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慢性应激与去睾丸减少成年小鼠脑中NT-3和BDNF的蛋白表达(英文) 被引量:4
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作者 连晓媛 张岩 +1 位作者 周长满 张均田 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期245-250,共6页
研究了慢性应激对小鼠脑中神经营养因子蛋白表达的影响 ,并探讨了性激素降低是否参与此过程 .性成熟完整雄性小鼠和去睾丸小鼠接受慢性应激 6 0d ,完整动物海马和大脑皮层中神经营养因子3(NT 3)和脑源性神经营养因子 (BDNF)蛋白水平显... 研究了慢性应激对小鼠脑中神经营养因子蛋白表达的影响 ,并探讨了性激素降低是否参与此过程 .性成熟完整雄性小鼠和去睾丸小鼠接受慢性应激 6 0d ,完整动物海马和大脑皮层中神经营养因子3(NT 3)和脑源性神经营养因子 (BDNF)蛋白水平显著降低 ,而且NT 3在海马齿状回的降低呈现某种程度的特异性 ,此外 ,齿状回颗粒细胞的形态退化在整个脑中也最为明显 ;去睾丸应激动物海马和大脑皮层中BDNF和NT 3蛋白水平较完整动物进一步降低 ,尤其是海马齿状回NT 3蛋白水平的降低与其他脑区相比表现出明显的特异性 ,同样 ,慢性应激引起的大脑皮层和海马特别是齿状回的神经元退化进一步被去睾丸恶化 .结果表明 ,慢性应激可抑制脑中NT 3和BDNF蛋白表达 ,去睾丸可使这种变化进一步加剧 ,海马齿状回对应激神经毒性较为敏感 ,提示 :脑中BDNF和NT 3蛋白水平降低与慢性应激过程中大脑形态退化密切相关 ; 展开更多
关键词 慢性应激 去睾丸 神经营养因子 脑源性神经营养因子 免疫组织化学 小鼠
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GDNF和HSV-GDNF对体外培养发育的大鼠骨骼肌卫星细胞Bcl-2表达的影响 被引量:4
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作者 徐忠涛 周长满 鄂玲玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期317-320,共4页
为了进一步探索治疗神经系统损伤的新途径 ,本研究用传代培养的骨骼肌卫星细胞加入胶质细胞源性神经营养因子(GDNF )和单纯疱疹病毒介导的 GDNF(HSV-GDNF) ,取培养 2、4、8、16、2 4、48、72 h的细胞进行 Bcl-2单克隆抗体的免疫组织化... 为了进一步探索治疗神经系统损伤的新途径 ,本研究用传代培养的骨骼肌卫星细胞加入胶质细胞源性神经营养因子(GDNF )和单纯疱疹病毒介导的 GDNF(HSV-GDNF) ,取培养 2、4、8、16、2 4、48、72 h的细胞进行 Bcl-2单克隆抗体的免疫组织化学反应 ,观察了 GDNF和 HSV-GDNF对体外培养发育的大鼠骨骼肌卫星细胞 Bcl-2表达的影响。结果发现 :GDNF、HSV-GDNF组的肌卫星细胞 Bcl-2表达较对照组明显增强 ,细胞存活数量高于对照组 ,但 GDNF组、HSV-GDNF组两组之间无显著性差异。提示 :GDNF、HSV-GDNF可促进骨骼肌卫星细胞的增殖、分化 。 展开更多
关键词 骨骼肌卫星细胞 体外培养 新生大鼠 神经系统损伤
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质粒型HSV载体介导的GDNF和GFP基因在BHK细胞和骨骼肌细胞中的转移和表达 被引量:2
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作者 苏剑斌 鄂玲玲 +1 位作者 徐忠涛 周长满 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期127-130,共4页
为了进一步探索治疗中枢神经损伤的新途径 ,本实验以质粒型单纯疱疹病毒 ( H SV)为载体 ,分别构建了含有胶质细胞源性神经营养因子 ( GDN F)和绿色荧光蛋白 ( GFP)基因的重组载体 H SV - GDNF和 H SV- GFP,用包装出的混合毒株分别感染... 为了进一步探索治疗中枢神经损伤的新途径 ,本实验以质粒型单纯疱疹病毒 ( H SV)为载体 ,分别构建了含有胶质细胞源性神经营养因子 ( GDN F)和绿色荧光蛋白 ( GFP)基因的重组载体 H SV - GDNF和 H SV- GFP,用包装出的混合毒株分别感染体外培养的 BHK细胞及原代培养的大鼠骨骼肌细胞。 2 d后 ,对感染 HSV - G DNF组的细胞进行 G DNF免疫组织化学反应 ;感染HSV- GFP组的细胞在荧光显微镜下进行观察。结果发现 :质粒型 H SV载体可成功地将外源性 GDN F和 GFP基因导入 BH K细胞和原代培养的大鼠骨骼肌细胞。提示 :质粒型 H SV载体可以作为转基因 GDN F治疗中枢神经系统损伤的转移载体 ,为中枢神经系统损伤的治疗展示了广阔的前景。 GFP作为报告基因 ,也可因其适用广谱。 展开更多
