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甲泼尼龙对大鼠烟雾吸入性急性肺损伤的治疗作用及其机制
1
作者 李虎明 陈旭昕 +4 位作者 李泳群 张春阳 张燕 陈韦 韩志海 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第7期890-896,共7页
目的观察不同剂量甲泼尼龙(MP)对大鼠烟雾吸入性急性肺损伤(SI-ALI)的治疗作用,探究水通道蛋白(AQPs)的表达变化及缓解肺损伤的相关机制。方法健康成年雄性SD大鼠共86只,分为对照组(n=6)、吸入性损伤组(SI组,n=20)、低MP组(吸入性损伤+0... 目的观察不同剂量甲泼尼龙(MP)对大鼠烟雾吸入性急性肺损伤(SI-ALI)的治疗作用,探究水通道蛋白(AQPs)的表达变化及缓解肺损伤的相关机制。方法健康成年雄性SD大鼠共86只,分为对照组(n=6)、吸入性损伤组(SI组,n=20)、低MP组(吸入性损伤+0.4 mg/kg MP,n=20)、中MP组(吸入性损伤+4 mg/kg MP,n=20)和高MP组(吸入性损伤+40 mg/kg MP,n=20)。建立烟雾吸入性肺损伤模型,观察各组大鼠的存活情况,于损伤后24 h收集肺组织,测定肺组织湿/干重比(W/D)、动脉血氧分压(PaO_(2))、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)浓度,HE染色评估肺损伤程度,实时定量PCR和Western blotting检测肺组织AQP1和AQP5 mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,SI组大鼠存活率明显降低(P<0.05);与SI组比较,中MP组、高MP组大鼠存活率均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,SI组大鼠PaO_(2)明显降低(P<0.05),肺组织W/D、肺损伤评分明显升高(P<0.05);与SI组比较,低、中和高MP组PaO_(2)均明显升高(P<0.05),中MP组和高MP组大鼠肺组织W/D、肺损伤评分明显降低(P<0.05)。ELISA法检测结果显示,与对照组比较,SI组大鼠血清TNF-α和IL-6浓度均明显升高(P<0.05);与SI组比较,中MP组和高MP组大鼠血清TNF-α和IL-6浓度均明显下降(P<0.05)。HE染色显示,SI组大鼠肺泡结构破坏严重;与SI组比较,中MP组、高MP组肺泡结构破坏减轻。实时定量PCR、Western blotting检测结果显示,与对照组比较,SI组大鼠肺组织AQP1和AQP5 mRNA、蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与SI组比较,低、中和高MP组大鼠肺组织AQP1和AQP5 mRNA、蛋白表达水平均明显增高(P<0.05)。结论烟雾吸入可导致大鼠急性肺损伤,下调肺组织AQP1和AQP5的表达。MP干预可缓解烟雾吸入所致的大鼠肺水肿及组织损伤,诱导AQP1和AQP5表达上调。 展开更多
关键词 急性肺损伤 烟雾吸入 水通道蛋白 甲泼尼龙 治疗
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基于网络药理学和体外实验探究石杉碱甲对急性肺损伤中肺泡上皮细胞的作用及保护机制
2
作者 石俊 唐佳佳 +4 位作者 张春阳 陈韦 齐曼 陈旭昕 韩志海 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1600-1609,共10页
基于网络药理学和体外实验,探讨石杉碱甲(huperzine A,Hup A)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中肺泡上皮细胞的作用及机制。首先从公共数据库查找Hup A、ALI的相关靶点,获取二者交集即为Hup A保护ALI的潜在靶点并进行富集分析;通... 基于网络药理学和体外实验,探讨石杉碱甲(huperzine A,Hup A)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中肺泡上皮细胞的作用及机制。首先从公共数据库查找Hup A、ALI的相关靶点,获取二者交集即为Hup A保护ALI的潜在靶点并进行富集分析;通过构建蛋白互作网络及“成分-靶点-通路”网络进而筛选Hup A保护ALI的核心靶点并进行分子对接验证;进一步采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)构建细胞模型加以Hup A预处理,分别检测细胞活性、白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平验证Hup A的保护作用,最后蛋白免疫印迹实验验证关键靶点的蛋白水平变化。网络药理学分析结果显示Hup A共有144个潜在治疗靶点,Hup A参与调节蛋白激酶活性、氧化应激、炎症反应等生物学过程和磷脂酰肌醇-3-激酶-丝苏氨酸蛋白激酶(phosphatidyl-inositol 3-kinase-serine-threonine kinase,PI3K-Akt)通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路等信号通路;分子对接结果显示Hup A与Akt1、Akt2和Mapk1(又称细胞外蛋白调节激酶(extracellular regulated protein kinases,Erk))均具有较好的结合活性;细胞实验显示Hup A可以改善LPS诱导的细胞活性下降(P<0.05),降低IL-6、MDA、p-Erk1/2/Erk1/2水平(P<0.05),提高SOD与p-Akt1/Akt1水平(P<0.05)。综上,Hup A可能通过调控Akt1和Mapk1保护肺泡上皮细胞进而缓解LPS诱导的ALI。 展开更多
