重组人血小板生成素可预防恶性肿瘤化疗后血小板减少 被引量：22

1

作者 李秋文 叶明 +2 位作者 肖文华 朱建华 张淑芳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1064-1066,共3页

目的观察重组人血小板生成素(rhTPO)预防应用治疗恶性肿瘤患者化疗后血小板减少的临床疗效。方法采用随机交叉自身对照研究,24例恶性肿瘤患者随机分为A、B两组,每组12例,接受方案和剂量相同的两个周期化疗。A组:第1个周期(对照周期)不注... 目的观察重组人血小板生成素(rhTPO)预防应用治疗恶性肿瘤患者化疗后血小板减少的临床疗效。方法采用随机交叉自身对照研究,24例恶性肿瘤患者随机分为A、B两组,每组12例,接受方案和剂量相同的两个周期化疗。A组:第1个周期(对照周期)不注射rhTPO,第2个周期(用药周期)化疗前3 d开始注射rhTPO;B组:第1个周期(对照周期)不注射rhTPO,第2个周期(用药周期)化疗后6～24 h内注射rhTPO。结果 24例恶性肿瘤患者用药周期与对照周期血小板减少程度和持续时间差异有显著性;A、B两组用药周期与对照周期血小板减少程度和持续时间差异有统计学意义。结论恶性肿瘤患者化疗前提前给予国产rhTPO可明显提高化疗后血小板的最低值,以及缩短化疗后血小板恢复时间。 展开更多

关键词 重组人血小板生成素 恶性肿瘤 血小板减少症

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半抗原DNP修饰自体肿瘤疫苗治疗恶性黑素瘤 被引量：1

2

作者 杜楠 王希良 +5 位作者 宋林萍 肖文华 孙君重 李秋文 赵晖 康欣荣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第5期487-489,共3页

目的:探讨半抗原二硝基氟苯(dinitrophenyl,DNP)修饰自体肿瘤疫苗治疗恶性黑色素瘤的疗效。方法:32例Ⅲ期恶性黑素瘤(恶黑)患者,肿瘤或淋巴结切除后,分别采用半抗原DNP修饰的自体瘤苗和未修饰自体瘤苗联合生物化疗进行治疗,观察两组患... 目的:探讨半抗原二硝基氟苯(dinitrophenyl,DNP)修饰自体肿瘤疫苗治疗恶性黑色素瘤的疗效。方法:32例Ⅲ期恶性黑素瘤(恶黑)患者,肿瘤或淋巴结切除后,分别采用半抗原DNP修饰的自体瘤苗和未修饰自体瘤苗联合生物化疗进行治疗,观察两组患者淋巴细胞亚群变化、迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)和临床随访。结果:①两组比较,半抗原修饰瘤苗组较未修饰疫苗组CD8^+-IFN-PE明显升高(P<0.05);半抗原修饰瘤疫苗组治疗后CD8^+-IFN-PE细胞比例较治疗前明显升高(P<0.05),然而,半抗原未修饰瘤苗组治疗前后变化不大(P>0.05)。②半抗原修饰瘤苗组患者治疗后DTH明显增强,硬结由(5.4±1.2)mm增大到(23.5±4.2)mm(P<0.05),半抗原未修饰瘤苗组硬结由(6.3±1.4) mm增大到(11.2±3.2)mm(P<0.05),然而,两组DTH达到阳性结果(≥5mm)的百分比分别为95%和36%(P<0.01)。③随访2年,半抗原修饰瘤苗组13例患者生存时间超过24个月,其中仅2例DTH阴性;半抗原未修饰瘤苗组8例患者生存时间超过24个月,6例DTH阳性。结论:半抗原DNP修饰的自体肿瘤疫苗可增强恶性黑素瘤患者特异性细胞介导的免疫反应,从而延长患者生存时间。 展开更多

