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题名叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠的实验
被引量：2
- 1
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作者
刁波
刘琴
王丽萍
张宜
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机构
中国人民解放军广州军区武汉总医院医学实验科
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2012年第7期48-55,F0004,共9页
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基金
湖北省自然科学基金(2010CDZ030)
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文摘
目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物CD105、CD45、CD44、CD29的表达;免疫荧光法检测神经元特异性烯醇酶(NSE成熟神经元的特异性标志)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP胶质细胞的标记物)的表达;平衡木实验检测大鼠运动协调与整和能力;Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;HE染色及Brdu免疫组化实验观察脑组织形态学变化;酶联免疫吸附试验检测大鼠脑组中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL-2、Bax、Caspase-3的表达。结果分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测发现细胞阳性表达CD44、CD29,阴性表达CD105、CD45,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE或GFAP阳性细胞。实验表明,叶酸与成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠模型后能显著改善其行为学变化,减轻脑组织的炎症反应,恢复受损神经细胞,增加脑组织内BDNF、NGF的含量,上调BCL-2的表达,下调Bax、Caspase-3的表达。结论叶酸联合成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠能显著改善中枢神经功能,对维持神经元微环境稳态具有重要的作用。
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关键词
叶酸
成体神经干细胞
创伤性脑损伤
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Keywords
Folic acid
Adult neural stem cells
Traumatic brain injury
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分类号
R322.8
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名悬浮组织块法分离培养兔成纤维样滑膜细胞
被引量：3
- 2
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作者
刘琴
王丽平
陈芳
陈利锋
张宜
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机构
解放军广州军区武汉总医院医学实验科
解放军广州军区武汉总医院中西医结合科
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期1009-1012,共4页
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文摘
目的:建立兔成纤维样滑膜细胞悬浮组织块分离培养法。方法:取正常兔膝关节滑膜组织,用悬浮组织块法分离培养兔成纤维样滑膜细胞,观察细胞生长状况及形态特征,取第3代对数期细胞,CCK-8法绘制其生长曲线,免疫荧光法检测波形蛋白的表达情况,并与组织块贴壁法进行比较。结果:两种方法体外培养得到的兔成纤维样滑膜细胞形态为长梭形纤维样,细胞生长力较旺盛,生长曲线为典型的"S"形,免疫荧光检测显示第3代细胞强表达波形蛋白。结论:悬浮组织块法可以分离培养出兔成纤样维滑膜细胞,方法简便,效率高,为体外分离培养兔成纤维样滑膜细胞提供了一种新的方法。
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关键词
悬浮组织块法
兔成纤维样滑膜细胞
分离
培养
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Keywords
Suspended explant culture method
Rabbit fibroblast-like synoviocytes
Isolation
Culture
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分类号
R392.33
[医药卫生—免疫学]
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题名低温冻存对兔脂肪间充质干细胞部分生物学特性的影响
被引量：3
- 3
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作者
刘琴
陈芳
杨丽君
王丽平
朱以良
张宜
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机构
解放军广州军区武汉总医院医学实验科
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出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2014年第4期60-64,I0009,共6页
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文摘
目的研究低温冻存对兔脂肪间充质干细胞部分生物学特性的影响。方法采用组织块法分离培养兔脂肪间充质干细胞。用倒置显微镜观察原代细胞的细胞形态,流式细胞仪检测兔脂肪间充质干细胞的免疫表型。取第3代兔脂肪间充质干细胞置于-196℃液氮保存半年,37℃复苏并传至第7代。实验分为两组,实验组为冻存复苏后传至第7代的兔脂肪间充质干细胞,对照组为未冻存的第7代兔脂肪间充质干细胞,用MTT绘制其生长曲线;添加成脂、成骨诱导液进行诱导,油红O、茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测分别进行鉴定。结果体外培养的兔脂肪间充质干细胞呈梭形纤维样细胞形态,生长力旺盛。流式细胞仪检测显示,第3代兔脂肪间充质干细胞强表达CD44、CD90,阴性表达造血细胞相关的表面标志CD45。两组细胞生长曲线呈典型的"S"形,无统计学差异(P>0.05);成脂诱导14 d后,油红O染色呈阳性;成骨诱导2周时茜素红染色阳性,ALP表达活性随成骨诱导时间延长不断增加且无统计学差异(P>0.05)。结论冻存后的兔脂肪间充质干细胞体外生长及多向分化潜能未发生显著变化。
