结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果研究 被引量：9

1

作者 梁艳 吴雪琼 +5 位作者 张俊仙 阳幼荣 王兰 李洪敏 李忠明 史迎昌 《中国防痨杂志》 CAS 2007年第5期382-385,共4页

目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB240尾静脉注射BALB/c小鼠1个月后,将小鼠随机分成2组,第1组用利福平(RFP)、异烟肼(... 目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB240尾静脉注射BALB/c小鼠1个月后,将小鼠随机分成2组,第1组用利福平(RFP)、异烟肼(INH)治疗12周,第2组用RFP、INH和结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗(免疫5次)联合治疗12周;治疗结束后4和8周,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取质量、作菌落计数。结果治疗结束后4和8周,第2组小鼠体质量均超过第1组,但无显著性差异(P>0.05)。治疗结束后4周,第2组肺、脾脏指数(0.017,0.011)均略低于第1组(0.020,0.012)(P>0.05);治疗结束后8周,第2组肺、肝脏指数(0.021,0.047)均略低于第1组(0.022,0.048)(P>0.05);而第2组脾脏指数(0.008)显著低于第1组(0.012)(P<0.05)。治疗结束后4周,第2组有4例脾脏未见明显病变,第1组仅1例脾脏未见明显病变;治疗结束后8周,第2组有1例肺门淋巴结肿大,而第1组有3例;第2组有5例脾脏未见明显病变,第1组仅2例脾脏未见明显病变。治疗结束后4周,第2组肺菌落计数和脾菌落计数比第1组显著减少,分别减少70%和80%。结论DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病疗效高于单纯化疗。 展开更多

关键词 DNA疫苗 分枝杆菌 结核

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结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗与抗痨药物联合治疗小鼠结核病 被引量：3

2

作者 梁艳 吴雪琼 +9 位作者 李宁 张俊仙 阳幼荣 余琦 白雪娟 宋晶莹 刘瑞 李忠明 王兰 史迎昌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期864-867,共4页

目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果。方法用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17～19g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后... 目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果。方法用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17～19g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后第3d开始,分别用pVAX1空载体(A组)、利福平和异烟肼(B组)、利福平、异烟肼和Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(C组)、Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(D组)、HSP65基因DNA疫苗(E组)治疗40d,每组10只小鼠。治疗结束后2w,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数。结果小鼠感染5w后,肺内菌量可达到1.8×106CFU,脾内菌量达到1.7×106CFU。治疗结束后2w,B组和C组肺、脾脏器重量指数显著低于D组和E组,D组和E组脾脏器重量指数低于A组,但差别不显著。A组肺脏病变程度最重,病变范围80%～100%,干酪样坏死灶为弥漫性;D组和E组肺脏病变范围50%,干酪样坏死灶为片状;B组和C组肺脏病变程度较轻,病变范围较小,干酪样坏死灶为点状。A组脾脏9只重度肿大;B组和C组脾脏未见明显病变;D组和E组脾脏各有4只重度肿大。与A组相比,E组、D组、B组和C组肺脏菌落数分别减少了45%、50%、98.9%、99%;脾脏菌落数依次减少了50%、55%、99.2%、98.4%。与pVAX1空载体治疗组相比,各治疗组均有不同程度的疗效,Ag85A/ESAT-6嵌合基因疫苗组与HSP65基因疫苗组疗效相当。结论Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗组联合化疗的疗效明显强于Ag85A/ESAT6嵌合基因DNA疫苗单独应用。 展开更多

