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神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探 被引量：11
1
作者 辛宏 颜光涛 +2 位作者 郝秀华 王录焕 李英丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期223-227,共5页
目的：观察神经酰胺对ＨＬ６０及中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡产生的影响，探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法：采用ＤＮＡ凝胶电泳，流式细胞术，光镜及ＲＴＰＣＲ等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因ｂｃｌ２，ｃｍ... 目的：观察神经酰胺对ＨＬ６０及中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡产生的影响，探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法：采用ＤＮＡ凝胶电泳，流式细胞术，光镜及ＲＴＰＣＲ等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因ｂｃｌ２，ｃｍｙｃｍＲＮＡ表达分析。结果：神经酰胺（Ｃ２ｃｅｒａｍｉｄｅ），肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）及长春新碱（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）均可不同程度地诱导ＨＬ６０及成熟ＰＭＮ产生凋亡，ＣＰＫ激活剂ＰＭＡ，Ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ无诱凋作用，并对ＴＮＦα，Ｃ２ｃｅｒａｍｉｄｅ及Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ诱导的凋亡有不同程度的抑制；上述药物刺激后ｂｃｌ２，ｃｍｙｃｍＲＮＡ表达在ＨＬ６０细胞中呈明显下调趋势，ｃｍｙｃｍＲＮＡ表达在ＰＭＮ中也呈轻度下调。结论：神经酰胺可作为ＨＬ６０、ＰＭＮ胞内介质参与凋亡信号的传导，且与ＣＰＫ途径及ｂｃｌ２，ｃｍｙｃ基因表达相关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 神经酰胺 BCL-2基因 C-MYC基因
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微囊化牛嗜铬细胞移植于脊髓蛛网膜下镇痛作用的研究 被引量：30
2
作者 何立敏 薛毅珑 +7 位作者 黎立 张莉 王振福 李新建 崔忻 李留树 王捷 朱建华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期248-250,共3页
采用微囊化牛嗜铬细胞（ＢＣＣ）异种移植于大鼠和癌痛病人脊髓蛛网膜下方法，观察ＢＣＣ镇痛作用和海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊对异种移植物的免疫保护作用。结果显示，移植后微囊组和非微囊组大鼠基础热痛阈和尼古丁... 采用微囊化牛嗜铬细胞（ＢＣＣ）异种移植于大鼠和癌痛病人脊髓蛛网膜下方法，观察ＢＣＣ镇痛作用和海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊对异种移植物的免疫保护作用。结果显示，移植后微囊组和非微囊组大鼠基础热痛阈和尼古丁激发热痛阈明显升高；微囊组８０％受试鼠的镇痛作用持续时间超过２７０天。将微囊化ＢＣＣ植入８例癌痛病人脊髓蛛网膜下，除１例镇痛效果不明显外７例缓解，减少或停止使用止痛药，镇痛作用持续时间＞６０天。表明ＢＣＣ异种移植于脊髓蛛网膜下可产生明显的镇痛作用，ＡＰＡ微囊具有良好的免疫隔离作用。 展开更多
关键词 止痛 嗜铬细胞 异种移植 微胶囊 大鼠
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小干扰RNA抑制LRP16基因表达限制了MCF-7乳腺癌细胞增殖 被引量：22
3
作者 韩为东 李琦 +4 位作者 赵亚力 母义明 李雪 宋海静 陆祖谦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期113-119,共7页