关键词 恶性黑素瘤 二硝基氟苯 自体肿瘤疫苗 半抗原 特异性免疫反应

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癌症患者疼痛量表的应用 被引量：74

3

作者 李小梅 李虹义 +1 位作者 肖文华 刘端祺 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期1482-1486,共5页

癌痛本质上是患者的主观感受,因此患者的疼痛表述是评估的依据,患者自评量表也由此在临床实践和研究中被广泛采用。一维量表常用于评估癌痛的强度,其中的数字评估量表(Numerical Rating Scale,NRS)被欧洲姑息治疗研究协作组所推荐;多维... 癌痛本质上是患者的主观感受,因此患者的疼痛表述是评估的依据,患者自评量表也由此在临床实践和研究中被广泛采用。一维量表常用于评估癌痛的强度,其中的数字评估量表(Numerical Rating Scale,NRS)被欧洲姑息治疗研究协作组所推荐;多维量表,如简式疼痛问卷(Brief Pain Inventory,BPI)或修订后的简式麦吉尔疼痛问卷(Short-Form McGill Pain Questionnaire,SF-MPQ-2)可更全面的评估癌痛;评估肿瘤患者的爆发痛、神经病理性疼痛时可选择有针对性的量表;对认知功能受损的患者,脸谱法评估有助于癌痛筛查,要评估癌痛还需采用多维量表。无论选择何种评估工具,均强调对癌痛进行动态评估。简便易行的电子评估量表是目前癌痛新量表研制的趋势。 展开更多

关键词 癌痛 疼痛评估 自评量表

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生物化疗、化疗或生物疗法用于治疗恶性黑色素瘤的回顾性分析 被引量：16

4

作者 杜楠 李留树 +4 位作者 肖文华 李秋文 孙君重 赵晖 王如良 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第8期573-577,共5页

背景与目的:近年来恶性黑色素瘤发病率有明显上升趋势,恶性黑色素瘤对单纯放、化疗不甚敏感,然而,它是一种免疫原性较高的肿瘤,联合免疫治疗可以提高疗效,因此,恶性黑色素瘤治疗的合理性在于它的综合治疗。本研究回顾性分析观察Ⅲ、Ⅳ... 背景与目的:近年来恶性黑色素瘤发病率有明显上升趋势,恶性黑色素瘤对单纯放、化疗不甚敏感,然而,它是一种免疫原性较高的肿瘤,联合免疫治疗可以提高疗效,因此,恶性黑色素瘤治疗的合理性在于它的综合治疗。本研究回顾性分析观察Ⅲ、Ⅳ期恶性黑色素瘤患者应用生物化学、生物或化学治疗的近期和远期疗效。方法:分析102例Ⅲ、Ⅳ期恶性黑色素瘤患者化学治疗(达卡巴嗪、顺铂、福莫司汀)、生物治疗(白细胞介素-2、干扰素α-2b、树突状细胞)或生物化疗(上述两者联合续贯)的临床疗效。中位随访时间2年(1至4年)。结果:近期疗效:生物化疗组36例,有效率(RR)为69.44%,与生物治疗组(34例,RR29.41%)和化学治疗组(32例,RR46.89%)相比,差异有显著性(P<0.05)。远期疗效生物化疗组的中位生存时间(MST)为2年9个月,与生物治疗组(MST为2年2个月)和化学治疗组(MST为1年2个月)相比,差异有显著性(P<0.05)。然而,毒副作用在生物化疗明显高于其他两组,但经一般处理,患者均可耐受。结论:恶性黑色素瘤患者经生物化学治疗可明显提高有效率并延长生存时间。 展开更多

