目的:分析不同疾病诊断相关分组(Diagnosis Related Groups,DRG)的普通外科住院患者护理难度,为普通外科护理人力配置及绩效管理提供依据。方法:采用专家会议法确定普通外科住院患者护理难度评分表,采用系统抽样法抽取20个DRG组共400份...目的:分析不同疾病诊断相关分组(Diagnosis Related Groups,DRG)的普通外科住院患者护理难度,为普通外科护理人力配置及绩效管理提供依据。方法:采用专家会议法确定普通外科住院患者护理难度评分表,采用系统抽样法抽取20个DRG组共400份病历资料,邀请24名普通外科护理专家对患者进行住院期间的护理难度评分。结果:普通外科消化系统疾病及功能障碍与肝、胆、胰疾病及功能障碍患者的护理难度均明显高于皮肤、皮下组织及乳腺疾病及功能障碍与内分泌、营养、代谢疾病及功能障碍患者的护理难度;普通外科DRG组护理难度评分介于23.10~60.18,不同DRG组的护理难度存在差异,其中HC39(除胆囊切除手术以外的胆道手术组)护理难度最高,JB39(其他乳房手术)护理难度最低。结论:不同DRG的护理难度具有明显差异,普通外科不同亚专科护理人力资源配置及绩效管理应予以考虑。展开更多
目的构建通用流感mRNA疫苗并全面评价其免疫保护效果。方法优化流感病毒株A/California/04/2009的血凝素(hemagglutinin,HA)、核蛋白(nucleoprotein,NP)和基质蛋白2胞外区(matrix protein 2 ectodomain,M2e)抗原序列,并将HA、NP和3个串...目的构建通用流感mRNA疫苗并全面评价其免疫保护效果。方法优化流感病毒株A/California/04/2009的血凝素(hemagglutinin,HA)、核蛋白(nucleoprotein,NP)和基质蛋白2胞外区(matrix protein 2 ectodomain,M2e)抗原序列,并将HA、NP和3个串联的M2e(3M2e)分别克隆至pcDNA3.1载体,通过线性化、体外转录、酶学法加帽、酶促加尾合成mRNA,命名为mRNA-HA、mRNA-NP和mRNA-3M2e。3种mRNA分别转染293T细胞后,通过免疫荧光实验鉴定蛋白的表达。利用脂质纳米颗粒分别包裹mRNA-HA、mRNA-NP和mRNA-3M2e并测量其粒径和电位。再将3种mRNA等体积混合制备成Comb-mRNA疫苗。将28只6周雌性Balb/c小鼠(体质量为18~22 g)按简单随机分组法分为2组:LNP组(n=14)和Comb-mRNA组(n=14)。通过血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)、微量中和(microneutralization,MN)实验评价流感mRNA疫苗诱导小鼠产生的血清抗体滴度;通过流式细胞术评价Comb-mRNA疫苗诱导的细胞免疫反应。采用5LD_(50)野生型H1N1流感病毒株感染小鼠评价Comb-mRNA疫苗的免疫保护效果。结果成功构建mRNA-HA、mRNA-NP和mRNA-3M2e,且3种mRNA均能在293T细胞表达。脂质纳米颗粒包裹mRNA平均粒径为(119.53±6.5)nm,平均电位为(-8.23±1.3)mV。与LNP组比较,Comb-mRNA组疫苗的HI几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)达179.6,MN的GMT达201.6,同时诱导IFNγ+CD4+/CD8+T细胞比例升高。Comb-mRNA组在加强免疫后2周能够提供对5LD_(50)野生流感H1N1亚型病毒的保护。结论通用流感疫苗候选疫苗Comb-mRNA能够诱导小鼠免疫反应并保护小鼠免受病毒感染。展开更多
目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进...目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进一步将HepG2细胞分为对照(Control)组、阴性对照(NC)组和沉默CKAP2(siCKAP2)组。NC组和siCKAP2组细胞分别转染siControl和siCKAP2。采用CKK-8法检测细胞活性,BrdU掺入法检测细胞增殖,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法检测cleavedcaspase 3,Bax,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin以及磷酸化的Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和磷酸化的信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白质表达水平。结果:与正常肝细胞L02比较,CKAP2在肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721中的表达显著上调(均P<0.05)。与NC组比较,siCKAP2组细胞活性和增殖率显著下降(均P<0.05);细胞凋亡率升高,cleaved-caspase 3和Bax的蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);细胞迁移和侵袭显著减少(均P<0.05);E-cadherin蛋白质表达水平显著上调,Vimentin,Ncadherin,磷酸化的JAK2和磷酸化的STAT3的蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默CKAP2基因抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,JAK2/STAT3信号通路可能参与这些过程。展开更多