雌激素雌二醇上调人乳腺癌细胞MCF 7中LRP16基因表达 ,该基因过表达促进MCF 7细胞增殖 .为进一步探讨LRP16基因不同表达水平对MCF 7细胞增殖的影响以及对雌激素的反应性增殖能力 ,采用针对LRP16基因特异的小干扰RNA策略 ,通过逆转录病... 雌激素雌二醇上调人乳腺癌细胞MCF 7中LRP16基因表达 ,该基因过表达促进MCF 7细胞增殖 .为进一步探讨LRP16基因不同表达水平对MCF 7细胞增殖的影响以及对雌激素的反应性增殖能力 ,采用针对LRP16基因特异的小干扰RNA策略 ,通过逆转录病毒介导及抗性筛选构建了LRP16基因被稳定抑制的 2个MCF 7细胞系 ,针对绿色荧光蛋白的干扰序列作为阴性对照 .Northern印迹实验检测了LRP16基因在各个细胞株中mNRA的水平 ,与对照组细胞比较 ,针对LRP16基因不同位置的 2个小干扰RNA可分别将该基因抑制 90 %和 6 0 % .细胞增殖试验结果显示 ,MCF 7细胞中LRP16基因表达抑制率越高 ,细胞增殖速率减慢越显著 (P <0 0 5 ) ;软琼脂集落形成试验结果显示 ,抑制LRP16基因在MCF 7细胞中表达 ,限制了细胞锚定非依赖性生长 ;细胞周期分析结果表明 ,LRP16基因抑表达使MCF 7细胞G1 S周期转换受抑 ;Western印迹结果表明 ,LRP16基因表达抑制的细胞中细胞周期蛋白E及细胞周期蛋白D1蛋白水平显著下调 ,但未检测到P5 3及Rb蛋白表达水平的影响 .雌二醇刺激的增殖实验结果显示 ,抑制LRP16基因表达没有消除MCF 7细胞的反应性增殖特征 .上述结果表明 ,LRP16基因表达量与MCF 7细胞增殖能力密切相关 ,抑制其表达可有效限制MCF 7细胞的增殖能力 ,提? 展开更多
关键词 LRP16 小干扰RNA MCF-7 增殖 软琼脂集落形成试验 G1/S期调控 雌二醇
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失血性休克再灌注损伤时血浆磷脂酶A_2及其水解产物的变化 被引量：11
4
作者 颜光涛 郝秀华 +3 位作者 王录焕 田亚平 王成彬 李振甲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期414-418,共5页
目的和方法：采用家兔失血性休克／再灌注（Ｓ／Ｒ）模型，以放射免疫法分析了动物血清中磷脂酶Ａ２及其活性产物血栓素（ＴＸＢ２）、前列环素（ＰＧＩ２）在损伤过程中的变化规律，同时观察了氯喹及其同类化合物磷酸萘酚喹、抗氧化剂... 目的和方法：采用家兔失血性休克／再灌注（Ｓ／Ｒ）模型，以放射免疫法分析了动物血清中磷脂酶Ａ２及其活性产物血栓素（ＴＸＢ２）、前列环素（ＰＧＩ２）在损伤过程中的变化规律，同时观察了氯喹及其同类化合物磷酸萘酚喹、抗氧化剂黄芪酮对Ｓ／Ｒ损伤后上述ＰＬＡ２活性产物的影响。结果：氯喹可明显降低ＰＬＡ２，使ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值恢复于接近正常；磷酸酚喹和黄芪酮也可明显降低ＰＬＡ２，使ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值显著低于Ｓ／Ｒ损伤组：ＨＣＯ－３和ｔＣＯ２也得以接近于正常水平。结论：Ｓ／Ｒ过程中ＴＸＢ２的增高导致的ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值改变可能对循环有重要影响；氯喹类化合物及环氧化物酶抑制剂可能通过抑制ＰＬＡ２活性及降低ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值。 展开更多
关键词 休克 出血性休克 磷脂酶A类 再灌注损伤
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APA微囊对免疫细胞和细胞因子隔离效应的研究 被引量：23
5
作者 李崇辉 薛毅珑 +4 位作者 罗芸 李新建 李雁凌 刘成贵 潘长玉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期259-261,共3页
测定海藻酸钠 多聚赖氨酸 海藻酸钠 (APA)微囊对免疫细胞和细胞因子的隔离效应。方法 :将NK细胞和IL 2、TNF α的活性测定方法用于微囊免疫隔离效果的评价。结果 :NK细胞对微囊化K5 6 2靶细胞的细胞毒实验表明 ,微囊可有效地保护囊内... 测定海藻酸钠 多聚赖氨酸 海藻酸钠 (APA)微囊对免疫细胞和细胞因子的隔离效应。方法 :将NK细胞和IL 2、TNF α的活性测定方法用于微囊免疫隔离效果的评价。结果 :NK细胞对微囊化K5 6 2靶细胞的细胞毒实验表明 ,微囊可有效地保护囊内细胞不受NK细胞的杀伤作用 ;IL 2 (15 .4kD)和TNF α (5 1kD)可通过微囊膜进入囊内 ,并分别支持囊内IL 2依赖细胞的生存以及对微囊内的L92 9靶细胞发挥杀伤作用。结论 :APA微囊可有效地隔离细胞免疫排斥反应 ,但某些细胞因子可通过微囊膜 ,成为影响微囊化细胞在宿主体内生存的可能因素。 展开更多
关键词 免疫隔离 细胞因子 微囊化细胞移植 APA微囊
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碱性成纤维细胞生长因子诱导表皮细胞去分化的初步研究 被引量：12
6
