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CD200调节重症中暑大鼠肺部炎症反应的信号通路初探 被引量:2
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作者 陈荣琳 曹枫 +4 位作者 符少平 彭怀力 施学智 梁泳欣 童华生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期265-269,共5页
目的观察CD200预处理对重症中暑大鼠炎性因子和肺组织NF-κB表达的影响,探索NF-κB在CD200抑制重症中暑大鼠肺部炎症反应中的作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(n=8)、重症中暑组(HS组,n=16)、CD200预处理组(CD200组,n=16)... 目的观察CD200预处理对重症中暑大鼠炎性因子和肺组织NF-κB表达的影响,探索NF-κB在CD200抑制重症中暑大鼠肺部炎症反应中的作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(n=8)、重症中暑组(HS组,n=16)、CD200预处理组(CD200组,n=16)。HS组、CD200组分别注射等体积生理盐水和CD200融合蛋白,然后经热打击制备大鼠重症中暑模型;对照组饲养于(22.0±1.0)℃环境。造模后60 min检测大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA表达,测定血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平,观察肺组织病理形态学改变,记录大鼠存活时间。结果 HS组和CD200组大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),且HS组高于CD200组(P<0.05)。HS组、CD200组和对照组血清HMGB1水平分别为(42.63±18.51、34.12±10.01、5.27±2.31) pg/ml,TNF-α水平分别为(138.58±50.89、63.54±25.25、19.32±8.82) ng/ml,IL-6水平分别为(115.65±40.15、51.08±15.08、7.25±2.28) ng/ml,HS组和CD200组均显著高于对照组(P<0.05),且HS组高于CD200组(P<0.05)。CD200组大鼠存活时间明显长于HS组[(98.4±21.6) min vs.(81.4±18.3) min,P<0.05]。病理形态学观察显示CD200组炎症及肺泡渗出相较HS组明显减轻。结论 CD200预处理可以减轻重症中暑大鼠的炎症反应,这一作用可能涉及NF-κB的活化抑制及炎性因子表达降低。 展开更多
关键词 重症中暑 CD200 NF-ΚB 炎症反应 细胞因子
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HMGB1与重症中暑大鼠凝血紊乱的相关性分析 被引量:4
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作者 余保军 王黎 +5 位作者 彭娜 施学智 陆勇 梁泳欣 童华生 苏磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期292-297,共6页
目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与重症中暑大鼠凝血紊乱的相关性。方法将48只SD雄性大鼠按照随机数字表法分为假加热对照组(Sham组)和重症中暑复温0 h组(HS-0 h组)、3 h组(HS-3 h组)、6 h组(HS-6 h组)、9 h组(HS-9 h组)、12 h组(HS-1... 目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与重症中暑大鼠凝血紊乱的相关性。方法将48只SD雄性大鼠按照随机数字表法分为假加热对照组(Sham组)和重症中暑复温0 h组(HS-0 h组)、3 h组(HS-3 h组)、6 h组(HS-6 h组)、9 h组(HS-9 h组)、12 h组(HS-12 h组)、18 h组(HS-18 h组)、24 h组(HS-24 h组),每组6只。Sham组大鼠置于温度(25.0±0.5)℃、湿度50%±5%的环境中,其余各组大鼠置于高温气候人工培养箱[温度(39.5±0.2)℃,湿度60%±5%]内,制备重症中暑大鼠模型,以直肠温度达43℃作为重症中暑标准。大鼠中暑后置于室温环境自然降温,分别于复温0、3、6、9、12、18、24 h采集血液标本。采用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)水平;ELISA法测定血浆HMGB1及凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)水平;采用广义相加模型分析HMGB1与各凝血指标的相关性。结果HMGB1与PT、TAT均呈线性关系且明显相关(P<0.05,P<0.0001);HMGB1与APTT、TT均呈线性关系,但差异无统计学意义(P=0.058,P=0.096);HMGB1与血小板计数(PLT)呈非线性关系,但明显相关(P<0.001);HMGB1与Fib无关(P>0.05)。结论HMGB1与重症中暑大鼠凝血紊乱明显相关,其在中暑凝血紊乱中的作用机制值得深入研究。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 重症中暑 凝血紊乱
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缺氧诱导因子-1α抑制剂LW6抑制心肌铁死亡改善大鼠脓毒症心肌损伤
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作者 王晓悦 曾佑成 +5 位作者 张艺馨 曹国栋 黄铭 林靓 杨鹏强 程青虹 《中国感染控制杂志》 北大核心 2025年第6期762-769,共8页