关键词 石杉碱甲 急性肺损伤 AKT1 网络药理学 分子对接
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糖皮质激素减轻烟雾吸入性大鼠急性肺损伤后肺纤维化 被引量：6
3
作者 宋立成 韩志海 +3 位作者 李虎明 孟激光 陈旭昕 吴晶 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期31-37,共7页
目的探究早期应用不同时程甲泼尼龙(MP)对大鼠烟雾吸入性肺损伤后期纤维化的改善作用。方法 178只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(n=18)、单纯烟雾吸入组(smoke组,n=40)、烟雾吸入+MP1 d治疗组[smoke+MP(1D)组,n=40]、烟雾吸入+MP 3 d治... 目的探究早期应用不同时程甲泼尼龙(MP)对大鼠烟雾吸入性肺损伤后期纤维化的改善作用。方法 178只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(n=18)、单纯烟雾吸入组(smoke组,n=40)、烟雾吸入+MP1 d治疗组[smoke+MP(1D)组,n=40]、烟雾吸入+MP 3 d治疗组[smoke+MP(3D)组,n=40]、烟雾吸入+MP 7 d治疗组[smoke+MP(7D)组,n=40]。烟雾吸入大鼠在烟雾箱中烟雾暴露30 min以达到急性肺损伤标准,之后分别于烟雾吸入的1 d、1～3 d、1～7 d给予腹腔注射MP(每天4 mg/kg),计算大鼠28 d生存率;烟雾吸入后的第7、14、28天取大鼠肺组织行马松三色染色、天狼星红染色,并进行肺纤维化评分;通过实时荧光定量PCR测定大鼠肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达;通过蛋白质印迹法测定大鼠肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、结缔组织生长因子(CTGF)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、白细胞介素6(IL-6)的表达情况。结果 Smoke组大鼠烟雾吸入28 d生存率为47.50%,给予不同时程MP治疗后,生存率均提高至80%以上(P均<0.01)。马松三色染色及天狼星红染色结果显示smoke组大鼠肺纤维化程度加重,而smoke+MP(3D)组和smoke+MP(7D)组较smoke组和smoke+MP(1D)组纤维化程度改善,胶原沉积减轻(P<0.05或P<0.01)。烟雾吸入后smoke组和smoke+MP(1D)组大鼠肺组织中TGF-β1和α-SMA的mRNA表达水平逐步升高,28 d时smoke组和smoke+MP(1D)组高于smoke+MP(3D)和smoke+MP(7D)组(P<0.05或P<0.01)。烟雾吸入后28 d时smoke+MP(3D)组和smoke+MP(7D)组大鼠肺组织中MPO、CTGF、HMGB1、IL-6的表达水平低于smoke组和smoke+MP(1D)组(P<0.05,P<0.01)。但smoke+MP(3D)组和smoke+MP(7D)组上述指标差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论大鼠烟雾吸入后给予MP治疗可以提高其生存率,3 d或7 d的MP治疗可以改善大鼠28 d肺纤维化程度,但这两种治疗方案之间差异无统计学意义。 展开更多
关键词 烟 肺损伤 甲泼尼龙 肺纤维化
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血流感染细菌快速鉴定及药敏试验的方法学评价 被引量：5
4
作者 丁毅伟 吴思敏 韩志海 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期468-473,共6页
目的比较快速直接检测方法(简称快速法)与传统检测方法(简称传统法)对血培养阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验的一致性及准确性。方法采集2019-2020年解放军总医院第六医学中心门急诊及住院患者血流感染标本,置于血培养仪中培养,血培养... 目的比较快速直接检测方法(简称快速法)与传统检测方法(简称传统法)对血培养阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验的一致性及准确性。方法采集2019-2020年解放军总医院第六医学中心门急诊及住院患者血流感染标本,置于血培养仪中培养,血培养报警后收集血培养阳性标本,同时用快速法和传统法进行培养,培养后分别进行细菌鉴定和药敏试验,记录并比较两种方法鉴定细菌及药敏试验的一致性。结果共收集149例血培养阳性标本,传统法鉴定出革兰阳性球菌79株、革兰阴性杆菌70株,快速法与传统法鉴定相符的革兰阳性球菌75株、革兰阴性杆菌67株。两种方法鉴定的一致率为95.3%(142/149),鉴定革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌的一致率分别为94.9%(75/79)、95.7%(67/70)。传统法中,76株(96.2%)革兰阳性球菌和66株(94.3%)革兰阴性杆菌可有效鉴定到种,3株(3.8%)革兰阳性球菌和4株(5.7%)革兰阴性杆菌可有效鉴定到属;快速法中,52株(69.3%)革兰阳性球菌和63株(94.0%)革兰阴性杆菌可有效鉴定到种,20株(26.7%)革兰阳性球菌和3株(4.5%)革兰阴性杆菌可有效鉴定到属。根据药敏试验结果判断标准,革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌快速法与传统法药敏试验可接受标准符合率均≥90.0%,一般错误率均≤10.0%,严重错误率除复方新诺明外均≤3.0%,极严重错误率均≤1.5%。结论快速法可有效缩短鉴定和药敏试验的时间且鉴定结果准确,有助于临床医师明确诊断并及时调整治疗方案,迅速从经验性使用广谱抗菌药物转向靶向治疗,为患者提供更加有效的治疗方案。 展开更多