作者 孙晓艳 付小兵 +2 位作者 伊海英 刘惠玲 孙同柱 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期2003-2007,共5页
目的初步探索表皮细胞体外去分化模型的建立方法。方法HEKa细胞体外培养6～7代时开始出现老化迹象,细胞体积膨大,形态发生明显改变。加入浓度为100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fac-tor,bFGF)诱导液分别培养6... 目的初步探索表皮细胞体外去分化模型的建立方法。方法HEKa细胞体外培养6～7代时开始出现老化迹象,细胞体积膨大,形态发生明显改变。加入浓度为100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fac-tor,bFGF)诱导液分别培养6、12、24、48、72h后,MTT法检测bFGF对表皮细胞体外生长的促进作用。同时采用免疫细胞化学染色法、流式细胞检测技术、RT-PCR法检测bFGF诱导培养后,表皮细胞的表型及功能的改变。结果MTT检测结果显示浓度为100ng/ml,诱导时间为36～48h为诱导表皮细胞去分化的最佳实验条件。在bFGF的作用之下,老化的HEKa细胞周围开始出现新生的表皮干细胞样克隆。免疫细胞化学检测结果表明,实验组细胞中β1整合素、CK19、CK14的表达增强,而CK10作为终末分化细胞的标志,在bFGF诱导组中的表达明显降低。流式细胞检测分析显示bFGF作用后,实验组CK19表达阳性的细胞与对照组相比明显增多(分别为74.77%和15.74%);CK14表达阳性的细胞也由原来的67.26%增加至被检测细胞总数的87.14%。而bFGF诱导作用后,被检测细胞中表达CK10阳性的细胞数量较对照组明显下降(分别为4.56%和98.56%)。此外,RT-PCR检测结果同样再次支持了表皮细胞去分化的理论。在bFGF诱导组中,β1整合素、CK19、CK14mRNA转录水平明显上调,而CK10mRNA表达则明显下降。结论bFGF能够在体外诱导表皮细胞逆转分化形成幼稚型表皮前体干细胞,但其涉及具体机制需要进一步研究。 展开更多
关键词 表皮细胞 去分化 干细胞 免疫细胞化学 流式细胞检测 MTT RT—PCR
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自体细胞因子诱导的杀伤细胞联合IL-2治疗老年人血液系统恶性肿瘤的临床经验探讨 被引量：9
7
作者 卢学春 杨波 +5 位作者 朱宏丽 韩为东 王瑶 刘洋 代汉仁 姚善谦 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1270-1272,共3页
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 血液肿瘤 老年人
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脓毒症后leptin对肠道功能的影响及对肝肾功能的保护作用 被引量：8
8
作者 颜光涛 薛辉 +3 位作者 林季 郝秀华 张凯 王录焕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1566-1569,共4页
目的:研究脓毒症对肝、肾功能及肠道相关酶活性的影响,探讨瘦素(leptin)在急性炎症反应中的作用。方法:建立小鼠盲肠结扎致脓毒症模型,采用96孔分光光度法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿酸(UA)和肠组织匀浆液中髓过氧化物酶(MPO)、... 目的:研究脓毒症对肝、肾功能及肠道相关酶活性的影响,探讨瘦素(leptin)在急性炎症反应中的作用。方法:建立小鼠盲肠结扎致脓毒症模型,采用96孔分光光度法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿酸(UA)和肠组织匀浆液中髓过氧化物酶(MPO)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、超氧化物歧化酶(SOD)等,同时以HE染色方法观察肠道组织病理学改变。结果:脓毒症后6 h,血清UA水平[(521.92±91.86)μmol/L]明显高于假手术组[(330.12±94.15)μmol/L],而12 h ALT[(83.55±40.44)U/L]和UA[(474.03±75.22)μmol/L]均高于假手术组[(66.23±16.80)U/L]和[(320.95±99.14)μmol/L]。采用腹腔内注射leptin(0.1 mg/kg)和吲哚美辛(2 mg/kg),12 h时ALT和UA水平均明显低于脓毒症组(P<0.05)。此外,伴有肠道组织MPO、GST、XOD和SOD活性的改变。结论:在脓毒症过程中,微量leptin体外注射可以发挥改善和稳定肝肾功能的明显作用,其机制可能同其影响肠道多种与自由基、巯基和嘌呤代谢相关酶的功能有关,而且吲哚美辛在一定程度上有类似的效应,但所用剂量明显高于leptin水平。 展开更多