关键词 恶性黑色素瘤 化学疗法 生物疗法 生物化学疗法

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CD4^+ T淋巴细胞功能研究新进展 被引量：32

5

作者 孙君重 肖文华 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期544-548,共5页

细胞免疫是人体免疫系统的重要组成部分,在清除癌变组织和病原菌入侵中发挥重大作用。T细胞在细胞免疫中居中心地位。长期以来,T细胞免疫的研究重点主要集中于CD8+细胞毒T细胞,而关于CD4+T细胞功能的研究多限于CD8+细胞毒T细胞的"... 细胞免疫是人体免疫系统的重要组成部分,在清除癌变组织和病原菌入侵中发挥重大作用。T细胞在细胞免疫中居中心地位。长期以来,T细胞免疫的研究重点主要集中于CD8+细胞毒T细胞,而关于CD4+T细胞功能的研究多限于CD8+细胞毒T细胞的"辅助"功能,或作为调节细胞抑制免疫反应的研究上,而其杀伤和清除肿瘤细胞的作用似乎被忽视。新近的研究表明,特异性CD8+细胞毒T细胞效应在动物实验或临床研究上均未见理想的效果,CD4+T细胞不是功能单一的一类细胞,而是功能复杂的细胞群。CD4+T细胞的功能不仅限于辅助细胞毒T细胞,而且可以协助NK细胞清除和杀灭肿瘤,甚至还具有不依赖于CD8+CTL的肿瘤杀伤作用。CD4+T细胞在机体抗肿瘤免疫中具有重大意义。本文就CD4+T细胞的分类,分化;CD4+T细胞的功能和分泌的细胞因子;CD4+T细胞与肿瘤免疫;CD4+T细胞的肿瘤免疫调节作用及CD4+T细胞的临床研究进行了综述。 展开更多

关键词 细胞免疫 CD4+T淋巴细胞 免疫功能

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地西他滨单药或联合以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年急性髓系白血病的临床分析 被引量：16

6

作者 周宏伟 周敏航 +7 位作者 王志红 李鹏飞 刘默 杜瑜 姚毅冰 彭朝津 靖彧 孙君重 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期91-96,共6页

目的:观察地西他滨(DAC)单药或联合以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年急性髓系白血病(AML)患者的疗效和不良反应。方法:回顾性分析2009年9月至2012年3月我科收治的8例初治老年(年龄>70岁)AM L患者的临床特征,包括年龄、性别... 目的:观察地西他滨(DAC)单药或联合以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年急性髓系白血病(AML)患者的疗效和不良反应。方法:回顾性分析2009年9月至2012年3月我科收治的8例初治老年(年龄>70岁)AM L患者的临床特征,包括年龄、性别、外周血及骨髓特点等。应用低剂量DAC±以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案化疗(DAC 20 mg/m^2·d 1-5±以阿糖胞苷20 mg/d d3-9为基础的化疗方案),观察治疗效果及不良反应。结果:8例患者,男3例,女5例,年龄71-84岁,初治时白细胞中位数31.2(1.38-179)×10~9/L,骨髓原始细胞百分比中位数42.7(23-94)%。接受了DAC±以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案化疗的中位疗程数为2.5(1-20)个。完全缓解2例,部分缓解2例,总缓解率为50%(4/8),中位OS为9.5(2-36)个月,3例患者的总生存时间达到或超过了1年,8周内死亡1例。主要的严重不良反应是骨髓抑制(Ⅲ-Ⅳ度87.5%)和肺部感染(50%)。结论:低剂量DAC±以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年(年龄>70岁)AML,明显提高了有效率,延长了患者生存期,患者耐受性良好,疗效满意。 展开更多

关键词 地西他滨 老年急性髓系白血病 阿糖胞苷 骨髓抑制

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半抗原修饰的黑素瘤细胞激活树突状细胞诱导特异性T细胞反应 被引量：3

7

作者 杜楠 李留树 +2 位作者 肖文华 唐卓斌 孙同柱 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期221-223,共3页