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂LW6对大鼠脓毒症心肌病中铁死亡的影响。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备大鼠脓毒症心肌病模型,将6~8周龄无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠36只随机分为假手术组、CLP组、CLP+溶剂组、LW6组、Fe... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂LW6对大鼠脓毒症心肌病中铁死亡的影响。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备大鼠脓毒症心肌病模型,将6~8周龄无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠36只随机分为假手术组、CLP组、CLP+溶剂组、LW6组、Fer-1组、LW6+Fer-1组。各组通过心脏组织苏木精-伊红染色、乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量检测评估心肌损伤程度;利用透射电镜观察心肌线粒体损伤;通过检测铁离子浓度、还原型谷胱甘肽、丙二醛及活性氧自由基水平确定铁死亡程度;采用Western blotting法测定心脏组织中HIF-1α、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平。结果与CLP组及CLP+溶剂组相比,LW6组可改善心肌损伤,减轻线粒体损伤,抑制铁死亡相关指标(均P<0.05),降低HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05),同时增加SLC7A11、GPX4蛋白表达水平(均P<0.05)。结论LW6降低HIF-1α表达并通过SLC7A11/GPX4途径降低铁死亡水平,改善脓毒症心肌病。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α LW6 脓毒症 心肌病 铁死亡 SLC7A11/GPX4途径
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血管内降温在重症中暑临床救治中的作用研究进展 被引量:8
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作者 夏诗语 林国东 苏磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期525-530,共6页
重症中暑(HS)指在高温、高湿且空气流通缓慢的环境下或剧烈运动后导致患者核心体温高于40.5℃,同时合并脏器功能损伤的一种疾病,其发病率及致死率均较高。早期诊断、早期降温可明显改善患者预后,提高生存率,减少并发症。重症中暑的降温... 重症中暑(HS)指在高温、高湿且空气流通缓慢的环境下或剧烈运动后导致患者核心体温高于40.5℃,同时合并脏器功能损伤的一种疾病,其发病率及致死率均较高。早期诊断、早期降温可明显改善患者预后,提高生存率,减少并发症。重症中暑的降温措施可分为血管外降温及血管内降温,血管外降温主要为体表物理降温,血管内降温主要用于不适宜物理降温或因资源短缺导致诊治不及时的患者,尤其对重症中暑降温效果较好,能明显改善患者预后。目前临床上常用的血管内降温措施主要包括血管内输注降温、血管内温度管理装置降温及持续血液净化等。该文主要从血管内降温的类别、机制、临床应用及优缺点等方面进行综述。 展开更多
关键词 重症中暑 物理降温 致伤机制 血管内降温
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穿心莲内酯减轻脂多糖诱导的肾小管上皮细胞铁死亡机制 被引量:2
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作者 张艺馨 黄铭 +4 位作者 曹国栋 曾佑成 林靓 王晓悦 程青虹 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期568-573,共6页
目的探讨穿心莲内酯(AG)对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用LPS处理HK-2细胞,模拟脓毒症HK-2损伤体外模型,进一步用5、10、20、40μmol/L的AG进行干预,将细胞随机分为对照组(Control... 目的探讨穿心莲内酯(AG)对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用LPS处理HK-2细胞,模拟脓毒症HK-2损伤体外模型,进一步用5、10、20、40μmol/L的AG进行干预,将细胞随机分为对照组(Control)、LPS组、LPS+二甲亚砜(DMSO)组、AG组。采用CCK-8法检测细胞活力,筛选出最适LPS和AG浓度;比较各组中细胞形态变化,肾损伤标志物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子-1(KIM-1)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平,以及铁死亡调控蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白(Ferritin)的表达水平,评估AG处理对细胞的保护作用。结果与Control组相比,10μg/mL LPS诱导的HK-2细胞中细胞活力及GSH含量下降,细胞皱缩、贴壁能力差,氧化产物MDA和ROS含量以及肾损伤标志物NGAL和KIM-1水平明显升高,SLC7A11、GPX4蛋白表达水平降低,Ferritin蛋白表达水平增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。而在使用AG干预后,与LPS组相比,细胞活力升高,GSH含量、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平升高,而Ferritin蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);MDA含量和ROS荧光强度以及肾损伤标志物NGAL和KIM-1水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论AG对LPS诱导的HK-2细胞损伤具有保护作用,其机制可能是激活SLC7A11/GPX4通路,减少氧化应激,上调抗氧化酶活性,减轻细胞铁死亡。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 肾小管上皮细胞 HK-2 铁死亡 SLC7A11 Xc-系统 机制