关键词 瘦素 脓毒症 肠 过氧化物酶 肝 肾
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HR-HPV载量与宫颈病变的相关性分析 被引量：32
9
作者 马晓星 李亚里 +12 位作者 胡凌云 宋磊 张全 范文生 李立安 黄柯 伍志强 张燕 张海燕 段玉坤 韩为东 苏红 孟元光 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期477-481,共5页
目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)载量与宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌病变程度的相关性。方法收集解放军总医院2006年1月-2011年8月5年中因宫颈病变行阴道镜活检或手术治疗的1248例患者,根据宫颈病变及临床分期分为5组:宫颈炎组、CI... 目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)载量与宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌病变程度的相关性。方法收集解放军总医院2006年1月-2011年8月5年中因宫颈病变行阴道镜活检或手术治疗的1248例患者,根据宫颈病变及临床分期分为5组:宫颈炎组、CINⅠ组、CIN Ⅱ-Ⅲ组、宫颈癌Ⅰ期组、宫颈癌Ⅱ期组,依据第二代杂交捕获实验(HC-Ⅱ)方法检测所有患者HR-HPV病毒载量(RLU/CO),将其分为0～0.99、1.00～9.99、10.00～99.99、100.00～999.99、1000.00～5个HR-HPV病毒载量组。对宫颈炎、CINⅠ、CIN Ⅱ-Ⅲ、宫颈癌Ⅰ期、宫颈癌Ⅱ期各组中不同的HR-HPV病毒载量进行比较,并分析HR-HPV病毒载量与宫颈病变发生的相关性。结果 CINⅠ组、CIN Ⅱ-Ⅲ组、宫颈癌Ⅰ期、宫颈癌Ⅱ期患者HR-HPV病毒载量(分别为842.1±98 3.9、690.1±795.0、893.1±974.2、699.5±908.3RLU/CO)显著高于宫颈炎患者(274.2±613.6,P<0.05);CINⅠ组和宫颈癌Ⅰ期的病毒载量高于CIN Ⅱ-Ⅲ组(P<0.05)。当HR-HPV病毒载量≥100RLU/CO时,CIN及宫颈癌的发生危险度随病毒载量的增加而增加,但HPV病毒载量分级与宫颈病变病理分级无相关性。对于宫颈鳞癌ⅠB-Ⅱ期患者,当HR-HPV病毒载量≥100RLU/CO时,宫颈癌淋巴结转移的危险性增加(P<0.05),且宫颈肿瘤最大直径≥4cm的危险性增加(P<0.05),而HR-HPV病毒载量与患者年龄、组织学类型、宫颈肌层癌浸润深度及淋巴管浸润无关。结论 HR-HPV病毒载量与CIN及宫颈癌的发生密切相关。病毒载量越高,发生CIN及宫颈癌的危险性越大,且与宫颈鳞癌的临床特征有关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 病毒载量 宫颈上皮内瘤样病变 宫颈肿瘤 比值比
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LRP16通过调控E-钙黏着蛋白的表达促进MCF-7细胞的侵袭生长 被引量：17
10
作者 韩为东 孟元光 +6 位作者 廖代祥 李琦 伍志强 司艺玲 郝好杰 母义明 赵亚力 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期724-732,共9页
LRP16在原代乳腺癌组织中表达水平与雌激素受体α(ERα)表达状态以及腋窝淋巴结侵袭数目密切相关.为研究LRP16基因对乳腺癌MCF7细胞侵袭生长的影响,并探讨涉及的分子机制,采用基质胶黏附实验与Transwell方法,检测内源性LRP16表达抑制MCF... LRP16在原代乳腺癌组织中表达水平与雌激素受体α(ERα)表达状态以及腋窝淋巴结侵袭数目密切相关.为研究LRP16基因对乳腺癌MCF7细胞侵袭生长的影响,并探讨涉及的分子机制,采用基质胶黏附实验与Transwell方法,检测内源性LRP16表达抑制MCF7细胞的体外黏附、侵袭生长与迁移特征.结果表明,抑制LRP16在MCF7细胞中的表达,降低了细胞的体外黏附、侵袭与迁移能力;采用FVB小鼠进行的实验性转移试验结果显示,抑制LRP16显著降低了MCF7细胞的肺转移结节数目;为探索可能的分子机制,采用Western印迹方法,检测了LRP16对乳腺癌转移相关分子MMP2,MMP9,CD44和E钙黏着蛋白表达的影响,结果在LRP16抑制的MCF7细胞中只有E钙黏着蛋白蛋白表达上调.进一步的Northern印迹与免疫组化实验结果表明,抑制LRP16可上调MCF7细胞中E钙黏着蛋白基因的mRNA与蛋白表达水平;共转染与双荧光素酶方法检测LRP16对E钙黏着蛋白基因启动子的表达调控效应,结果显示,LRP16抑制E钙黏着蛋白基因基因5′近端启动子的转录激活,该抑制效应选择性存在于内源性ERα阳性细胞,并且依赖于雌激素的存在;染色质免疫共沉淀方法(ChIP)检测ERα与E钙黏着蛋白基因启动子的相互作用,结果显示,在LRP16基因表达缺陷的MCF7细胞中,ERα抗体沉淀到E钙黏着蛋白基因启动子的DNA序列;上述研究结果表明,抑制LRP16基因表达,削弱了激素依赖型乳腺癌细胞的侵袭生长能力,其分子机制涉及了LRP16通过ERα介导对E钙黏着蛋白基因基因转录激活的调控. 展开更多