目的:探索半抗原[二硝基氟苯(DNP)]修饰的恶性黑素瘤细胞(恶黑)激活树突状细胞(DC)体外诱导特异性T细胞反应的抗肿瘤效应。方法:采用DNP修饰恶黑细胞B16(H-2b),然后在体外激活C57BL/6小鼠(H-2b)外周血来源的DC,观察其诱导T细胞的增殖和... 目的:探索半抗原[二硝基氟苯(DNP)]修饰的恶性黑素瘤细胞(恶黑)激活树突状细胞(DC)体外诱导特异性T细胞反应的抗肿瘤效应。方法:采用DNP修饰恶黑细胞B16(H-2b),然后在体外激活C57BL/6小鼠(H-2b)外周血来源的DC,观察其诱导T细胞的增殖和特异性T细胞杀伤功能;在小鼠皮肤迟发性超敏反应实验和荷瘤实验中观察DNP修饰瘤苗+DC的特异性。结果:经DNP修饰的B16细胞激活的DC,诱发T细胞增殖能力和对B16细胞的特异性杀伤效应均明显高于未修饰的B16细胞和DC。动物实验显示DNP修饰瘤苗联合DC具有明显的诱发皮肤迟发性超敏反应作用和抑瘤作用。结论:DNP修饰B16所激活的DC可以诱导更强的恶黑特异性T细胞效应。 展开更多

关键词 半抗原 二硝基氟苯 树突状细胞 T淋巴细胞 黑素瘤细胞

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延续性护理对胃癌患者希望水平的影响 被引量：22

8

作者 郭艳艳 樊向丽 亢君 《护理学杂志》 CSCD 2017年第14期101-102,共2页

目的探讨延续性护理对胃癌患者院外希望水平的影响。方法将44例胃癌患者随机分为观察组和对照组各22例。对两组患者均采取常规的出院指导和护理干预,观察组患者在此基础上进行延续性护理。于出院时及出院3个月采用Herth希望量表对两组... 目的探讨延续性护理对胃癌患者院外希望水平的影响。方法将44例胃癌患者随机分为观察组和对照组各22例。对两组患者均采取常规的出院指导和护理干预,观察组患者在此基础上进行延续性护理。于出院时及出院3个月采用Herth希望量表对两组患者进行调查。结果出院3个月后,观察组患者的希望水平显著优于对照组(P<0.01)。结论对胃癌患者出院后应用延续性护理干预可改善患者的希望水平,提高患者的生活信心。 展开更多

关键词 胃癌 延续性护理 希望水平

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阿霉素诱导Egr-1启动子调控GM-CSF基因表达的实验研究 被引量：2

9

作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 孙君重 付艳 赵晖 王希良 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1165-1169,共5页

本研究探讨阿霉素(ADM)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的修复作用。构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和eGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EG);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳... 本研究探讨阿霉素(ADM)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的修复作用。构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和eGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EG);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆(HFCL/EG);采用流式细胞仪和倒置荧光显微镜观察eGFP绿色荧光表达的阳性细胞;在加入ADM的HFCL/EG细胞培养体系中,用ELISA方法检测GM-CSF的含量;将从脐血中分离的单个核细胞接种于含有ADM后的HFCL/EG上清培养液中,观察其对CFU-GM的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸鉴定化疗通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果表明:成功地构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体(Egr-EG);在HFCL/EG细胞中有外源性基因eGFP和GM-CSF的表达,在加入ADM后HFCL/EG细胞培养上清液中GM-CSF含量和CFU-GM形成数量较未加ADM组明显增高(p<0.01);在ADM处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸明显降低GM-CSF水平。结论:ADM诱导Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达对化疗后的造血损伤具有一定的修复作用。 展开更多

关键词 EGR-1 阿霉素 粒-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓基质细胞 活性氧中间物

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大剂量甲孕酮治疗晚期耐药乳腺癌的效果评价 被引量：2

10

作者 朱建华 肖文华 +1 位作者 王如良 李秋文 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期919-919,共1页