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无创左室压力-应变环评估急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术前后左心功能及左室重构的价值 被引量:1
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作者 王歆赫 叶创文 +2 位作者 童华生 孟菲 朱贤胜 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第20期2841-2847,共7页
目的探讨基于无创左室压力-应变环(LV-PSL)技术评估急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术前、后的心肌做功情况及左室重构的临床价值。方法选择70例AMI患者(冠心病组)及同期体检的50例健康成人(对照组)。比较对照组和冠心病组... 目的探讨基于无创左室压力-应变环(LV-PSL)技术评估急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术前、后的心肌做功情况及左室重构的临床价值。方法选择70例AMI患者(冠心病组)及同期体检的50例健康成人(对照组)。比较对照组和冠心病组术前、术后7 d检查常规超声心动图指标、左室整体纵向应变(GLS)和左室心肌做功指标[整体做功指数(GWI)、整体做功效率(GWE)、整体有用功(GCW)、整体无用功(GWW)]的差异。冠心病组患者进一步根据冠脉造影结果分为冠心病单支组34例和冠心病多支组36例,对比两组上述指标的差异。分析左室心肌做功指标与GLS、常规超声心动图指标的相关性。结果冠心病组术前、术后7d左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积(LVEDV)、GWW均高于对照组,左室射血分数(LVEF)、GWI、GWE、GCW、GLS均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。冠心病组术后7 d LVESV、LVEDV、GWW均低于术前,LVEF、GWI、GWE、GCW、GLS均高于术前,差异均有统计学意义(P<0.05)。冠心病多支组术前及术后7 d LVESV、LVEDV、GWW均高于冠心病单支组,LVEF、GWI、GWE、GCW、GLS均低于冠心病单支组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,GWW与GLS、LVEF均呈负相关,GWE、GCW、GWI与GLS、LVEF均呈正相关(P<0.001)。结论LV-PSL技术在评估AMI患者PCI术前、后左心功能及左室重构方面具有较好的应用价值,为临床急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术术后提供了一种无创、有效的评估新方法。 展开更多
关键词 心肌做功 急性心肌梗死 左心功能 左室重构
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急性呼吸窘迫综合征的分型及个体化治疗研究进展 被引量:19
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作者 许呢妹 张爽 刘志锋 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期615-620,共6页
急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是由各种肺内和肺外致病因素导致的急性弥漫性肺损伤,并可发展为急性呼吸衰竭,以呼吸窘迫和难治性低氧血症为临床特征。目前临床上ARDS患者的“标准化”机械通气多采用小潮气量、高呼气末正压的肺保护通气策略... 急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是由各种肺内和肺外致病因素导致的急性弥漫性肺损伤,并可发展为急性呼吸衰竭,以呼吸窘迫和难治性低氧血症为临床特征。目前临床上ARDS患者的“标准化”机械通气多采用小潮气量、高呼气末正压的肺保护通气策略,然而其治疗效果往往不能令人满意,大多数临床研究以失败告终。由于ARDS的异质性很强,因此对其进行精准分型及个体化治疗非常重要。本文从病因学、发病时间、疾病严重程度、炎症水平、影像学特征及病理学等方面对ARDS的分型进行综述,并初步阐述新型冠状病毒感染相关ARDS的表型,总结不同表型ARDS的个体化治疗策略,以期为ARDS的个体化、精准化治疗提供依据。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 分型 个体化治疗 新型冠状病毒感染
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氯沙坦通过HMGB1抑制热打击大鼠肝细胞炎症反应的作用观察 被引量:5
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作者 张明 杨经文 +4 位作者 陈怀生 李悦 施学智 梁泳欣 童华生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期285-291,共7页