关键词 LRP16 E-钙黏着蛋白 雌激素受体Α MCF-7 侵袭生长
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自体CIK细胞联合IL-2治疗老年人B细胞性恶性淋巴瘤的临床研究 被引量：26
11
作者 杨波 卢学春 +7 位作者 朱宏丽 韩为东 王瑶 范辉 李素霞 刘洋 代汉仁 姚善谦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1244-1249,共6页
本研究评价自体CIK细胞联合IL-2治疗老年人B细胞性恶性淋巴瘤的有效性和安全性。采集9例老年B细胞性恶性淋巴瘤患者外周血单个核细胞,在体外经干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,回输细胞数为(2-3)×... 本研究评价自体CIK细胞联合IL-2治疗老年人B细胞性恶性淋巴瘤的有效性和安全性。采集9例老年B细胞性恶性淋巴瘤患者外周血单个核细胞,在体外经干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,回输细胞数为(2-3)×109个,回输后应用IL-2 100万U/day,皮下注射,第1-10天。28天为1个疗程,共完成了64个周期的自体CIK细胞输注。观察治疗前后细胞免疫功能、肿瘤相关生物学指标、影像学特征、疾病缓解情况、生活质量及生存期的变化。结果表明,7例接受8个周期的CIK细胞输注的患者和2例接受4个周期的输注的患者均未出现不良反应。CIK细胞治疗后CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例明显升高(p<0.05),β2微球蛋白、LDH水平显著下降(p<0.05)。所有患者症状改善、生活质量显著提高(p<0.01)。8例达完全缓解,1例完成8周期的CIK细胞输注后曾一度达良好的部分缓解,但因上呼吸道感染并发急性大面积心肌梗死和淋巴瘤持续进展而死亡。结论:自体CIK细胞联合IL-2治疗老年人B细胞性恶性淋巴瘤安全有效。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 恶性淋巴瘤 B细胞性 老年病人
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反义hTERT对胃癌细胞SGC7901 VEGF及其受体表达的影响 被引量：6
12
作者 司艺玲 韩为东 +3 位作者 赵亚力 宋海静 李琦 郝好杰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1061-1063,共3页
目的研究反义hTERT对胃癌细胞SGC7901VEGF及其受体表达的影响,探讨其对肿瘤发展和转移的影响。方法以端粒酶逆转录酶组分hTERTcDNA为模板构建反义hTERT逆转录病毒表达载体,包装重组逆转录病毒后感染胃癌SGC7901细胞,用半定量RTPCR检测... 目的研究反义hTERT对胃癌细胞SGC7901VEGF及其受体表达的影响,探讨其对肿瘤发展和转移的影响。方法以端粒酶逆转录酶组分hTERTcDNA为模板构建反义hTERT逆转录病毒表达载体,包装重组逆转录病毒后感染胃癌SGC7901细胞,用半定量RTPCR检测基因转染前后VEGFC及其受体Flt4mRNA表达水平的变化,免疫组化法检测VEGFC、Flt4蛋白表达。结果反义hTERT稳定转染后SGC7901细胞VEGFC及其受体VEGFR3(Flt4)mRNA和蛋白表达均受到明显抑制。结论反义hTERT可有效抑制胃癌细胞VEGFC及其受体Flt4的表达,阻断肿瘤血管和淋巴途径转移。 展开更多
关键词 DNA 反义 人端粒酶逆转录酶 胃肿瘤 血管内皮生长因子类
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胃癌相关基因GCRG213真核表达载体的构建及其对胃癌细胞生长特性的影响 被引量：5
13
作者 高利利 吴本俨 +5 位作者 王孟薇 王珊 黄海力 伍银桥 尤纬缔 王卫华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期881-884,共4页
