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人胆酸转运蛋白基因的克隆、亚细胞定位及其在肾组织中的表达
1
作者
白雪源
马玉香
+5 位作者
罗成华
师锁柱
侯剀
冯哲
傅博
陈香美
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期335-339,共5页
目的:克隆人肾与小肠ASBT(顶端Na+/胆汁酸协同转运蛋白)基因并比较2者的序列差别,明确ASBT蛋白在肾小管上皮的亚细胞定位及在人肾组织中的表达情况。方法:从人肾和小肠组织中提取总RNA,然后用带有8肽FLAG标签的PCR引物通过RT-PCR技术扩...
目的:克隆人肾与小肠ASBT(顶端Na+/胆汁酸协同转运蛋白)基因并比较2者的序列差别,明确ASBT蛋白在肾小管上皮的亚细胞定位及在人肾组织中的表达情况。方法:从人肾和小肠组织中提取总RNA,然后用带有8肽FLAG标签的PCR引物通过RT-PCR技术扩增ASBT全长cDNA基因并测序,并将其插入真核表达载体中构建ASBT蛋白真核表达载体,然后将其转染到肾小管上皮细胞LLC-PK1中表达并用免疫荧光-激光共聚焦显微镜观察该蛋白的亚细胞定位情况。用免疫组化技术观察ASBT在人肾组织中的表达分布。结果:序列分析结果表明肾小管ASBT基因的序列与小肠ASBT序列完全一致。Western blotting表明ASBT基因在LLC-PK1细胞中得到了正确的表达。共聚焦显微镜分析显示正常ASBT蛋白主要定位于肾小管上皮细胞膜上,与生物信息学的预测结果一致。免疫组化染色表明ASBT蛋白主要表达于人近端肾小管上皮的刷状缘侧,在间质及远端小管没有表达。结论:人肾小管ASBT基因序列与小肠ASBT相同,ASBT蛋白主要表达于近端肾小管上皮细胞管腔侧细胞膜。
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关键词
胆汁酸类
肾小管
亚细胞定位
载体蛋白质类
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题名
人胆酸转运蛋白基因的克隆、亚细胞定位及其在肾组织中的表达
1
作者
白雪源
马玉香
罗成华
师锁柱
侯剀
冯哲
傅博
陈香美
机构
解放军总医院全军肾脏病研究所暨肾病重点实验室
青海大学附属
医院
肾内科
解放军总医院
普外科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期335-339,共5页
基金
国家自然科学基金创新研究群体基金资助项目(No.30121005)
文摘
目的:克隆人肾与小肠ASBT(顶端Na+/胆汁酸协同转运蛋白)基因并比较2者的序列差别,明确ASBT蛋白在肾小管上皮的亚细胞定位及在人肾组织中的表达情况。方法:从人肾和小肠组织中提取总RNA,然后用带有8肽FLAG标签的PCR引物通过RT-PCR技术扩增ASBT全长cDNA基因并测序,并将其插入真核表达载体中构建ASBT蛋白真核表达载体,然后将其转染到肾小管上皮细胞LLC-PK1中表达并用免疫荧光-激光共聚焦显微镜观察该蛋白的亚细胞定位情况。用免疫组化技术观察ASBT在人肾组织中的表达分布。结果:序列分析结果表明肾小管ASBT基因的序列与小肠ASBT序列完全一致。Western blotting表明ASBT基因在LLC-PK1细胞中得到了正确的表达。共聚焦显微镜分析显示正常ASBT蛋白主要定位于肾小管上皮细胞膜上,与生物信息学的预测结果一致。免疫组化染色表明ASBT蛋白主要表达于人近端肾小管上皮的刷状缘侧,在间质及远端小管没有表达。结论:人肾小管ASBT基因序列与小肠ASBT相同,ASBT蛋白主要表达于近端肾小管上皮细胞管腔侧细胞膜。
关键词
胆汁酸类
肾小管
亚细胞定位
载体蛋白质类
Keywords
Bile acids
Kidney tubules
Subcellular localization
Cartier proteins
分类号
Q493.8 [生物学—生理学]
Q735 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
人胆酸转运蛋白基因的克隆、亚细胞定位及其在肾组织中的表达
白雪源
马玉香
罗成华
师锁柱
侯剀
冯哲
傅博
陈香美
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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