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眼科手持裂隙灯在地震灾害医疗救治中的应用 被引量:5
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作者 关娟 盛豫 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1375-1376,共2页
目的总结2008年5月14日-7月8日抗震救灾医疗队在都江堰地震灾区应用手持裂隙灯诊治237例眼病患者的体会。方法应用手持裂隙灯对237例眼病患者进行检查并作出诊断。在手持裂隙灯下实施结膜异物取出25例,角膜异物取出62例。结果经手持裂... 目的总结2008年5月14日-7月8日抗震救灾医疗队在都江堰地震灾区应用手持裂隙灯诊治237例眼病患者的体会。方法应用手持裂隙灯对237例眼病患者进行检查并作出诊断。在手持裂隙灯下实施结膜异物取出25例,角膜异物取出62例。结果经手持裂隙灯检查,发现结膜炎39例,结膜异物25例,翼状胬肉13例,角膜炎27例,角膜溃疡11例,角膜异物62例,角膜损伤24例,前房积血7例,虹膜睫状体炎16例,青光眼5例,白内障8例。25例结膜异物、62例角膜异物均在手持裂隙灯下一次性取出,未发生角膜穿孔和感染,经复查角膜愈合良好。结论应用手持裂隙灯不仅可以对眼前节疾病做出正确诊断,还有助于对结膜、角膜异物进行及时治疗。手持裂隙灯是抗震救灾医疗队眼科医生最方便实用的诊疗设备。 展开更多
关键词 手持裂隙灯 角膜异物 自然灾害
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合并高血压白内障患者超声乳化术中血压及心率变化 被引量:5
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作者 关娟 盛豫 +1 位作者 司艳芳 周历 《眼科新进展》 CAS 2006年第8期617-619,共3页
目的通过对合并高血压的白内障患者超声乳化术中血压及心率变化曲线的分析,评价该手术对心血管系统的影响。方法对伴有高血压病经过药物控制指标基本正常的老年性白内障患者52例(52眼),在心电监护仪监测下进行超声乳化人工晶状体植入术... 目的通过对合并高血压的白内障患者超声乳化术中血压及心率变化曲线的分析,评价该手术对心血管系统的影响。方法对伴有高血压病经过药物控制指标基本正常的老年性白内障患者52例(52眼),在心电监护仪监测下进行超声乳化人工晶状体植入术,观察术前及术中不同时间血压及心率的变化。结果术中不同时间血压及心率的变化曲线呈现明显升高然后回落的变化规律。结论对手术的应激反应可以出现神经性高血压,仅少数患者需要适当的药物干预。 展开更多
关键词 白内障 超声乳化 血压 心率
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小干扰RNA对人视网膜色素上皮细胞缝隙连接蛋白43表达水平的调节 被引量:4
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作者 司艳芳 王凤翔 +3 位作者 何守志 吕杨 张娟美 黄倩香 《眼科新进展》 CAS 2008年第6期412-415,共4页
目的观察体外化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对原代培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin43,cx43)基因和蛋白表达的影响。方法设计合成针对人cx43基因的小干扰片段(s... 目的观察体外化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对原代培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin43,cx43)基因和蛋白表达的影响。方法设计合成针对人cx43基因的小干扰片段(siR-NA1、siRNA2、siRNA3)和1条阴性对照siRNA0,在脂质体的介导下转染培养的人RPE细胞,采用RT-PCR确定最有效的抑制片段;针对siRNA的有效片段,分为不同浓度(50~30nmol.L-1)转染培养细胞,培养72h后进行MTT增生试验,观察其对人RPE细胞增生能力的影响,确定最有效的浓度;siRNA转染细胞后,分别培养12h、24h、48h、72h后进行Westonblot试验,观察不同时间点其对cx43蛋白表达的影响。结果体外合成的3条siRNA均在一定程度上抑制cx43基因的合成,其中siRNA1是最有效的抑制片段,根据条带灰度比其抑制率达到72%;siRNA1可以显著促进人RPE细胞的增生,增生率达到146%;明显抑制其cx43蛋白的表达(P<0.01),抑制率达到61%;从浓度组间结果可以看出,siRNA的最佳作用浓度是250nmol.L-1,在此浓度之前效率与浓度呈正比,超过此浓度后各浓度组间差异无统计学意义;比较不同时间点,siRNA转染人RPE细胞24h后开始抑制cx43表达,48h后对cx43蛋白合成抑制率最明显。结论化学合成的siRNA可以有效抑制培养的人RPE细胞cx43基因的表达,促进细胞的增生,这种基因沉默作用可能对于视网膜色素上皮组织的再生有一定作用。 展开更多
关键词 小干扰RNA 视网膜色素上皮细胞 缝隙连接蛋白43
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环氧化酶-2抑制剂抑制大鼠角膜新生血管的研究
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作者 赵慧英 孙旭光 +1 位作者 王智群 李然 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第8期680-683,共4页