关键词 乳腺肿瘤 甲孕酮 抗药性 肿瘤

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紫杉醇化疗致肠梗阻1例 被引量：2

11

作者 付艳 肖文华 +1 位作者 杜楠 朱建华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期505-505,共1页

关键词 紫杉醇 抗肿瘤联合化疗方案 肠梗阻

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球囊后凸椎体成形术对椎体转移癌患者疼痛缓解和功能恢复的作用 被引量：2

12

作者 朱建华 肖文华 +4 位作者 孙玉鹏 郝怡鑫 王如良 李秋文 彭秀梅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期1595-1597,共3页

目的:观察经皮球囊后凸椎体成形术(PKP)在缓解椎体转移癌患者疼痛和功能恢复中的临床价值。方法:28例椎体转移癌患者接受了PKP治疗。记录并比较患者手术前后止痛药物应用比例、疼痛程度、止痛药用量和活动能力。结果:45个椎体的PKP手术... 目的:观察经皮球囊后凸椎体成形术(PKP)在缓解椎体转移癌患者疼痛和功能恢复中的临床价值。方法:28例椎体转移癌患者接受了PKP治疗。记录并比较患者手术前后止痛药物应用比例、疼痛程度、止痛药用量和活动能力。结果:45个椎体的PKP手术均1次成功。术后1周13例(46.4%)患者疼痛完全缓解,13例(46.4%)明显缓解。术后止痛药物应用比例、疼痛评分、活动能力评分较术前明显改善(P<0.01)。结论:PKP能快速缓解椎体转移瘤引起的疼痛,增强病椎强度和稳定性,预防病椎进一步压缩骨折,具有简单、安全、有效等优点。 展开更多

关键词 经皮球囊椎体后凸成形术 脊柱转移癌 疼痛

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氟脲嘧啶促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF的表达 被引量：1

13

作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 孙君重 付艳 赵晖 王希良 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期428-432,共5页

目的:探索氟脲嘧啶(5-FU)对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体(pCIneo-Egr-1-EGFP-IRE... 目的:探索氟脲嘧啶(5-FU)对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体(pCIneo-Egr-1-EGFP-IRES-GM-CSF,Egr-EG),通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆(HFCL/EG)。采用RT-PCR检测5-FU处理的HFCL/EG细胞GM-CSFmRNA表达,用FACS和倒置荧光显微镜观察5-FU诱导HFCL/EG细胞EGFP表达的阳性细胞。在加入5-FU的HFCL/EG细胞培养体系中,用ELISA方法检测GM-CSF的含量;将从脐血中分离的单个核细胞接种于5-FU处理后的HFCL/EG培养上清液培养基中,观察其对GM-CFU的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸检测5-FU通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果:构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体Egr-EG,获得其转染细胞HFCL/EG。在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,RT-PCR显示其GM-CSFmRNA表达增强,流式细胞术证实有EGFP的显著表达。在5-FU处理后,HFCL/EG细胞培养上清液GM-CSF含量和GM-CFU形成数量分别较未处理细胞能明显增高(P<0.01);在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸能明显减少GM-CSF含量(P<0.01)。结论:5-FU能促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF基因的表达,从而对化疗后的造血损伤产生一定的恢复作用。 展开更多

关键词 EGR-1 5-氟脲嘧啶 粒-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓基质细胞 活性氧中间物

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RNA干扰对肾癌细胞系MDR1基因表达的抑制 被引量：1

14

作者 郝怡鑫 杜楠 +1 位作者 宋林萍 肖文华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期489-489,共1页

关键词 肾肿瘤 RNA干扰 基因 MDR

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人FHL1各LIM结构域融合蛋白的原核表达、纯化及活性检测 被引量：1

15

作者 符静 徐小洁 +7 位作者 刘家宏 范忠义 王涛 宋金洁 吕朝晖 朱建华 叶棋浓 陆菊明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期384-386,389,共4页