关键词 中枢神经系统损伤 质粒型HSV载体 GDNF GFP 治疗
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质粒型单纯疱疹病毒载体介导GDNF和GFP基因在体外培养的BHK细胞和大鼠脊髓、背根节神经元中的转移和表达 被引量:1
4
作者 苏剑斌 周长满 +2 位作者 鄂玲玲 徐忠涛 刘雁 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期323-326,T003,共5页
为了观察质粒型单纯疱疹病毒载体介导的外源性胶质细胞源性神经营养因子和绿色荧光蛋白基因在体外培养的金黄地鼠肾细胞以及脊髓神经元和背根节神经元中的转移和表达 ,本研究采用了以质粒型单纯疱疹病毒载体为基础构建的分别含有重组胶... 为了观察质粒型单纯疱疹病毒载体介导的外源性胶质细胞源性神经营养因子和绿色荧光蛋白基因在体外培养的金黄地鼠肾细胞以及脊髓神经元和背根节神经元中的转移和表达 ,本研究采用了以质粒型单纯疱疹病毒载体为基础构建的分别含有重组胶质细胞源性神经营养因子和绿色荧光蛋白基因的混合毒株 dv HSV-GDNF和 dv HSV-GFP感染体外培养的金黄地鼠肾细胞、脊髓神经元和背根节神经元。用免疫组织化学方法和荧光显微镜观测法分别检测了胶质细胞源性神经营养因子和绿色荧光蛋白基因的转移和表达。结果发现 :质粒型单纯疱疹病毒载体可以成功地将外源性胶质细胞源性神经营养因子和绿色荧光蛋白基因导入金黄地鼠的肾细胞以及脊髓神经元和背根节神经元中。提示质粒型单纯疱疹病毒载体可以作为转基因胶质细胞源性营养因子治疗脊髓损伤的转移载体 ,为脊髓损伤的基因治疗提供了实验基础。绿色荧光蛋白作为报告基因 ,也可因其适用广泛、观察简便等特性而得到更加广泛的应用。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒载体 脊髓 背根节 大鼠 GDNF
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肌源性神经营养因子(MDNF)对体外培养的大鼠脊髓运动神经元缺氧时Bcl-2表达的影响
5
作者 鄂玲玲 徐忠涛 +1 位作者 王常利 周长满 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期47-50,W012,共5页
为证明大鼠肌源性神经营养因子对损伤神经的保护作用 ,本文观察了此因子对缺氧时体外培养的大鼠脊髓运动神经元Bcl-2表达的影响。本实验从成鼠和乳鼠骨骼肌中提取肌源性神经营养因子 ,取 10 0μl (0 .1μg/ml)加入培养的胚胎大鼠脊髓运... 为证明大鼠肌源性神经营养因子对损伤神经的保护作用 ,本文观察了此因子对缺氧时体外培养的大鼠脊髓运动神经元Bcl-2表达的影响。本实验从成鼠和乳鼠骨骼肌中提取肌源性神经营养因子 ,取 10 0μl (0 .1μg/ml)加入培养的胚胎大鼠脊髓运动神经元的培养液中 ,对照组加入等量的 PBS。然后用液体石蜡封闭液面造成神经元缺氧损伤 ,3 d后行 Nissl染色和免疫组化反应 ,观察和计数大鼠脊髓运动神经元存活数以及 Bcl-2免疫反应阳性神经元数 ,并对 Bcl-2阳性神经元作平均光密度分析。结果发现 :经成鼠和乳鼠肌源性神经营养因子孵育的脊髓运动神经元缺氧后的神经元存活数、Bcl-2阳性神经元数以及平均光密度均明显高于对照组 ,但乳鼠肌源性神经营养因子的效果更好。提示 :大鼠肌源性神经营养因子能增强缺氧时脊髓运动神经元 Bcl-2的表达 ,抑制缺氧后运动神经元的死亡 。 展开更多
关键词 脊髓 运动神经元 缺氧 表达 肌源性神经营养因子 BCL-2 细胞培养 免疫组织化学 大鼠
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肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养大鼠脊髓运动神经元划伤后Bcl-2表达的影响
6
作者 鄂玲玲 周长满 +1 位作者 徐忠涛 王常利 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期101-104,T023,共5页