目的研究胃癌相关基因GCRG213正义、反义转染对胃癌细胞MKN45生长特性的影响。方法将从pGEM-T质粒上扩增出的胃癌相关基因GCRG213的DNA片段,按正向、反向克隆入真核表达载体pcDNA3·1(+)。测序正确的重组子pcDNA3·1-a(含GCRG21... 目的研究胃癌相关基因GCRG213正义、反义转染对胃癌细胞MKN45生长特性的影响。方法将从pGEM-T质粒上扩增出的胃癌相关基因GCRG213的DNA片段,按正向、反向克隆入真核表达载体pcDNA3·1(+)。测序正确的重组子pcDNA3·1-a(含GCRG213正向克隆)、pcDNA3·1-b(含GCRG213反向克隆)和空载体经脂质体转染人胃癌细胞系MKN45细胞,采用半定量RT-PCR及Westernblot方法比较转染不同质粒的MKN45细胞中GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异。选取稳定转染不同质粒的MKN45细胞,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪分析细胞的增殖状态,AnnexinVFITC/PI双标记法检测凋亡细胞。结果经测序证实,GCRG213正向克隆和反向克隆正确插入真核表达载体pcDNA3·1(+)。与对应的空载体比较,转染pcD-NA3·1-a的MKN45细胞中mRNA的表达上调35·4%,蛋白的表达上调49·4%,而转染pcDNA3·1-b的MKN45细胞中mRNA的表达下调32·1%,蛋白的表达下调50·3%。转染了GCRG213正向克隆的MKN45细胞生长增殖速度加快,凋亡率下降,而转染了GCRG213反向克隆的MKN45细胞生长增殖速度减慢,凋亡率增加。结论胃癌相关基因GCRG213可促进肿瘤细胞的生长,抑制肿瘤细胞凋亡,可能是恶性肿瘤癌变的促进因素之一。 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因 GCRG213 转染 细胞凋亡
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瘦素对肠缺血再灌注损伤大鼠外周血TNF-α和IL-10表达及小肠局部病理损伤的影响 被引量：6
14
作者 王晓辉 王录焕 +2 位作者 薛辉 邓子辉 颜光涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期250-253,共4页
目的:探讨瘦素(leptin)对于大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型,99只Wistar大鼠随机分成11组:假手术组(sham)、肠缺血45min再灌注15min组(I45R15)、I45R30、I45R60、I45R180、I45R360、和相应... 目的:探讨瘦素(leptin)对于大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型,99只Wistar大鼠随机分成11组:假手术组(sham)、肠缺血45min再灌注15min组(I45R15)、I45R30、I45R60、I45R180、I45R360、和相应时间点的leptin(0.2mg/kg)治疗组,每组9只。检测再灌注不同时间点大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)水平的动态变化,并观察小肠组织病理学的变化。结果:与假手术组相比,肠缺血再灌注组血清中TNF-α随着时间变化显著升高,IL-10水平也高于假手术组(P<0.05),病理显示肠道明显损伤;与肠缺血再灌注组相比,Lep-tin治疗后血清中的TNF-α水平显著降低,IL-10水平显著升高,小肠组织损伤明显减轻(P<0.05)。结论:Leptin可通过下调血清中TNF-α、上调IL-10水平减轻肠缺血再灌注损伤对大鼠肠道的局部损伤。 展开更多
关键词 再灌注损伤 瘦素 肠黏膜 细胞因子
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亚健康概念及其研究进展 被引量：75
15
作者 袁云娥 吴小苏 谭燕 《中国医院》 2004年第4期55-59,共5页
本文对亚健康概念、范畴、亚健康状态和表现及对人体健康危害、如何维护等方面进行文献资料复习整理和综述,对亚健康研究发展趋势进行了探讨。
关键词 亚健康 睡眠障碍 危害 人际关系 原因 预防 治疗
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含胸腺肽增强免疫的自体CIK细胞输注联合小剂量IL-2方案治疗老年人B-CLL的近期疗效观察 被引量：17
16
作者 蔡力力 杨洋 +18 位作者 杨波 朱宏丽 卢学春 张文英 于睿莉 迟小华 王瑶 代汉仁 韩为东 范辉 李素霞 刘洋 冉海红 林洁 脱帅 脱朝伟 张峰 曹军平 姚善谦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期564-570,共7页