目的构建人FHL1各LIM结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4融合蛋白,并对其活性进行检测。方法用PCR法从FHL1真核表达载体中扩增FHL1的LIM1/2、LIM1、LIM2、LIM3和LIM4基因编码序列,将其正确插... 目的构建人FHL1各LIM结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4融合蛋白,并对其活性进行检测。方法用PCR法从FHL1真核表达载体中扩增FHL1的LIM1/2、LIM1、LIM2、LIM3和LIM4基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体,重组质粒转化大肠杆菌Rossate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用Western blot法检测融合蛋白表达,通过GST pull-down技术检测纯化蛋白与已知结合蛋白雌激素受体α(ERα)的相互作用。结果构建得到FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;在Rossate菌中诱导表达出与预期大小相符的目的蛋白,经Western blot法检测,融合蛋白成功表达;纯化得到GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4五个融合蛋白,GST pull-down证明FHL1全长以及FHL1-LIM1/2、-LIM2蛋白可以和ERα相互作用。结论成功克隆FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因,并获得了活性良好的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4蛋白,为研究FHL1在乳腺癌中的作用奠定了实验基础。 展开更多

关键词 人FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因 原核表达 纯化 ERΑ

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肝癌细胞内HAb18G/CD147信号转导通路关键分子的筛选 被引量：1

16

作者 周宏伟 姚毅冰 +7 位作者 梁耀杰 王志红 周晓燕 郭卫平 杨向民 蒋建利 孙君重 陈志南 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1196-1200,共5页

目的筛选肝癌细胞内HAb18G/CD147信号转导通路中差异表达的关键分子。方法提取SMMC-7721细胞和T7721细胞(SMMC-7721经稳定转染并高表达HAb18G/CD147的肝癌细胞),应用信号转导相关基因芯片筛选两种肝癌细胞内差异表达的关键分子。结果基... 目的筛选肝癌细胞内HAb18G/CD147信号转导通路中差异表达的关键分子。方法提取SMMC-7721细胞和T7721细胞(SMMC-7721经稳定转染并高表达HAb18G/CD147的肝癌细胞),应用信号转导相关基因芯片筛选两种肝癌细胞内差异表达的关键分子。结果基因芯片结果显示共有13个差异表达的基因,在高表达HAb18G/CD147的T7721细胞系中,表达下调的基因包括:骨形成蛋白(BMP)家族的BMP-2、BMP-5,内皮素1(ET-1),结缔组织生长因子-富含半胱氨酸血管生成诱导物61-肾母细胞瘤过表达基因(CCN)蛋白家族的WISP-2(Wnt1-induced signaling proteins-2/CCN5)和富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61/CCN1),前列腺干细胞抗原(PSCA);表达上调的基因包括:白细胞介素10受体α(IL-10Rα),趋化因子家族的IL-6、IL-8和CXC趋化因子配体2(CXCL2/GROβ),线粒体超氧化物歧化酶2(SOD2),B因子(B factor)和转化生长因子β(TGF-β)诱导基因克隆3(βig-h3)的表达。结论共筛选出HAb18G/CD147信号转导通路相关的13个差异表达基因,这些基因与肝癌细胞免疫微环境重塑、血管形成、增殖、侵袭和迁移等生物学过程相关。 展开更多

关键词 HAB18G/CD147 肝癌 信号转导 骨形成蛋白2(BMP-2) TGF-β诱导基因克隆3(βig-h3)

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氟脲嘧啶诱导Egr-1启动子转录调控Flt3配基的基因表达

17

作者 杜楠 裴雪涛 +2 位作者 周进明 孙君重 郝怡鑫 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期406-409,416,共5页