为检测大鼠肌源神经营养因子对体外培养大鼠脊髓运动神经元划痕损伤后 Bcl-2表达的影响 ,本实验从成鼠和乳鼠骨骼肌中提取出肌源神经营养因子。在胎鼠脊髓运动神经元培养第 7d时将其随机分成对照组和实验组 (成鼠组和乳鼠组 ) ,取 10 0... 为检测大鼠肌源神经营养因子对体外培养大鼠脊髓运动神经元划痕损伤后 Bcl-2表达的影响 ,本实验从成鼠和乳鼠骨骼肌中提取出肌源神经营养因子。在胎鼠脊髓运动神经元培养第 7d时将其随机分成对照组和实验组 (成鼠组和乳鼠组 ) ,取 10 0μl肌源神经营养因子 ( 0 .1μg/ ml)加入实验组 ,对照组加入等量的 PBS,同时进行划痕损伤。损伤后第 3d计数各组存活的运动神经元 ,行 Nissl染色和免疫组化反应 ,计数 Bcl-2免疫反应 ( Bcl-2 -IR)阳性神经元数量 ,并在图像分析仪上对 Bcl-2 -IR阳性神经元作光密度分析。结果发现 ,损伤后第 3d,实验组运动神经元存活数 ,Bcl-2 -IR阳性神经元数和平均光密度均明显高于同期对照组 ,而乳鼠肌源神经营养因子组功效优于成鼠肌源神经营养因子组。结果提示 ,大鼠肌源神经营养因子对体外培养的受损运动神经元具有增强 Bcl-2表达、减少凋亡和损伤修复等作用 。 展开更多
关键词 肌源神经营养因子 MDNF 体外培养 划伤 Bcl-2 细胞培养 脊髓运动神经元 神经损伤
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肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养的大鼠脊髓运动神经元缺氧时p53表达的影响
7
作者 鄂玲玲 周长满 徐忠涛 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期43-48,共6页
本研究目的是观察缺氧时肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养的大鼠脊髓运动神经元p53蛋白表达的影响。从成鼠和胎鼠骨骼肌中提取MDNF。在胎鼠脊髓运动神经元培养第7 d时将其分成对照组和实验组(包括成鼠MDNF组和胎鼠MDNF组),取100μl MDN... 本研究目的是观察缺氧时肌源神经营养因子(MDNF)对体外培养的大鼠脊髓运动神经元p53蛋白表达的影响。从成鼠和胎鼠骨骼肌中提取MDNF。在胎鼠脊髓运动神经元培养第7 d时将其分成对照组和实验组(包括成鼠MDNF组和胎鼠MDNF组),取100μl MDNF(0.1μg/ml)加入培养大鼠脊髓运动神经元的培养液中,对照组加入等量的PBS。然后用液体石蜡封闭液面造成神经元缺氧损伤,缺氧3 d后,应用Nissl染色、原位末端标记、免疫组化方法,对损伤的大鼠脊髓运动神经元进行检测。结果表明:培养的大鼠脊髓运动神经元缺氧3 d后,经MDNF孵育可使脊髓运动神经元TUNEL、p53表达均较对照组明显减弱,神经元损伤程度减轻,神经元存活数明显高于对照组,且胎鼠MDNF的效果更好。提示:大鼠脊髓运动神经元缺氧后可出现神经细胞凋亡,但胎鼠MDNF较成鼠MDNF更能减弱缺氧时脊髓运动神经元p53的表达,抑制缺氧后神经元的死亡。 展开更多
关键词 肌源神经营养因子 P53 细胞培养 细胞凋亡 免疫组织化学 大鼠 蛋白 表达
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巢蛋白在体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞发育过程中的表达——免疫细胞化学研究
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作者 周长满 徐忠涛 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期65-68,共4页
为了观察巢蛋白 (nestin)在骨骼肌卫星细胞发育过程中的分布状况以进一步探讨 nestin在肌细胞发育中的作用 ,本实验对新生 Wistar大鼠股部骨骼肌传代培养后 ,在不同发育期进行 nestin单克隆抗体的 ABC免疫组织化学反应 ,并以抗 actin,de... 为了观察巢蛋白 (nestin)在骨骼肌卫星细胞发育过程中的分布状况以进一步探讨 nestin在肌细胞发育中的作用 ,本实验对新生 Wistar大鼠股部骨骼肌传代培养后 ,在不同发育期进行 nestin单克隆抗体的 ABC免疫组织化学反应 ,并以抗 actin,desmin单克隆抗体作同期对照 ;计算阳性肌卫星细胞数量并进行统计学分析。结果发现 :actin,desmin,nestin三组间在同一培养时间点上的阳性肌卫星细胞数量无差异 (P>0 .0 5 ) ,但在时间点之间的比较上 ,4h组较 2 h组的阳性肌卫星细胞数量有所增加 (P<0 .0 5 ) ,其余各时间组的阳性肌卫星细胞数量则显著高于 2 h组、4h组 (P<0 .0 1)。提示 展开更多