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关键词
间充质干细胞
免疫表型
成脂诱导
成骨分化
低温冻存
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Keywords
Mesenchymal stem cells
Immunophenotypes
Adipogenic induction
Osteogenic differentiation
Cryopreservation
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分类号
Q95-33
[生物学—动物学]
R394.2
[医药卫生—医学遗传学]
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题名改良组织块法分离培养兔成纤维样滑膜细胞
被引量：3
- 4
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作者
陈芳
刘琴
王丽平
陈利峰
张宜
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机构
解放军广州军区武汉总医院医学实验科
解放军广州军区武汉总医院中西医结合科
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2016年第4期75-78,85,共5页
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文摘
目的通过改良组织块细胞培养法,建立一种简单,可行的兔成纤维样滑膜细胞体外培养方法。方法无菌条件下取正常兔膝关节滑膜组织,剔净后剪成碎块,用灭菌滤纸吸掉组织上附着的水分,碎片接种于培养皿,观察细胞生长状况及形态特征。取第3代对数期细胞,用CCK-8法绘制其生长曲线,并用免疫荧光法检测波形蛋白的表达情况。结果体外培养的兔成纤维样滑膜细胞形态为长梭形纤维样,细胞生长力较旺盛,生长曲线为典型的"S"型,免疫荧光检测显示第3代细胞强表达波形蛋白。结论改良组织块法可以分离培养出兔成纤样维滑膜细胞,方法简便,成功率高,满足实验要求。
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关键词
改良组织块法
兔成纤维滑膜细胞
分离
培养
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Keywords
Improved explant culture method
Rabbit fibroblast-like synoviocytes
Isolation
Culture
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分类号
R332
[医药卫生—人体生理学]
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题名脂肪干细胞分离纯化方法研究进展
被引量：2
- 5
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作者
刘琴
王丽平
陈芳
张宜
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机构
解放军广州军区武汉总医院医学实验科
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出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2015年第7期69-73,共5页
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文摘
脂肪干细胞作为种子细胞广泛应用于组织工程中,而获得足够量的、活性高的、高纯度的脂肪干细胞是其在组织工程中应用的前提。本文综述近几年来脂肪干细胞分离纯化方法的研究进展,比较各方法的优缺点,为分离纯化出理想的脂肪干细胞提供理论依据。
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关键词
脂肪干细胞
分离
纯化
组织块贴壁法
酶消化法
免疫磁珠分选法
密度梯度离心法
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Keywords
Adipose-derived stem cells
Isolation
Purification
Explants culture method
Enzymatic digestion method
Immunomagnetic beads sorting method
Density gradient centrifugation
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分类号
R-332
[医药卫生]
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题名皮肤异色病样淀粉样变性免疫荧光及电镜观察
被引量：1
- 6
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作者
晏洪波
罗颖
梁文
李德忠
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机构
中国人民解放军广州军区武汉总医院皮肤性病科
中国人民解放军广州军区武汉总医院医学实验科
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出处
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期413-416,共4页
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文摘
报告1例皮肤异色病样淀粉样变性。患者男,40岁。四肢、躯干色素沉着和色素减退相间,伴苔藓样丘疹及毛细血管扩张20年,无自觉症状。全身皮损于夏季加重且可出现水疱。家族中无类似疾病史,父母系近亲结婚(表兄妹)。皮损组织病理检查示真皮乳头内有红色团块样均质性物质,结晶紫染色阳性。直接免疫荧光(DIF)检查:表皮基膜带及表皮细胞问IgG、IgM、IgA、C3均阴性,真皮乳头及真皮浅层可见大量团块状物质沉积,其中IgG标记可见较强荧光。电镜检查:真皮乳头及真皮浅层可见大量团块状物质沉积与基膜带及基底细胞关系密切。
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关键词
淀粉样变性
皮肤异色病
水疱
免疫荧光
电镜
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Keywords
amyloidosis
poikiloderma
blisters
immune fluorescence
electron microscopy
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分类号
R758.5
[医药卫生—皮肤病学与性病学]
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