关键词 DNA疫苗 分枝杆菌 结核病

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抗结核药微球的研究进展与应用价值 被引量：1

3

作者 王心静 王巍 《中国防痨杂志》 CAS 2007年第5期440-442,共3页

关键词 抗结核药 药物治疗依从性 结核病患者 价值 微球 服药间隔时间 发展中国家 患者分布

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给耐多药结核病控制更多的关注 被引量：1

4

作者 王巍 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期786-786,788,790,共3页

1 耐多药结核病（MDR-TB）的现状及严峻形势 当前,耐多药结核病的流行逐渐引起人们的关注。1977年WHO/ IUATLD在35个国家进行的耐药检测报告显示,1/3的国家原发耐多药结核病在2%以上。而获得性耐药为13%。2000年64个国家的耐药检测和7... 1 耐多药结核病（MDR-TB）的现状及严峻形势 当前,耐多药结核病的流行逐渐引起人们的关注。1977年WHO/ IUATLD在35个国家进行的耐药检测报告显示,1/3的国家原发耐多药结核病在2%以上。而获得性耐药为13%。2000年64个国家的耐药检测和72个国家的预测资料显示全球MDR-TB新发病例已达273000例。2003年我国6省市耐药检测新发病例中MDR-TB占2.1%～10.4%,而复治患者中MDR-TB高达17．5％～36．6％。 展开更多

关键词 结核 抗多种药物性 传染病控制

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类固醇性结核病59例分析

5

作者 梁建琴 王金河 +5 位作者 王巍 张广宇 王安生 陈志 冯士生 王瑞岚 《中国防痨杂志》 CAS 2009年第5期298-300,共3页

目的分析类固醇性结核病的临床特点。方法回顾性分析2001—2006年间在类固醇激素治疗过程中发现的59例住院结核病例。结果59例均经过12个月的抗结核治疗,有效率78.3%,5例死亡患者均为耐多药结核病(MDR-TB),无缓解者8例;胸部X线表现病变... 目的分析类固醇性结核病的临床特点。方法回顾性分析2001—2006年间在类固醇激素治疗过程中发现的59例住院结核病例。结果59例均经过12个月的抗结核治疗,有效率78.3%,5例死亡患者均为耐多药结核病(MDR-TB),无缓解者8例;胸部X线表现病变广泛,病变缩小49例,空洞缩小12例;痰结核分枝杆菌菌阴转17例。结论类固醇性结核病重在预防,需定期随访X线胸片和痰抗酸染色镜检,及时治疗可以获得满意疗效。 展开更多

关键词 结核 肺/病因学 结核 胸膜/病因学 肾上腺皮质激素类

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荧光定量PCR技术在结核杆菌检测中的应用 被引量：26

6

作者 陈红兵 周志红 +4 位作者 贺润年 高玉然 吴丽霞 赵玉红 席云 《实用医学杂志》 CAS 2008年第21期3765-3767,共3页

目的:建立结核病荧光定量PCR快速检测方法。方法:建立检测结核杆菌的荧光定量PCR方法并进行特异性、敏感性、重复性实验,对临床样品进行检测分析。结果:该方法的敏感性达到了1pg,且特异性高,重复性好。应用荧光定量PCR法及抗酸染色、结... 目的:建立结核病荧光定量PCR快速检测方法。方法:建立检测结核杆菌的荧光定量PCR方法并进行特异性、敏感性、重复性实验,对临床样品进行检测分析。结果:该方法的敏感性达到了1pg,且特异性高,重复性好。应用荧光定量PCR法及抗酸染色、结核杆菌培养法,对332例活动性肺结核患者晨痰、215例活动性肺结核患者外周血、187例结核性胸膜炎患者胸水进行检测,荧光定量PCR技术阳性率分别为53.0%(176/332)、34.4%(74/215)、36.9%(69/187),经统计学比较分析,3种方法检测率差异有统计学意义(P<0.01)。结论:荧光定量PCR技术具有简便、快速、防污染、敏感性与特异性高等优点,是结核病诊断的有效方法之一。 展开更多

关键词 分枝杆菌 荧光定量PCR 快速检测

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耐多药空洞肺结核药物凝胶局部介入治疗临床观察 被引量：12