目的探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂美洛昔康对角膜新生血管(CNV)的抑制作用及其作用机制。方法缝线法诱导大鼠CNV形成;将动物分5组:第1~3组分别为0.625、1.25、5.0mg/mL美洛昔康组,第4组为地塞米松组,第5组为阴性对照组。裂隙灯照相并计... 目的探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂美洛昔康对角膜新生血管(CNV)的抑制作用及其作用机制。方法缝线法诱导大鼠CNV形成;将动物分5组:第1~3组分别为0.625、1.25、5.0mg/mL美洛昔康组,第4组为地塞米松组,第5组为阴性对照组。裂隙灯照相并计算CNV面积,RT-PCR法观察角膜VEGF和Ang-2 mRNA表达。结果第5组CNV面积明显高于其他各组(P<0.05)。第5天、第8天时,第2组、4组CNV面积明显低于其余各组(P<0.01);第5天时,第4组CNV面积明显低于第2组(P<0.05)。缝线后第8天、第23天,第2~4组Ang-2 mRNA、VEGF mRNA表达均低于第5组。结论COX-2抑制剂美洛昔康可明显抑制CNV的增生,可能通过减少VEGF、Ang-2的转录实现。 展开更多
关键词 环氧化酶-2抑制剂 美洛昔康 角膜新生血管 血管内皮生长因子
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siRNA作用后培养的人视网膜色素上皮细胞蛋白质谱分析
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作者 司艳芳 何守志 王凤翔 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第6期413-415,419,共4页
目的通过抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,cx43)基因的表达,寻找差异蛋白,初步探讨cx43基因对RPE细胞生命活动的意义。方法提取细胞总蛋白并定量分析,第一向电泳是用pH3~10线性IP... 目的通过抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,cx43)基因的表达,寻找差异蛋白,初步探讨cx43基因对RPE细胞生命活动的意义。方法提取细胞总蛋白并定量分析,第一向电泳是用pH3~10线性IPG预制胶条进行等电聚焦,第二向电泳是用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白。银染PAGE凝胶、干燥,Powerlook 2100XL扫描凝胶。利用Image Master 2D Elite 4.01图像分析软件进行分析,蛋白斑点相对分子质量和等电点采用二维校正法确定。随机选取图像分析中siRNA转染组与RPE细胞对照组凝胶图中volume值相差≥2倍的7个蛋白质斑点进行胶内酶切,经胶上原位酶切和质谱分析得到肽质量指纹图谱,查寻蛋白质数据库并鉴定差异蛋白质,分析其生物学意义。结果RPE细胞对照组3块凝胶共分离出蛋白质斑点861个,组间匹配率达到92%;siRNA转染组3块凝胶共分离出蛋白质斑点887个,组间匹配率达到93%。经过软件图像分析,发现volume值相差≥2倍的点共78个,其中上调的16个,下调的18个。有19个点在RPE细胞对照组存在而siRNA转染组不存在,25个在siRNA转染组存在而RPE细胞对照组不存在。随机选取7个点进行蛋白质谱分析:SP-H抗原、P27BBP、有丝分裂活性蛋白激酶、次黄嘌呤核苷酸脱氢酶和热休克蛋白70表达上调,β-actin表达下降,电压依赖阴离子通道蛋白在转染siRNA后出现表达。结论通过蛋白质谱发现cx43基因沉默后引起多种蛋白的表达失调,cx43可能参与RPE细胞的多种生命活动。 展开更多
关键词 连接蛋白43 RNA干扰 蛋白质组学
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特异siRNA沉默人RPE细胞cx43基因的生物学变化
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作者 司艳芳 王凤翔 何守志 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第9期677-680,共4页
目的通过RNA干扰的方法沉默缝隙连接蛋白43(connexin43,cx43),观察cx43对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞活动的影响。方法培养原代的人RPE细胞,以不同浓度转染针对人cx43基因的小干扰RNA(small interfering RNA,... 目的通过RNA干扰的方法沉默缝隙连接蛋白43(connexin43,cx43),观察cx43对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞活动的影响。方法培养原代的人RPE细胞,以不同浓度转染针对人cx43基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异片段,通过流式细胞仪观察其对细胞周期的影响;通过扫描电镜观察其对细胞形态的影响;采用激光共聚焦和荧光淬灭恢复技术观察荧光恢复速率平均百分率,评价其对细胞间通讯功能的影响;通过制作RPE细胞损伤模型,观察其对损伤修复能力的作用。结果培养24h和48h,流式细胞仪检测S期RPE细胞比率,对照组分别为:(8.85±1.33)%和(15.52±2.60)%;100nmol.L-1、200nmol.L-1、300nmol.L-1siRNA1转染RPE细胞后,24h、48hS期细胞比率分别为:(10.64±2.50)%、(20.98±5.78)%,(19.42±2.88)%、(32.67±4.31)%,(20.31±4.03)%、(27.59±6.95)%,S期细胞比率明显增多,与对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.05)。细胞的扫描电镜显示转染siRNA后,细胞表型发生变化,细胞体积增大,表面触手增多。cx43基因被干扰后,细胞荧光恢复速率降低,细胞间通讯功能明显降低;细胞损伤修复能力下降。结论cx43正常表达不仅影响细胞间通讯功能,且对细胞的生长周期、损伤修复多种细胞行为也起着重要作用。 展开更多
关键词 小干扰RNA 视网膜色素上皮细胞 缝隙连接蛋白43
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