤呈快速的近指数生长。裸鼠生存期为22~48d。光镜下见瘤体边界清晰,瘤内血管丰富,存在大量GFAP阳性细胞。结论将体外培养的C6脑胶质瘤细胞植入裸鼠皮下,可建立重复性好的脑胶质瘤动物模型。 展开更多
关键词 动物模型 脑胶质瘤 皮下接种 裸鼠
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