7

作者 陈志 梁建琴 +2 位作者 王金河 冯士生 王卉 《中国防痨杂志》 CAS 2008年第6期528-531,共4页

目的探讨经纤支镜结核空洞局部灌注含药凝胶治疗耐多药空洞肺结核(multiple-drugresistance tuberculosis,MDR-TB)的临床疗效。方法将经痰抗酸杆菌涂片和培养、药敏实验,影像学诊断确诊的204例耐多药空洞肺结核患者纳入观察范围,其中10... 目的探讨经纤支镜结核空洞局部灌注含药凝胶治疗耐多药空洞肺结核(multiple-drugresistance tuberculosis,MDR-TB)的临床疗效。方法将经痰抗酸杆菌涂片和培养、药敏实验,影像学诊断确诊的204例耐多药空洞肺结核患者纳入观察范围,其中108例经含药凝胶结核空洞局部介入治疗患者归入凝胶组,其余96例未用含药凝胶结核空洞局部介入治疗的患者归入一般治疗的对照组。凝胶组应用纤支镜局部结核空洞灌注含药凝胶(每20ml凝胶内含帕司烟肼600mg、链霉素1000mg、吡嗪酰胺500 mg、左旋氧氟沙星400 mg)治疗和全身抗结核药物治疗,对照组用全身抗结核药物治疗。检测2组患者治疗后6、12和18个月的痰菌阴转率、结核病灶治疗有效率、结核空洞治疗有效率、并发症及不良反应。结果凝胶组治疗后6、12和18个月痰菌阴转率为51.9%、79.6%和88.9%,显著高于对照组;凝胶组结核病灶治疗有效率为52.8%、81.5%和90.7%,结核空洞治疗有效率为50.9%、79.6%和89.8%,显著高于对照组。2组并发症及不良反应发生率差异无统计学意义。结论经纤支镜含药凝胶结核空洞局部介入治疗可以提高耐多药空洞肺结核,不良反应小、安全有效。 展开更多

关键词 结核 凝胶 抗多种药物性

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结核性脑膜炎患者脑脊液基质金属蛋白酶-9及其抑制剂检测 被引量：10

8

作者 王心静 王巍 +2 位作者 叶一秀 王卫 孟祥红 《实用医学杂志》 CAS 2007年第16期2485-2486,共2页

目的:探讨结核性脑膜炎患者脑脊液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)水平的变化意义。方法:选取5例非肿瘤非感染性头痛患者脑脊液作对照,9例病毒性脑膜炎,12例结核性脑膜炎患者。12例结核性脑膜炎根据有无... 目的:探讨结核性脑膜炎患者脑脊液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)水平的变化意义。方法:选取5例非肿瘤非感染性头痛患者脑脊液作对照,9例病毒性脑膜炎,12例结核性脑膜炎患者。12例结核性脑膜炎根据有无意识障碍或脑实质损害的症状分为两组,A组有意识障碍或脑实质损害症状,7例;B组无意识障碍或脑实质损害症状,5例。酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测脑脊液MMP-9和TIMP-1水平。结果:结核性脑膜炎脑脊液MMP-9的水平及MMP-9/TIMP-1比例显著增高,A组增高得更显著。结论:脑脊液MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比例对结核性脑膜炎的诊断和预后有参考价值。 展开更多

关键词 结核 脑膜 明胶酶B 脑脊液

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肺结核患者合并多器官功能障碍综合征45例临床分析 被引量：5

9

作者 王巍 王仲元 +4 位作者 王安生 林明贵 王金河 刘琳 张韬 《中国防痨杂志》 CAS 2008年第2期99-101,共3页

目的探讨肺结核患者合并多器官功能障碍综合征(MODS)临床特点和死亡原因。方法总结分析了7年来研究所收治的45例肺结核患者合并多器官功能障碍综合征资料。结果肺脏损害最常见,为45例(100%),其次为肝脏31例(68.9%),肾脏18例(40.0%),脑16... 目的探讨肺结核患者合并多器官功能障碍综合征(MODS)临床特点和死亡原因。方法总结分析了7年来研究所收治的45例肺结核患者合并多器官功能障碍综合征资料。结果肺脏损害最常见,为45例(100%),其次为肝脏31例(68.9%),肾脏18例(40.0%),脑16例(35.6%),心脏14例(31.1%),胃肠10例(22.2%)。死亡34例(75.6%),主要诱因为感染。死亡原因主要是呼吸衰竭,感染性休克和ARDS。结论早预防、早发现、综合治疗MODS有助于降低重症结核死亡率。 展开更多