目的观察氯沙坦通过高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对热打击大鼠肝细胞中炎症反应的影响。方法体内实验中,将大鼠随机分为对照组(不接受热打击)、中暑组(中暑模型建立后腹腔注射生理盐水)和中暑氯沙坦组(中暑模型建立后腹腔注射氯沙坦50 mg/kg... 目的观察氯沙坦通过高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对热打击大鼠肝细胞中炎症反应的影响。方法体内实验中,将大鼠随机分为对照组(不接受热打击)、中暑组(中暑模型建立后腹腔注射生理盐水)和中暑氯沙坦组(中暑模型建立后腹腔注射氯沙坦50 mg/kg)。于模型建立9 h后取大鼠血清及肝组织,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、肝组织髓过氧化物酶(MPO)、HMGB1水平及肝组织白介素(IL)-1β、IL-18水平,并观察肝组织病理形态学的变化。体外实验中,将大鼠HBL3A肝细胞系分为对照组(不接受热打击)、热打击组及热打击氯沙坦组(热打击后在上清中加入10μmol/L氯沙坦)。于模型建立9 h后检测细胞活力,上清乳酸脱氢酶及HMGB1水平,肝细胞胞质及总HMGB1表达,活化的半胱天冬酶-1表达,上清IL-1β、IL-18及细胞内活性氧簇水平。并分别观察添加梯度浓度的重组HMGB1和0.2 mmol/L H2O2对氯沙坦干预的热打击肝细胞上清IL-1β、IL-18及HMGB1水平的影响。结果体内实验中,与中暑组比较,中暑氯沙坦组血清ALT、肝组织MPO、血清HMGB1、肝组织IL-1β和IL-18水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);体外实验中,与热打击组比较,热打击氯沙坦组胞质HMGB1,上清HMGB1、IL-1β和IL-18水平均明显下降,细胞存活率上升,差异有统计学意义(P<0.05)。加入HMGB1抑制剂后,热打击肝细胞的IL-1β及IL-18水平均下降;加入HMGB1后,氯沙坦干预的热打击肝细胞的IL-1β与IL-18水平均上升(P<0.05)。氯沙坦干预后热打击肝细胞中的活性氧簇水平降低,加入H2O2后,氯沙坦干预的热打击肝细胞上清HMGB1水平增高(P<0.05)。结论氯沙坦可通过HMGB1抑制热打击大鼠肝细胞中的炎症损伤。 展开更多
关键词 中暑 肝损伤 氯沙坦 高迁移率族蛋白B1
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热打击单核细胞来源外泌体中miR-155对肝细胞炎症的影响及其机制 被引量:1
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作者 张明 李悦 +3 位作者 杨经文 施学智 肖吉彪 童华生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1017-1022,共6页
目的研究热打击单核细胞来源外泌体对肝细胞炎症损伤的影响及其与外泌体miR-155的关系。方法将单核细胞THP-1分为对照组、热打击组、乌司他丁组,分别提取3组细胞的外泌体,将其孵育肝细胞系HepG2细胞后,检测肝细胞上清中谷丙转氨酶(ALT)... 目的研究热打击单核细胞来源外泌体对肝细胞炎症损伤的影响及其与外泌体miR-155的关系。方法将单核细胞THP-1分为对照组、热打击组、乌司他丁组,分别提取3组细胞的外泌体,将其孵育肝细胞系HepG2细胞后,检测肝细胞上清中谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,肝细胞存活率,以及肝细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-6(IL-6)mRNA水平,评估外泌体对肝细胞的作用;采用RT-qPCR检测单核细胞来源外泌体中miR-155含量的变化;通过数据库检索、双重荧光素酶报告基因检测及Western blotting实验分析miR-155的潜在靶点;观察热打击单核细胞外泌体对肝细胞miR-155的影响,以及使用乌司他丁或miR-155抑制剂处理对这些外泌体功能的影响。结果热打击单核细胞来源外泌体使肝细胞上清ALT及LDH水平、TNF-αmRNA及IL-6 mRNA水平明显增高(P<0.01),细胞存活率下降(P<0.05);热打击能增加单核细胞及其释放外泌体内含的miR-155水平;miR-155可能以细胞因子信号传导抑制分子1(SOCS1)作为靶基因发挥作用;采用热打击单核细胞外泌体孵育肝细胞可使后者miR-155水平增高,乌司他丁或miR-155抑制剂能降低热打击单核细胞外泌体miR-155水平并减少肝细胞TNF-α和IL-6 mRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论热打击单核细胞可上调肝细胞炎性因子导致的炎症损伤,这可能是通过释放外泌体miR-155至肝细胞并以SOCS1为潜在靶点实现的;乌司他丁可能缓解此条件下肝细胞内炎性因子mRNA的表达。 展开更多
关键词 中暑 外泌体 单核细胞 乌司他丁 肝细胞 MIR-155
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血清HMGB1水平对创伤性凝血病早期危重患者病情及预后的影响 被引量:10
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作者 唐丽群 张兴钦 +1 位作者 童华生 马明远 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1144-1150,共7页
