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端粒酶逆转录酶激活脐静脉内皮细胞端粒酶活性
被引量：
1
1
作者
李琦
韩为东
+3 位作者
郝好杰
宋海静
马学斌
赵亚力
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2003年第5期328-330,共3页
目的 探讨外源性端粒酶逆转录酶 (hTERT)能否激活人脐静脉内皮细胞端粒酶活性 ,为建立体外人脐静脉内皮细胞系奠定基础。方法 用逆转录病毒转染法 ,将编码hTERT片段逆转录病毒载体与VSV G共转染 2 93 GP2 细胞 ,产生病毒上清液 ,感染...
目的 探讨外源性端粒酶逆转录酶 (hTERT)能否激活人脐静脉内皮细胞端粒酶活性 ,为建立体外人脐静脉内皮细胞系奠定基础。方法 用逆转录病毒转染法 ,将编码hTERT片段逆转录病毒载体与VSV G共转染 2 93 GP2 细胞 ,产生病毒上清液 ,感染原代分离的人脐静脉内皮细胞 (hUVEC) ,以嘌呤霉素筛选。观察细胞生长曲线、第Ⅷ因子、CD34、β 半乳糖苷酶染色、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)等指标。 结果 细胞生长曲线显示培养至 30代的转染细胞生长速度基本与原代培养脐静脉内皮细胞一致但快于原代培养传至第 10代内皮细胞 ;RT PCR结果转染细胞有特异扩增 ;衰老指标 β 半乳糖苷酶染色显示转染后细胞胞浆内着染阳性细胞数明显少于第 10代内皮细胞。结论 外源性hTERT转入原代培养人脐静脉内皮细胞 ,可重现其端粒酶活性 。
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关键词
端粒
末端转移酶
脐静脉
细胞培养
细胞衰老
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职称材料
题名
端粒酶逆转录酶激活脐静脉内皮细胞端粒酶活性
被引量：
1
1
作者
李琦
韩为东
郝好杰
宋海静
马学斌
赵亚力
机构
解放军总医院基础医学研究所分子生物学研究室
出处
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2003年第5期328-330,共3页
文摘
目的 探讨外源性端粒酶逆转录酶 (hTERT)能否激活人脐静脉内皮细胞端粒酶活性 ,为建立体外人脐静脉内皮细胞系奠定基础。方法 用逆转录病毒转染法 ,将编码hTERT片段逆转录病毒载体与VSV G共转染 2 93 GP2 细胞 ,产生病毒上清液 ,感染原代分离的人脐静脉内皮细胞 (hUVEC) ,以嘌呤霉素筛选。观察细胞生长曲线、第Ⅷ因子、CD34、β 半乳糖苷酶染色、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)等指标。 结果 细胞生长曲线显示培养至 30代的转染细胞生长速度基本与原代培养脐静脉内皮细胞一致但快于原代培养传至第 10代内皮细胞 ;RT PCR结果转染细胞有特异扩增 ;衰老指标 β 半乳糖苷酶染色显示转染后细胞胞浆内着染阳性细胞数明显少于第 10代内皮细胞。结论 外源性hTERT转入原代培养人脐静脉内皮细胞 ,可重现其端粒酶活性 。
关键词
端粒
末端转移酶
脐静脉
细胞培养
细胞衰老
Keywords
telomerase
vmbilical veins
cell culture
cell aging
分类号
Q813.1 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
端粒酶逆转录酶激活脐静脉内皮细胞端粒酶活性
李琦
韩为东
郝好杰
宋海静
马学斌
赵亚力
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2003
1
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