目的:探讨5-氟脲嘧啶(5-Fu)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的Flt3配基(FL)和EGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EF);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL并称... 目的:探讨5-氟脲嘧啶(5-Fu)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的Flt3配基(FL)和EGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EF);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL并称为HFCL/EF;采用流式细胞术和倒置荧光显微镜观察EGFP绿色荧光表达的阳性细胞;采用RT-PCR、Western blot和ELISA检测5-Fu对HFCL/EF细胞FL表达的影响;流式细胞术检测经5-Fu处理的HFCL/EF细胞上清对CD34+细胞和CFU-GM的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸鉴定化疗通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果:构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体(Egr-EF);经5-Fu处理后HFCL/EF细胞培养上清液较未加5-Fu组的FL含量明显增高并且对CD34+细胞和CFU-GM具有较强的扩增作用(P<0.01);在5-Fu处理的HFCL/EF细胞中,EGFP活性、FLmR-NA和FL蛋白表达增强,而且,N-乙酰半胱氨酸明显减少FL含量。结论:5-Fu诱导Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达对化疗药物处理后的造血损伤具有一定的恢复作用。 展开更多

关键词 EGR-1 5-氟脲嘧啶 FLT3配基 骨髓基质细胞 活性氧中间物

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化疗诱导Egr-1启动子调控造血因子基因表达的实验研究

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作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 周进明 孙君重 李秋文 赵晖 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1447-1450,共4页

目的探索化疗药物诱导Egr-1启动子调控GM-CSF基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用。方法将GM-CSF和EGFP双顺反子基因重组于携带Egr-1调控元件的pCIneo真核表达载体,构建Egr-EG载体,通过脂质体介导转染骨髓基质细胞HF-CL,即获得HFCL/EG... 目的探索化疗药物诱导Egr-1启动子调控GM-CSF基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用。方法将GM-CSF和EGFP双顺反子基因重组于携带Egr-1调控元件的pCIneo真核表达载体,构建Egr-EG载体,通过脂质体介导转染骨髓基质细胞HF-CL,即获得HFCL/EG细胞。MTT法测定顺铂(DDP)、氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他滨(GEM)和紫杉醇(PTX)对HFCL和HFCL/EG细胞存活率的影响,并计算各药物对细胞的IC50值。倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测化疗药物诱导后绿色荧光蛋白(EGFP)表达阳性的HFCL/EG细胞百分率。ELISA法检测活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对化疗药物诱导的Egr-1启动子调控的下游GM-CSF基因表达的影响。观察化疗诱导后HFCL/EG上清对粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响。结果成功构建了Egr-Eg载体,其转染细胞HFCL/EG细胞对DDP、5-FU、GEM和PTX有不同的敏感性,且药物对HFCL/EG细胞IC50值均较HFCL组明显增加(P<0.05)。流式细胞仪检测显示DDP、5-FU、GEM和PTX均可以诱导调控Egr-1启动子调控的EGFP表达,HFCL/EG+DDP组、HFCL/EG+5-FU组、HFCL/EG+GEM组、HECL/EG+PTX组绿色荧光阳性的细胞百分率分别为35.06%±0.61%、65.12%±1.10%、44.47%±0.71%、37.56%±0.63%,与HFCL/EG组(10.02%±0.21%)相比明显增加(P<0.05)。化疗药物处理后,HFCL/EG细胞培养上清液中,GM-CSF含量和CFU-GM形成数量较未化疗组明显增高(P<0.05);但加入活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸后,培养上清中GM-CSF含量明显减少(P<0.05)。结论化疗药物诱导的Egr-1启动子调控下游基因表达与活性氧相关,且Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达可能对化疗后的造血损伤具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 Egr-1蛋白 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 造血干细胞 活性氧

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化疗诱导Egr-1启动子调控的GM-CSF基因表达对荷瘤小鼠造血损伤的作用

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作者 杜楠 孙君重 +4 位作者 赵晖 付艳 李晓松 周进明 王希良 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第11期822-827,共6页