关键词 结核 肺 多器官功能障碍综合症

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防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值 被引量：5

10

作者 李幸彬 张广宇 +3 位作者 杜秀然 韩伟 史玲莉 李秀武 《中国防痨杂志》 CAS 2008年第5期421-423,共3页

目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离... 目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。 展开更多

关键词 结核 肺 防污染支气管肺泡灌洗 培养

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油酸肺损伤时肺泡Ⅱ型上皮细胞钠水通道的研究 被引量：4

11

作者 李涛平 申海燕 刘琳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期918-922,935,共6页

目的测定急性呼吸窘迫综合征(ARDS)状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)上AOPs的表达量以及全细胞钠电流的大小,以评估病理状态下ATⅡ细胞钠水主动转运能力的状况。方法急性分离纯化油酸ARDS模型大鼠的ATⅡ细胞,用免疫细胞化学、免疫电镜以及W... 目的测定急性呼吸窘迫综合征(ARDS)状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)上AOPs的表达量以及全细胞钠电流的大小,以评估病理状态下ATⅡ细胞钠水主动转运能力的状况。方法急性分离纯化油酸ARDS模型大鼠的ATⅡ细胞,用免疫细胞化学、免疫电镜以及Westernblotting方法测定AQP1的表达;用膜片钳技术的全细胞模式测定全细胞钠电流并观察应用特布他林对它的影响。结果ARDS模型组ATⅡ细胞免疫细胞化学AQP1呈阳性,免疫电镜结果细胞膜上可见高电子密度阳性反应,Westernblotting分析显示AQP1蛋白条带较对照组明显减弱。全细胞钠电流较对照组明显降低,但对特布他林仍旧敏感。结论ARDS状态下,ATⅡ细胞的钠水主动转运能力明显受损,但并未完全丧失,钠通道激动剂特布他林可以促进钠的转运。ATⅡ细胞钠水通道在肺水的清除中都起着重要的作用。 展开更多

关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 急性呼吸窘迫综合症 油酸 钠转运

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肝脾恶性黑色素瘤误诊为肝脾结核1例 被引量：2

12

作者 王涛 王仲元 +2 位作者 潘燕玉 朱玲 苏琼琼 《中国防痨杂志》 CAS 2008年第4期392-,共1页

关键词 恶性黑色素瘤 肝脾 结节影 肝脏体积 肝脾结核

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结核性脑膜炎脑脊液抗干扰素-γ自身抗体的检测 被引量：1

13

作者 王心静 孟祥红 王巍 《实用医学杂志》 CAS 2008年第21期3666-3668,共3页

目的:建立检测脑脊液中抗干扰素-γ(IFN-γ)自身抗体的ELISA方法,并检测结核性脑膜炎患者脑脊液中抗IFN-γ自身抗体水平,初步探讨抗IFN-γ自身抗体与结核性脑膜炎发病机制的关系。方法:通过对封闭条件、抗原用量等条件进行优化,建立检... 目的:建立检测脑脊液中抗干扰素-γ(IFN-γ)自身抗体的ELISA方法,并检测结核性脑膜炎患者脑脊液中抗IFN-γ自身抗体水平,初步探讨抗IFN-γ自身抗体与结核性脑膜炎发病机制的关系。方法:通过对封闭条件、抗原用量等条件进行优化,建立检测脑脊液中抗IFN-γ自身抗体的ELISA检测方法。采用建立的最佳检测条件对21例结核性脑膜炎患者和6例正常对照者的脑脊液进行抗IFN-γ自身抗体检测。结果:在14例重症结核性脑膜炎患者的脑脊液中测到高滴度的抗IFN-γ自身抗体,平均值和阳性比例明显高于正常对照者和7例轻症患者(P<0.01),轻症患者的阳性比例高于正常对照者(P<0.05)。结论:检测方法简便、可靠,结核性脑膜炎患者脑脊液中存在抗IFN-γ自身抗体,与病情程度相关,对抗IFN-γ自身抗体的研究有助于进一步探讨结核性脑膜炎的免疫病理机制。 展开更多