本研究评价含胸腺肽增强免疫的自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)输注联合小剂量IL-2方案治疗老年人B细胞性慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)的安全性及疗效。以胸腺肽α1作为增强免疫方案,用法为1.6 mg/d,皮下注射,14 d为1个周期。采集5例B-CL... 本研究评价含胸腺肽增强免疫的自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)输注联合小剂量IL-2方案治疗老年人B细胞性慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)的安全性及疗效。以胸腺肽α1作为增强免疫方案,用法为1.6 mg/d,皮下注射,14 d为1个周期。采集5例B-CLL老年患者外周血单个核细胞,每周采集1次,分别在应用胸腺肽α1前和应用1个周期后各采集3次,在体外经干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)及抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,观察对比应用胸腺肽α1前后CIK细胞在扩增数量、效应细胞扩增倍数、淋巴细胞亚群比例及体外杀瘤活性的变化。5例患者在接受胸腺肽α1治疗后开始进行自体CIK细胞联合小剂量IL-2方案免疫治疗,具体为:胸腺肽α1 1.6 mg/d,皮下注射,隔日1次;每次回输CIK细胞数为(4-6)×109个,回输后应用IL-2 1 mU/d,皮下注射,第1-10天。28 d为1个疗程,动态观察CIK细胞治疗前后细胞免疫功能、肿瘤相关生物学指标、疾病缓解情况及感染频次、程度的变化。结果表明:胸腺肽α1增强免疫治疗后体外诱导CIK细胞在扩增数量、效应细胞扩增倍数、比例及体外杀瘤活性4个方面均明显高于胸腺肽α1治疗前(P<0.05)。5例患者共接受46个疗程的CIK细胞联合IL-2治疗,未观察到明显不良反应。治疗后5例患者一般情况得到不同程度改善,CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例明显升高(P<0.05),血清β2微球蛋白水平显著下降(P<0.05),感染频次减少,程度减轻(P<0.05);3例由部分缓解(PR)达到完全缓解,1例由疾病稳定(SD)达到PR,1例由疾病进展达到SD。结论:含胸腺肽增强免疫的自体CIK细胞联合小剂量IL-2方案治疗老年人B-CLL安全有效。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 胸腺肽 白介素2 慢性淋巴细胞白血病 B细胞性 老年人
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热断层成像系统鉴别诊断乳腺肿块 被引量：9
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作者 袁云娥 王青 +4 位作者 李荣 宋三泰 李基业 刘忠齐 柳经斌 《中国医学影像技术》 CSCD 2004年第12期1803-1805,共3页
目的　探讨热断层成像 (TTM )检查对女性乳房肿块的诊断价值。方法　对 78例乳房肿块患者进行TTM检查 ,其中 70例同期行钼靶检查 ,以手术病理结果为对照。结果　 78例中TTM诊断恶性病变 41例 ,良性病变 3 7例 ,真阳性率和真阴性率分别为... 目的　探讨热断层成像 (TTM )检查对女性乳房肿块的诊断价值。方法　对 78例乳房肿块患者进行TTM检查 ,其中 70例同期行钼靶检查 ,以手术病理结果为对照。结果　 78例中TTM诊断恶性病变 41例 ,良性病变 3 7例 ,真阳性率和真阴性率分别为 92 .7%和 94.6% ,钼靶对乳腺肿块的真阳性率和真阴性率分别 88.2 %和 86.1% (P <0 .0 0 1)。结论　TTM对乳腺良、恶性肿块的鉴别诊断具有重要价值。 展开更多
关键词 热断层成像 乳腺 乳房X线摄影术
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自体CIK细胞输注治疗老年骨髓增生异常综合征的临床研究 被引量：19
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作者 刘洋 包尔宁 +6 位作者 杨波 卢学春 朱宏丽 韩为东 王瑶 代汉仁 姚善谦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期787-792,共6页