目的分析血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平对创伤性凝血病(TIC)早期危重患者病情及预后的影响。方法选择2017年1月1日-2018年12月31日佛山市中医院重症医学科收治的43例急性创伤危重患者,根据TIC诊断标准(INR>1.2)分为TIC组(n=23)与... 目的分析血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平对创伤性凝血病(TIC)早期危重患者病情及预后的影响。方法选择2017年1月1日-2018年12月31日佛山市中医院重症医学科收治的43例急性创伤危重患者,根据TIC诊断标准(INR>1.2)分为TIC组(n=23)与对照组(n=20)。转入ICU时,收集患者一般资料,采集外周静脉血,检测凝血指标[活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、纤维蛋白原(Fib)、血小板计数(PLT)]和炎性指标[血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)]水平,并采用ELISA法检测血清HMGB1水平。记录患者住院期间的输血量(红细胞、血浆)、呼吸机使用时间、ICU住院时间和28 d死亡发生率,并进行统计分析。结果53.5%的急性创伤危重患者并发TIC。两组患者年龄、性别、致伤原因、救治时间、APACHEⅡ评分、ISS评分、APTT、PT及PCT和CRP水平差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,TIC组Fib、PLT明显降低,呼吸机使用时间、输注红细胞及血浆量、感染发生率及多器官功能障碍发生率明显增高(P<0.05),28 d死亡发生率呈增高趋势(P=0.091)。与对照组比较,TIC组血清HMGB1水平明显升高,其中死亡亚组血清HMGB1水平明显高于存活亚组(P=0.000)。Pearson和Spearman相关分析显示,急性创伤危重患者血清HMGB1水平与救治时间、凝血功能纠正时间、APACHEⅡ评分、ISS评分、呼吸机使用时间、INR、APTT、CRP和PCT等均呈正相关(r=0.648、0754、0.526、0.516、0.521、0.509、0.432、0.592、0.375),与Fib、PLT、感染发生率、多器官功能障碍发生率及病死率等呈负相关(r=–0.424、–0.571、–0.505、–0.396、–0.765)。与TIC存活亚组比较,TIC死亡亚组救治时间、凝血功能纠正时间、ISS评分、输注血细胞和血浆量、血清HMGB1、PLT、APTT和CRP水平差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,血清HMGB1、PLT是创伤TIC患者预后的独立危险因素(P=0.004、0.011)。ROC曲线分析显示,血清HMGB1水平预测创伤TIC患者28 d死亡发生率的AUC为0.897(95%CI 0.748~1.000,P=0.002);选择54.60 ng/ml为截断值时,尤登指数为0.808。结论血清HMGB1、PLT是创伤TIC患者预后的独立危险因素。血清HMGB1水平与创伤TIC患者的病情及预后密切相关,可用于预测严重创伤危重患者和创伤TIC患者的28 d死亡发生率。 展开更多
关键词 严重创伤 创伤性凝血病 高迁移率族蛋白B1 预后
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热打击可通过调控内质网应激通路促进神经细胞凋亡 被引量:6
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作者 高经华 刘亚伟 +1 位作者 吉晶晶 刘志锋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期702-709,共8页
目的研究内质网应激通路在热打击导致神经元细胞凋亡的作用。方法体外培养神经元SH-SY5Y细胞,设置正常对照组和实验组。正常对照组:始终37℃培养,实验组:细胞培养箱设置43℃,热打击2 h后,置回37℃细胞培养箱复温0、3、6 h。光学显微镜... 目的研究内质网应激通路在热打击导致神经元细胞凋亡的作用。方法体外培养神经元SH-SY5Y细胞,设置正常对照组和实验组。正常对照组:始终37℃培养,实验组:细胞培养箱设置43℃,热打击2 h后,置回37℃细胞培养箱复温0、3、6 h。光学显微镜观察细胞形态变化;CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测热打击后细胞凋亡情况;流式细胞术和免疫荧光共聚焦显微镜检测和观察细胞内钙离子水平;qRT-PCR检测Caspase-12、BIP和XBP-1的RNA表达水平;Westernblot检测内质网应激通路相关蛋白Caspase-12、BIP、P-JNK、JNK和XBP-1的蛋白表达;利用4-苯基丁酸(4-PBA)预处理后,检测热打击后细胞凋亡水平。结果热打击后复温0 h,细胞收缩明显,随着复温时间延长,细胞逐渐伸展;热打击后细胞活力明显下降(P=0.001);热打击后细胞内钙离子显著上调并随复温时间延长而恢复;热打击后细胞Cleaved-caspase3蛋白水平增加,内质网应激通路相关蛋白Caspase-12(P=0.002)和BIP(P=0.008)蛋白水平和mRNA水平增加并有时间依赖性,P-JNK/JNK蛋白水平在复温0 h显著增加(P=0.003),并随着复温时间延长而逐渐减少。XBP-1蛋白和mRNA水平在热打击后逐渐减少(P=0.005,P=0.002),而4-PBA处理组,细胞中Cleaved-caspase3表达水平明显降低。结论热打击可通过诱发内质网应激及促进胞内钙离子稳态失衡而促进神经细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 热打击 内质网应激 钙离子 凋亡
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KL47型和KL64型产KPC酶肺炎克雷伯菌的菌株特征和体外药物敏感性分析 被引量:1
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作者 李晓晴 王露霞 +7 位作者 卓超 郭振辉 陈金辉 孙朝晖 廖扬 肖斌 黄晓燕 吴玉婷 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期341-346,共6页