关键词 脑膜炎 干扰素Ⅱ型 自身抗体 酶联免疫吸附测定

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老年肺结核合并肺及皮肤隐球菌感染1例

14

作者 王涛 王仲元 +2 位作者 潘燕玉 李静 安慧茹 《中国防痨杂志》 CAS 2009年第5期309-310,共2页

关键词 老年肺结核 隐球菌感染 皮肤 盐酸左氧氟沙星 红色斑丘疹 临床资料 菌必治 抗生素

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胞内分枝杆菌临床株分枝菌酸指纹谱变异性研究

15

作者 王巨存 赵凤仪 +6 位作者 王海英 景辉 李国利 王学谦 白人骁 陆芸 赵文君 《中国防痨杂志》 CAS 2010年第8期473-474,共2页

关键词 非结核分枝杆菌 HPLC指纹谱 分枝菌酸 临床诊断 变异性 临床分离株 胞内 菌种鉴定

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结核分枝杆菌phoS2基因在大肠埃希菌中的高效表达及其产物抗原性分析

16

作者 苏锐 李邦印 +4 位作者 王臻 王仲元 程小星 张灵霞 李国利 《中国防痨杂志》 CAS 2009年第7期389-392,共4页

目的在大肠埃希菌中高效表达结核杆菌phoS2,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法采用DNA重组技术构建结核分枝杆菌phoS2抗原表达载体,用双酶切和PCR等方法鉴定转化子,重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达phoS2;用SDS-P... 目的在大肠埃希菌中高效表达结核杆菌phoS2,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法采用DNA重组技术构建结核分枝杆菌phoS2抗原表达载体,用双酶切和PCR等方法鉴定转化子,重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达phoS2;用SDS-PAGE初步鉴定其表达量;将表达产物进行纯化;重组蛋白用Western blot分析其抗原性和特异性。结果phoS2基因在大肠埃希菌中得到高效表达,表达量占全菌蛋白的40%以上;重组蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论重组phoS2蛋白在大肠埃希菌中主要以包涵体形式表达,有很好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 大肠杆菌 磷酸转运蛋白质类 重组蛋白质类

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氟喹诺酮类药物抗分枝杆菌作用的实验研究

17

作者 李国利 张灵霞 《实用医学杂志》 CAS 2008年第21期3760-3762,共3页

目的:研究氟喹诺酮类药物抗分枝杆菌的作用。方法:采用含药改良罗氏斜面和Middlebrook7H9Broth液体培养基分别测定9种氟喹诺酮类药物对23种分枝杆菌(包括结核、牛分枝杆菌和21种非结核分枝杆菌)的试管内最低抑菌浓度。结果:9种氟喹诺酮... 目的:研究氟喹诺酮类药物抗分枝杆菌的作用。方法:采用含药改良罗氏斜面和Middlebrook7H9Broth液体培养基分别测定9种氟喹诺酮类药物对23种分枝杆菌(包括结核、牛分枝杆菌和21种非结核分枝杆菌)的试管内最低抑菌浓度。结果:9种氟喹诺酮类药物对23种分枝杆菌显示不同的试管内抗菌作用谱。结论:氟喹诺酮类药物是临床非结核分枝杆菌病治疗可选择的药物。 展开更多

关键词 抗感染药 分枝杆菌 最低抑菌浓度

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痰涂片阳性与阴性初治肺结核患者临床状况的比较 被引量：2