文摘目的:分析不同疾病诊断相关分组(Diagnosis Related Groups,DRG)的普通外科住院患者护理难度,为普通外科护理人力配置及绩效管理提供依据。方法:采用专家会议法确定普通外科住院患者护理难度评分表,采用系统抽样法抽取20个DRG组共400份病历资料,邀请24名普通外科护理专家对患者进行住院期间的护理难度评分。结果:普通外科消化系统疾病及功能障碍与肝、胆、胰疾病及功能障碍患者的护理难度均明显高于皮肤、皮下组织及乳腺疾病及功能障碍与内分泌、营养、代谢疾病及功能障碍患者的护理难度;普通外科DRG组护理难度评分介于23.10~60.18,不同DRG组的护理难度存在差异,其中HC39(除胆囊切除手术以外的胆道手术组)护理难度最高,JB39(其他乳房手术)护理难度最低。结论:不同DRG的护理难度具有明显差异,普通外科不同亚专科护理人力资源配置及绩效管理应予以考虑。
文摘目的构建通用流感mRNA疫苗并全面评价其免疫保护效果。方法优化流感病毒株A/California/04/2009的血凝素(hemagglutinin,HA)、核蛋白(nucleoprotein,NP)和基质蛋白2胞外区(matrix protein 2 ectodomain,M2e)抗原序列,并将HA、NP和3个串联的M2e(3M2e)分别克隆至pcDNA3.1载体,通过线性化、体外转录、酶学法加帽、酶促加尾合成mRNA,命名为mRNA-HA、mRNA-NP和mRNA-3M2e。3种mRNA分别转染293T细胞后,通过免疫荧光实验鉴定蛋白的表达。利用脂质纳米颗粒分别包裹mRNA-HA、mRNA-NP和mRNA-3M2e并测量其粒径和电位。再将3种mRNA等体积混合制备成Comb-mRNA疫苗。将28只6周雌性Balb/c小鼠(体质量为18~22 g)按简单随机分组法分为2组:LNP组(n=14)和Comb-mRNA组(n=14)。通过血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)、微量中和(microneutralization,MN)实验评价流感mRNA疫苗诱导小鼠产生的血清抗体滴度;通过流式细胞术评价Comb-mRNA疫苗诱导的细胞免疫反应。采用5LD_(50)野生型H1N1流感病毒株感染小鼠评价Comb-mRNA疫苗的免疫保护效果。结果成功构建mRNA-HA、mRNA-NP和mRNA-3M2e,且3种mRNA均能在293T细胞表达。脂质纳米颗粒包裹mRNA平均粒径为(119.53±6.5)nm,平均电位为(-8.23±1.3)mV。与LNP组比较,Comb-mRNA组疫苗的HI几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)达179.6,MN的GMT达201.6,同时诱导IFNγ+CD4+/CD8+T细胞比例升高。Comb-mRNA组在加强免疫后2周能够提供对5LD_(50)野生流感H1N1亚型病毒的保护。结论通用流感疫苗候选疫苗Comb-mRNA能够诱导小鼠免疫反应并保护小鼠免受病毒感染。
文摘目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进一步将HepG2细胞分为对照(Control)组、阴性对照(NC)组和沉默CKAP2(siCKAP2)组。NC组和siCKAP2组细胞分别转染siControl和siCKAP2。采用CKK-8法检测细胞活性,BrdU掺入法检测细胞增殖,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法检测cleavedcaspase 3,Bax,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin以及磷酸化的Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和磷酸化的信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白质表达水平。结果:与正常肝细胞L02比较,CKAP2在肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721中的表达显著上调(均P<0.05)。与NC组比较,siCKAP2组细胞活性和增殖率显著下降(均P<0.05);细胞凋亡率升高,cleaved-caspase 3和Bax的蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);细胞迁移和侵袭显著减少(均P<0.05);E-cadherin蛋白质表达水平显著上调,Vimentin,Ncadherin,磷酸化的JAK2和磷酸化的STAT3的蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默CKAP2基因抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,JAK2/STAT3信号通路可能参与这些过程。