目的分析KL47型和KL64型荚膜血清型产KPC酶肺炎克雷伯菌(KPC-KP)的菌株特点,比较多黏菌素B、替加环素、头孢他啶-阿维巴坦对KL47型和KL64型KPC-KP菌株的体外抗菌活性。方法纳入2019年1月—2020年12月南部战区总医院216例患者不同部位分... 目的分析KL47型和KL64型荚膜血清型产KPC酶肺炎克雷伯菌(KPC-KP)的菌株特点,比较多黏菌素B、替加环素、头孢他啶-阿维巴坦对KL47型和KL64型KPC-KP菌株的体外抗菌活性。方法纳入2019年1月—2020年12月南部战区总医院216例患者不同部位分离的280株经PCR确认携带blaKPC的KPC-KP菌株。用wzi测序法进行荚膜血清型测定,采用肉汤微量稀释法检测多黏菌素B、替加环素、头孢他啶-阿维巴坦以及临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果280株KPC-KP中168株为患者单一部位分离的菌株,另112株来自48例患者2~5个不同部位分离到菌株。168株荚膜血清分型以KL47型和KL64为主,分别占44.6%(75/168)和38.7%(65/168),其他荚膜血清型(KL10、KL12、KL19、KL27、KL28、KL105、KL110)占14.9%(25/168),3株(1.8%)菌株无法归类于以上血清型。112株KPC-KP中82株来自37例患者不同部位分离的菌株荚膜血清型均为同一型,另30株来自11例患者不同部位分离的菌株荚膜血清型为不同型;KL47型和KL64型分别为54.5%(61/112)和27.7%(31/112),其他荚膜血清型为12.5%(14/112),有6株(5.4%)无法归类于以上血清型。KL47型和KL64型两组患者患有基础疾病中,除慢性阻塞性肺疾病患病率差异有统计学意义(P<0.01),其余临床危险因素差异均无统计学意义(P>0.05),KL47和KL64型患者14 d及28 d死亡率差异无统计学意义(P>0.05)。136株KL47对多黏菌素B、替加环素和头孢他啶-阿维巴坦敏感率为95.6%、97.8%和98.5%,MIC_(90)分别为16、2、8 mg/L;96株KL64对多黏菌素B、替加环素和头孢他啶-阿维巴坦敏感率为88.5%、91.7%和100%,MIC_(90)分别为16、2、4 mg/L。多黏菌素B和头孢他啶-阿维巴坦对KL47和KL64体外抗菌活性相当(P>0.05),而替加环素对KL47和KL64型KPC-KP菌株体外抗菌活性差异有统计学意义(P=0.04)。结论该院KPC-KP荚膜血清型以KL47和KL64型为主。多黏菌素B和头孢他啶-阿维巴坦对KL47和KL64体外抗菌活性差异无统计学意义,替加环素对KL47具有更好的体外抗菌优势。KL64的高流行率、高耐药率可能带来临床难治愈及高死亡率,亟需感染防控措施的加强及临床流行病学监控。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 KPC酶 多黏菌素B 替加环素 头孢他啶-阿维巴坦
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热打击诱导血管内皮细胞释放的外泌体特征及其功能分析 被引量:5
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作者 陈怀生 张明 +3 位作者 梁泳欣 施学智 童华生 苏磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期270-276,共7页
目的分析热打击诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的外泌体特征及其功能。方法培养HUVECs并分为对照组与热打击组。热打击组细胞给予41℃热刺激培养2 h,建立热打击细胞模型;对照组细胞于37℃孵育培养2 h。采用纳米颗粒追踪法分析两组细... 目的分析热打击诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的外泌体特征及其功能。方法培养HUVECs并分为对照组与热打击组。热打击组细胞给予41℃热刺激培养2 h,建立热打击细胞模型;对照组细胞于37℃孵育培养2 h。采用纳米颗粒追踪法分析两组细胞释放的外泌体特征;Westernblotting检测外泌体标志蛋白CD63和TSG101的表达;荧光标识观察外泌体进入正常细胞的过程。检测、提取外泌体,对细胞进行干预实验,将培养的细胞分为空白对照组(37℃培养HUVECs细胞)、37℃外泌体处理组(加入对照组细胞释放的外泌体)和41℃外泌体处理组(加入热打击组细胞释放的外泌体),采用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况;MTS法检测细胞增殖情况;ELISA法检测凝血功能指标水平;高通量测序法分析外泌体中的微小RNA(miRNA)。结果与对照组不同,41℃热打击组细胞可释放异常外泌体,并导致正常HUVECs出现行为、功能异常,组织因子、血管性血友病因子、纤溶酶原激活物抑制因子1表达明显增加(P<0.05),组织型纤维蛋白溶酶原激活剂表达降低(P<0.05)。与37℃孵育HUVECs比较,41℃热打击HUVECs释放的外泌体共出现2590条miRNA调节变化,对细胞凋亡等途径具有较明显影响。结论41℃热打击可使HUVECs分泌异常外泌体,后者可导致正常细胞出现行为及凝血功能等的异常。 展开更多
关键词 中暑 人脐静脉内皮细胞 外泌体
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热打击诱导肝细胞释放的外泌体生物学功能及其致肝损伤作用分析 被引量:3
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作者 李悦 祝鑫桃 +3 位作者 张明 梁泳欣 施学智 童华生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期277-284,共8页