18

作者 盛莉 孙玉梅 +2 位作者 林明贵 崔君 曹惠 《解放军护理杂志》 2008年第13期20-23,共4页

目的通过对痰涂片阳性(简称涂阳)与痰涂片阴性(简称涂阴)初治肺结核患者患病前后的情况进行比较分析,了解涂阳肺结核患者的高危因素、疾病特征和心理特点。方法对101例初治肺结核患者(涂阴55例、涂阳46例)患病前后的有关情况进行问卷调... 目的通过对痰涂片阳性(简称涂阳)与痰涂片阴性(简称涂阴)初治肺结核患者患病前后的情况进行比较分析,了解涂阳肺结核患者的高危因素、疾病特征和心理特点。方法对101例初治肺结核患者(涂阴55例、涂阳46例)患病前后的有关情况进行问卷调查,并采用描述性统计、χ2检验及秩和检验进行统计学分析。结果涂阳组与涂阴组患者在性别、患病前的健康状况、劳累程度、确诊时间、治疗时间、血浆白蛋白、抑郁发生率和血糖等方面均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论保持良好的健康状况、避免过度劳累、积极治疗和控制各种慢性病对预防肺结核的发生、减轻病情、降低传染性具有重要意义;肺结核的高危人群应定期体检;对肺结核患者应做好饮食指导及心理辅导,帮助患者树立战胜疾病的信心和良好的心态,以利于疾病的康复。 展开更多

关键词 肺结核 初治 痰涂片阳性 阴性

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结核菌抗原基因Rv3881c在大肠杆菌中的高效表达分析 被引量：1

19

作者 李邦印 李大伟 +2 位作者 王臻 吴雪琼 王仲元 《实用医学杂志》 CAS 2007年第11期1605-1607,共3页

目的:从结核分枝杆菌基因组克隆Rv3881c基因并重组入pET24b载体,在大肠杆菌中进行融合表达,重组蛋白经纯化后通过Western blot分析初步鉴定其抗原性和特异性。方法:提取H37Rv标准株的基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR扩增出Rv3881c基因,... 目的:从结核分枝杆菌基因组克隆Rv3881c基因并重组入pET24b载体,在大肠杆菌中进行融合表达,重组蛋白经纯化后通过Western blot分析初步鉴定其抗原性和特异性。方法:提取H37Rv标准株的基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR扩增出Rv3881c基因,连接到pGEMT上,经过筛选鉴定后,将重组子测序;将测序正确的基因双酶切后连接到pET24b载体上,筛选得到重组载体pET24b-48;在BL21菌株中优化表达并采用金属鏊合层析方法纯化蛋白;选取6例结核病阳性临床血清标本和6例健康人血清标本进行Western blot分析。结果:发现从保存的H37Rv菌株克隆得到了读码框完全正确的Rv3881c基因,它在大肠杆菌中可以高效表达,表达量约占细菌总蛋白的20/以上。重组蛋白不与健康人血清反应,可与结核标本血清有较强的免疫印迹反应。结论:重组Rv3881c具有较好的特异性,该抗原有潜力成为检测结核的有效抗原组分之一。 展开更多

关键词 大肠杆菌 重组融合蛋白质类 Rv3881c H37RV

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口服利福平海藻酸钠微球的制备 被引量：7

20

作者 王心静 王巍 +1 位作者 黎立 郑越 《医药导报》 CAS 2007年第12期1486-1488,共3页

目的研制口服利福平海藻酸钠微球。方法采用静电液滴法制备利福平海藻酸钠微球,测定粒径大小、包封率、载药量及其影响因素,考察微球的体外释放特点。结果微球球形圆整,分散性好,平均粒径70.2μm,包封率83.5%,载药量17.1%,在模拟肠液中... 目的研制口服利福平海藻酸钠微球。方法采用静电液滴法制备利福平海藻酸钠微球,测定粒径大小、包封率、载药量及其影响因素,考察微球的体外释放特点。结果微球球形圆整,分散性好,平均粒径70.2μm,包封率83.5%,载药量17.1%,在模拟肠液中的释放呈快慢相,时间长而药物释放完全。结论以海藻酸钠、硬脂酸为材料,用静电液滴法制备利福平微球,球径小、包封率高、释药时间长,工艺简便。 展开更多

关键词 利福平 微球 海藻酸钠 硬脂酸

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