关键词 血流感染 快速鉴定 传统鉴定 药敏鉴定
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间充质干细胞对脂多糖刺激下肺微血管内皮细胞增殖及周期的影响 被引量：2
5
作者 陈旭昕 汪文婧 +3 位作者 胥颉 唐俭 孟激光 韩志海 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期1577-1580,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSC)对脂多糖(LPS)刺激下肺微血管内皮细胞(PVEC增殖及细胞周期的影响。方法实验分组:A组(正常PVEC);B组(PVEC+LPS),PVEC仅予LPS刺激;C组(PVEC/BM-MSC+LPS),将BM-MSC与PVEC共培养于Transwell体系过夜后予LP... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSC)对脂多糖(LPS)刺激下肺微血管内皮细胞(PVEC增殖及细胞周期的影响。方法实验分组:A组(正常PVEC);B组(PVEC+LPS),PVEC仅予LPS刺激;C组(PVEC/BM-MSC+LPS),将BM-MSC与PVEC共培养于Transwell体系过夜后予LPS刺激;D组(PVEC/BMMSC+PBS),同上BM-MSC与PVEC共培养后,用PBS替代LPS。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测PVEC活性、流式细胞仪测PVEC周期及qRT-PCR测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)及P27 mRNA水平。结果与A组相比,B组中PVEC增殖受抑,出现周期阻滞,且CyclinD1及CDK4受抑,P27上调(P <0.05),与BM-MSC共培养可逆转上述效应(P <0.05)。无LPS情况下,BM-MSC共培养对PVEC的增殖及细胞周期均有正性调控作用(P <0.05)。结论 BM-MSC对PVEC有保护作用,促进PVEC增殖、抵制LPS诱导的周期阻滞及调控细胞周期相关蛋白表达是可能的分子机制。 展开更多
关键词 急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合征 肺微血管内皮细胞 间充质干细胞 细胞周期
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血红素加氧酶-1修饰的骨髓间充质干细胞减轻脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞氧化应激 被引量：1
6
作者 陈旭昕 李虎明 +2 位作者 唐俭 孟激光 韩志海 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第18期2339-2343,共5页
目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(MSC-HO-1)对脂多糖(LPS)刺激下肺微血管内皮细胞(PVEC)氧化应激的影响。方法实验分组:A组(PVEC+LPS),PVEC仅予LPS刺激;B组(PVEC/MSC+LPS),PVEC细胞与MSC共培养于Transwell体系过夜... 目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(MSC-HO-1)对脂多糖(LPS)刺激下肺微血管内皮细胞(PVEC)氧化应激的影响。方法实验分组:A组(PVEC+LPS),PVEC仅予LPS刺激;B组(PVEC/MSC+LPS),PVEC细胞与MSC共培养于Transwell体系过夜后予LPS刺激;C组(PVEC/MSC-HO-1+LPS),同上PVEC与MSC-HO-1共培养后予LPS刺激;D组(正常PVEC)。采用流式细胞仪及活性氧检测试剂盒,测PVEC内活性氧(ROS)含量;采用比色法及相应商品化检测试剂盒,测PVEC内脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性;用Western blot检测各组PVEC内HO-1表达变化。结果与D组相比,A组受LPS刺激后,出现明显氧化应激(P<0.05);与MSC或MSC-HO-1共培养均可明显减轻氧化应激(P<0.05),但MSC-HO-1共培养减轻氧化应激程度更为显著(P<0.05)。Western blot结果显示与MSC-HO-1共培养可明显上调PVEC内HO-1蛋白表达。结论MSC-HO-1显著改善LPS诱导的PVEC氧化应激失衡,可能机制与上调PVEC内HO-1表达有关。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脂多糖 血红素加氧酶-1 氧化应激 肺微血管内皮细胞
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