目的探讨中暑诱导肝细胞释放外泌体的生物学功能及其对重症中暑肝损伤的作用。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分为对照组与热打击组,提取上清经超高速离心法分离外泌体。透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒追踪分析法(NTA)检测... 目的探讨中暑诱导肝细胞释放外泌体的生物学功能及其对重症中暑肝损伤的作用。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分为对照组与热打击组,提取上清经超高速离心法分离外泌体。透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒追踪分析法(NTA)检测外泌体直径分布,Western blotting检测外泌体特征性标记物表达。通过等重同位素多标签相对定量蛋白质组学(iTRAQ)方法分析对照组与热打击组肝细胞外泌体中蛋白质的组成差异,采用KEGG通路对差异蛋白质集合进行生物信息学分析。外泌体刺激受体肝细胞实验将受体肝细胞分为对照组、正常刺激组、热打击刺激组(10μg/5 ml,24 h)、热打击组及热打击预处理组,检测各组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平。外泌体体内回输刺激实验将小鼠分为对照组、正常输注组、热打击输注组(40μg/只)、热打击组及热打击预处理组,9 h后处死,检测其血清ALT、AST、LDH水平,以评价肝组织损伤情况。结果肝细胞分泌的微粒在TEM下呈双层膜状包裹的圆形或椭圆形结构,NTA检测显示其直径为90~150 nm,Western blotting检测显示其高表达CD9、CD63和CD81,具有外泌体的特征。热打击组肝细胞释放的外泌体数量明显高于对照组[(8.46±1.38)×10~9/mlvs.(0.66±0.16)×10~9/ml,t=5.605,P=0.005]。iTRAQ分析显示,热打击明显改变了肝细胞外泌体的蛋白质表达谱,KEGG通路分析显示,参与坏死性凋亡途径、PI3K-Akt信号传导途径、抗原加工和呈递途径、凋亡途径及NOD样受体等信号通路的蛋白质富集。外泌体刺激受体肝细胞实验中,热打击刺激组受体肝细胞上清ALT、AST、LDH水平明显升高,热打击预处理组肝细胞上清ALT、AST、LDH水平明显低于热打击组(P<0.05)。外泌体体内回输刺激实验中,热打击输注组小鼠血清ALT、AST、LDH水平明显升高,热打击预处理组肝细胞血清ALT、AST、LDH水平明显低于热打击组(P<0.05)。结论热打击可诱导肝细胞释放外泌体,热打击后外泌体蛋白质谱发生变化,对急性肝损伤具有诱导作用。 展开更多
关键词 重症中暑 热打击 肝细胞 外泌体 肝损伤
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体重指数对脓毒症患者预后的影响:基于大型临床数据库MIMIC-Ⅲ的回顾性分析 被引量:4
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作者 王丹妮 华黎电 +2 位作者 潘志国 文强 苏磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期129-135,共7页
目的探讨体重指数(BMI)与脓毒症患者短期和长期临床结局的关系。方法回顾性分析2001-2012年在医学信息市场重症监护(MIMIC-Ⅲ)数据库中注册的贝斯以色列迪康医疗中心(美国马萨诸塞州波士顿)的5571例脓毒症患者的临床资料。采用Cox比例... 目的探讨体重指数(BMI)与脓毒症患者短期和长期临床结局的关系。方法回顾性分析2001-2012年在医学信息市场重症监护(MIMIC-Ⅲ)数据库中注册的贝斯以色列迪康医疗中心(美国马萨诸塞州波士顿)的5571例脓毒症患者的临床资料。采用Cox比例风险回归模型评估脓毒症患者BMI与30 d病死率、1年病死率的关系。结果根据BMI将患者进行分类[体重不足:336例(6.0%);正常体重:1752例(31.4%);超重:1563例(28.1%);肥胖:1920例(34.5%)],各类患者30 d病死率分别为42.3%、36.6%、32.2%、29.6%(P<0.001),1年病死率分别为64.6%、56.8%、52.5%、46.7%(P<0.001),院内病死率分别为35.4%、34.3%、31.6%、29.9%(P=0.018)。Cox比例风险回归模型分析显示,与正常体重患者相比,在30 d和1年内的死亡风险体重不足患者分别增高了13%和24%,超重患者分别降低了17%和14%,肥胖患者分别降低了22%和21%。结论超重或肥胖脓毒症患者入院后30 d和1年生存率高于体重不足及体重正常的脓毒症患者。 展开更多
关键词 医学信息市场 重症监护 大数据分析 脓毒症 肥胖
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核外p53通过AMPK/mTOR信号抑制自噬并促进热打击诱导的血管内皮细胞损伤 被引量:3
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作者 李莉 邹志敏 +3 位作者 李琴 张堃 苏磊 古正涛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1664-1671,共8页