本研究旨在评价自体细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)治疗老年骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)的安全性和有效性。采集6例老年MDS患者外周血单个核细胞,在体外经细胞刺激因子培养,诱导成... 本研究旨在评价自体细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)治疗老年骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)的安全性和有效性。采集6例老年MDS患者外周血单个核细胞,在体外经细胞刺激因子培养,诱导成CIK细胞,回输至患者体内,28天为1个疗程。观察CIK细胞回输后患者体内效应细胞的比例变化、不良反应以及对感染的发生、血红蛋白水平和对输血依赖程度的影响。结果表明,经CIK细胞治疗后CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例明显升高(p<0.05),所有患者未出现严重不良反应。CIK细胞治疗有效地减少了MDS患者感染的发生,缩短了高热时间。在疾病稳定期,CIK细胞输注可减少红细胞的输注量,稳定血红蛋白水平,但不能改变MDS向高危亚型转化的自然病程。结论 :自体CIK细胞输注治疗老年人MDS安全有效。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 骨髓增生异常综合征 老年人 细胞输注
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免疫功能检测对评估细胞因子诱导的自体杀伤细胞治疗老年血液肿瘤疗效的研究 被引量：16
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作者 蔡力力 杨波 +6 位作者 卢学春 朱宏丽 韩为东 王瑶 刘洋 代汉仁 姚善谦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1250-1255,共6页
本研究探讨细胞因子诱导的自体杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞输注对造血系统恶性肿瘤老年患者免疫功能的影响及其与疗效的关系。采集20例造血系统恶性肿瘤老年患者外周血单个核细胞,在体外经重组干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(I... 本研究探讨细胞因子诱导的自体杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞输注对造血系统恶性肿瘤老年患者免疫功能的影响及其与疗效的关系。采集20例造血系统恶性肿瘤老年患者外周血单个核细胞,在体外经重组干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,回输细胞数为(2-3)×109个,回输后第1-10天应用IL-2 100万单位/天,皮下注射。28天为1个疗程,共完成了136个周期的自体CIK细胞输注。观察治疗前后细胞免疫功能变化,结合肿瘤相关生物学指标、缓解情况、生活质量及生存期的变化进行疗效分析。结果表明,14例接受8个疗程的CIK细胞输注,6例接受4个疗程的输注,回输后所有患者未出现不良反应。CIK细胞治疗后外周血CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例明显升高(p<0.05),β2微球蛋白、LDH水平显著下降(p<0.05)。所有患者症状改善、生活质量显著提高(p<0.01)。11例达完全缓解,7例达部分缓解,2例疾病稳定。结论:自体CIK细胞输注可提高造血系统恶性肿瘤老年患者的细胞免疫功能且安全有效。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 造血系恶性肿瘤 免疫功能 老年人
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免疫细胞衰老的研究进展 被引量：9
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作者 杨波 迟小华 +6 位作者 卢学春 脱帅 张峰 张文英 脱朝伟 韩为东 姚善谦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期782-787,共6页
免疫系统随着年龄的增加而功能退化,出现免疫衰老。人的免疫系统可以分为遗传性/先天性和种系新生两大部分。前者以单核细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞为代表;后者以获得性免疫(B和T淋巴细胞)为代表。在衰老过程中,这两部分均以不同方... 免疫系统随着年龄的增加而功能退化,出现免疫衰老。人的免疫系统可以分为遗传性/先天性和种系新生两大部分。前者以单核细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞为代表;后者以获得性免疫(B和T淋巴细胞)为代表。在衰老过程中,这两部分均以不同方式出现损伤,但先天性免疫保留相对完好,而获得性免疫的改变具有较强的年龄依赖性。免疫衰老与老年人群肿瘤多发性、感染的易感性和疫苗的低效性密切相关。本文就免疫系统随年龄衰老的特征进行综述。 展开更多
关键词 免疫细胞 免疫衰老 淋巴细胞 肿瘤
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