关键词 巢蛋白 体外培养 大鼠 骨骼肌 卫星细胞 发育 免疫细胞化学 NESTIN 神经元中间丝蛋白
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黑质与纹状体毁损所致大鼠帕金森氏病模型的行为学比较 被引量:6
9
作者 陈学东 蒋立新 +2 位作者 周长满 刘大庸 钟世镇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期281-284,共4页
用QL1 智能实验动物旋转监察仪对纹状体毁损法、黑质毁损法二种方法制备的帕金森氏病大鼠模型的行为学进行了对比研究。通过对两种模型鼠的阿普吗啡诱导的旋转分析表明:黑质内注射6羟基多巴后1 周,阿普吗啡诱导的旋转行为即... 用QL1 智能实验动物旋转监察仪对纹状体毁损法、黑质毁损法二种方法制备的帕金森氏病大鼠模型的行为学进行了对比研究。通过对两种模型鼠的阿普吗啡诱导的旋转分析表明:黑质内注射6羟基多巴后1 周,阿普吗啡诱导的旋转行为即处于较高水平,即9.0 转/m in, 并基本保持在此水平;纹状体内注射6羟基多巴后,术后1 周动物基本没有旋转,至术后第2 周才开始出现明显的旋转,随后缓慢上升,至术后4 周才升至较高的水平并保持平稳。旋转测试的适当时间应为阿普吗啡给药后40m in。 展开更多
关键词 6羟基多巴胺 动物模型 行为学 帕金森病
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GDNFR-α在成年大鼠脊髓和背根节的分布的免疫组织化学研究 被引量:2
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作者 虞东辉 苏剑斌 +2 位作者 白秉学 鄂玲玲 周长满 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期140-142,共3页
为了探讨胶质细胞源性神经营养因子对脊髓运动神经元和感觉神经元的作用 ,本实验采用抗胶质细胞源性神经营养因子受体 -α多克隆抗体免疫组织化学方法 ,观察了胶质细胞源性神经营养因子受体 -α在成年大鼠腰段脊髓和背根节的分布。结果... 为了探讨胶质细胞源性神经营养因子对脊髓运动神经元和感觉神经元的作用 ,本实验采用抗胶质细胞源性神经营养因子受体 -α多克隆抗体免疫组织化学方法 ,观察了胶质细胞源性神经营养因子受体 -α在成年大鼠腰段脊髓和背根节的分布。结果发现 :胶质细胞源性神经营养因子受体 -α免疫反应出现于成年大鼠腰段脊髓神经元和背根节神经元中。提示 :胶质细胞源性神经营养因子受体 -α可能对脊髓运动神经元。 展开更多
关键词 GDNFR-α 脊髓 背根节 免疫组织化学 分布
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GDNF及dvHSV-GDNF对坐骨神经损伤大鼠脊髓前角运动神经元的影响
11
作者 冯士生 苏剑斌 +4 位作者 鄂玲玲 虞东辉 徐忠涛 白秉学 周长满 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期71-74,W017,共5页
为了探讨胶质细胞源性神经营养因子及单纯疱疹病毒载体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (dv HSV-GDNF)对坐骨神经损伤大鼠脊髓前角运动神经元的作用 ,本实验对成年大鼠造成双侧坐骨神经损伤后 ,于右侧损伤处分别施加胶质细胞源性神经营... 为了探讨胶质细胞源性神经营养因子及单纯疱疹病毒载体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (dv HSV-GDNF)对坐骨神经损伤大鼠脊髓前角运动神经元的作用 ,本实验对成年大鼠造成双侧坐骨神经损伤后 ,于右侧损伤处分别施加胶质细胞源性神经营养因子和 dv HSV-GDNF;左侧损伤处施加生理盐水作为对照。分别取损伤后 4、7、14和 2 8d大鼠的脊髓 L4 ~ L6 节段 ,经石蜡包埋切片后行 Nissl染色 ,计数前角运动神经元数量并进行统计学分析。结果发现 :坐骨神经损伤后 4、7、14和 2 8d,右侧脊髓前角运动神经元的数量明显高于左侧。提示 :胶质细胞源性神经营养因子和 dv 展开更多
关键词 GDNF dvHSV-GDNF 胶质细胞源性神经营养因子 单纯疱疹病毒载体 脊髓前角运动神经元 坐骨神经损伤 大鼠
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