目的阐明核外p53通过调控蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶体(mTOR)信号通路介导自噬抑制在热打击后血管内皮细胞(VECs)损伤的分子机制。方法实验分为:对照组、热打击组、热打击组+Compound C组、热打击组+rapamycin组、热打击组+PFT组,并分... 目的阐明核外p53通过调控蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶体(mTOR)信号通路介导自噬抑制在热打击后血管内皮细胞(VECs)损伤的分子机制。方法实验分为:对照组、热打击组、热打击组+Compound C组、热打击组+rapamycin组、热打击组+PFT组,并分别使用AMPK抑制剂Compound C、mTOR抑制剂(自噬激活剂)rapamycin、p53线粒体转位抑制剂PFT预处理细胞或C57BL/6小鼠,通过CCK8法检测细胞活力,Western blot观察p53线粒体移位、自噬关键蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1和P62以及AMPK/mTOR信号通路的激活情况,HE染色观察各组小鼠主动内皮血管病理改变,TUNEL染色观察各组小鼠动内皮血管凋亡情况。结果与对照组相比,热打击后主动脉内皮细胞(MAECs)活力显著下降(P<0.05),热打击后小鼠主动脉血管内皮细胞肿胀、脱落,内弹力膜断裂,平滑肌排列紊乱,可见大量凋亡细胞;热打击后随着复温时间(0、3、6、9 h)延长,MAECs胞浆中p53表达逐渐减弱,而线粒体p53表达逐渐增强;热打击后(6 h)LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达被抑制,p62蛋白表达增加(P<0.05);热打击后(6 h)AMPK的磷酸化被抑制,mTOR、4EBP1和p70S6K的磷酸化表达增加(P<0.05)。AMPK抑制剂Compound C明显抑制了热打击后MAECs中LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达,促进了p62蛋白表达,并加重了热打击后小鼠主动脉血管的损伤以及促进了凋亡的增加,而mTOR抑制剂rapamycin均呈现相反作用。p53线粒体转位抑制剂PFT促进了AMPK的磷酸化激活,并抑制mTOR、4EBP1和p70S6K的磷酸化(P<0.05);使用PFT后促进了LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达,抑制了P62的表达(P<0.05);使用PFT后明显提高了MAECs的细胞活力(P<0.05),也减轻了热打击后小鼠主动脉血管的损伤和凋亡的发生。结论核外p53主要通过抑制AMPK活性,激活mTOR信号,继而介导细胞自噬抑制,参与热打击诱导的MAECs损伤。 展开更多
关键词 热打击 核外p53 AMPK MTOR 血管内皮细胞 自噬
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lncRNA-HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p抑制脂多糖诱导的H9c2大鼠心肌细胞增殖并促进炎症反应
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作者 刘星 董家辉 +1 位作者 鲜悦 任宗芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期904-910,共7页
目的探讨长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA-HOTAIR)是否通过靶向微小RNA miR-1-3p调控脓毒症的炎症反应。方法利用0.5μg/mL脂多糖(LPS)诱导H9c2大鼠心肌细胞,建立脓毒症心肌细胞损伤模型,将H9c2细胞分为对照组、LPS组、LP... 目的探讨长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA-HOTAIR)是否通过靶向微小RNA miR-1-3p调控脓毒症的炎症反应。方法利用0.5μg/mL脂多糖(LPS)诱导H9c2大鼠心肌细胞,建立脓毒症心肌细胞损伤模型,将H9c2细胞分为对照组、LPS组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA(si-HOTAIR)组、LPS联合miR-1-3p阴性对照(miR-NC)组、LPS联合miR-1-3p组、LPS联合si-HOTAIR和miR-1-3p拮抗剂阴性(anti-miR-NC)组、LPS联合siHOTAIR和anti-miR-1-3p组。实时定量PCR检测HOTAIR和miR-1-3p表达,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot法分析KI-67抗原(ki67)、P21、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达,流式细胞术评估细胞凋亡,ELISA测定炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。双荧光素酶报告实验分析HOTAIR和miR-1-3p的靶向关系。结果LPS组H9c2细胞中HOTAIR表达量高于对照组,miR-1-3p表达量低于对照组。与LPS联合si-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR组LPS处理H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量增多,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6和TNF-α水平降低。HOTAIR靶向调控miR-1-3p的表达。LPS联合miR-1-3p组较LPS联合miR-NC组的H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量升高,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6、TNF-α水平降低。与LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-1-3p组H9c2细胞增殖活性降低、ki67、Bcl2表达减少,P21、BAX表达,细胞凋亡、IL-6、TNF-α水平增加。结论HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p的表达,抑制LPS诱导的H9c2心肌细胞增殖,并诱导细胞凋亡和炎症反应。 展开更多
关键词 脓毒症 HOX转录本反义基因间RNA(HOTAIR) miR-1-3p H9C2细胞 细胞凋亡 炎症反应
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