背景与目的:电离辐射可以通过产生活性氧激活Egr-1启动子高度保守序列CArG,Egr-EG为构建的上游含Egr-1调控序列CArG元件,启动TNF或GM-CSF的pcIneo表达载体,该机制可用于辐射所致的造血损伤或治疗肿瘤。化疗药物通常是通过产生活性氧和DN... 背景与目的:电离辐射可以通过产生活性氧激活Egr-1启动子高度保守序列CArG,Egr-EG为构建的上游含Egr-1调控序列CArG元件,启动TNF或GM-CSF的pcIneo表达载体,该机制可用于辐射所致的造血损伤或治疗肿瘤。化疗药物通常是通过产生活性氧和DNA损伤导致肿瘤细胞死亡,我们假设化疗药物可以产生活性氧,因此,化疗可以诱导Egr-1启动子调控下游造血因子基因表达,这种化疗诱导基因疗法针对化疗所致的造血损伤具有恰当的治疗效果。本文旨在探讨化疗诱导Egr-1启动子调控的造血因子基因表达对化疗后造血恢复的作用。方法:将构建的携带有早期生长因子(Egr-1)启动子的GM-CSF cDNA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP) cDNA双顺反子真核表达载体导入基质细胞HFCL后,输入荷瘤(黑色素瘤)小鼠体内,对其实施5-FU化疗,观察外周血象动态改变、人基质细胞植入检测、外源基因eGFP、GM-CSFmRNA、蛋白表达以及对CFU-GM的增殖作用的检测。结果:实验组与对照组相比外周血白细胞下降幅度明显减轻,恢复加快,而各组间CFU-GM差异无显著性,肿瘤抑制率与化疗相关,而与外源基因表达无关:5-FU处理后72 h实验组小鼠骨髓可见绿色荧光阳性的基质细胞,RT-PCR和Western印迹显示GH-CSF mRNA和G-CSF蛋白表达增强。结论:5-FU诱导的Egr-1启动子造血因子基因疗法对化疗后造血损伤具有促进造血恢复作用。 展开更多

关键词 早期生长因子 启动子 GM—CSF 基因疗法 化疗

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阿霉素诱导Egr-1启动子调控的造血因子GM-CSF基因表达对荷瘤小鼠造血功能恢复的影响

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作者 杜楠 裴雪涛 +4 位作者 周进明 孙君重 赵晖 付艳 郝怡鑫 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期417-421,共5页

本研究探讨阿霉素(ADM)诱导早期生长因子(Egr-1)启动子调控的造血因子基因表达对荷瘤小鼠化疗后造血功能恢复的作用。将构建的携带有Egr-1启动子的粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)cDNA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA双顺反子真核表达... 本研究探讨阿霉素(ADM)诱导早期生长因子(Egr-1)启动子调控的造血因子基因表达对荷瘤小鼠化疗后造血功能恢复的作用。将构建的携带有Egr-1启动子的粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)cDNA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA双顺反子真核表达载体导入基质细胞HFCL后,输入重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内。实验小鼠随机分4组:①ADM诱导的HFCL/EG组(HFCL/EG+ADM组),②ADM诱导的HFCL组(HFCL+ADM组),③单纯输注HFCL/EG组(HFCL/EG组)和④单纯输注HFCL组(HFCL组),每组6只动物。观察外周血象动态改变,用流式细胞术检测eGFP+人基质细胞,用RT-PCR和Western blot分别检测GM-CSFmRNA及其蛋白的表达。结果表明:化疗组与未化疗组相比外周血白细胞降低,而且下降幅度较低,恢复加快;各组间CFU-GM数无显著性差异;肿瘤抑制率与化疗相关,而与外源基因表达不相关;ADM处理后实验组小鼠骨髓可见绿色荧光阳性的基质细胞;RT-PCR和Western blot显示GM-CSF mRNA和GM-CSF蛋白表达增强。结论:ADM诱导的Egr-1启动子造血因子基因疗法具有化疗后促进造血恢复作用。 展开更多

关键词 早期生长因子 启动子 GM-CSF 基因疗法 阿霉素

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