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HIV-1结构基因与白细胞介素基因在重组痘苗病毒中的共表达研究被引量：1: 1; 作者王玉红金宁一 +6 位作者李体远王宏伟王弘郡刘素寰李萍安汝国殷震《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期30-30,共1页; 关键词 HIV 结构基因白细胞介素重组痘苗病毒表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1 p24 gag 与hIL-2基因在重组痘苗病毒中的共表达研究被引量：1: 2; 作者王玉红金宁一 +6 位作者李体远王洪军王弘郡刘素寰李萍安汝国殷震《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第4期366-368,共3页; 目的：研究ＨＩＶ１ｐ２４ｇａｇ与ｈＩＬ２基因在重组痘苗病毒中的共表达。方法：以痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将编码人白细胞介素２（ｈＩＬ２）的基因片段克隆到真核表达质粒ｐ１６ＱＦ... 展开更多; 关键词 HIV-Ip24gag HIL-2 痘苗病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

分离型痘苗病毒表达载体的构建及HIV-1 gag p17-24的表达被引量：1: 3; 作者金宁一王宏伟 +4 位作者殷震李体远王玉红罗坤安汝国《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第1期8-11,共4页; 目的:探索荧光蛋白作为报告基因以及His·Tag作为纯化标签在重组痘苗病毒表达系统中的应用.方法:将N-端融合His·Tag基因序列,插入痘苗病毒表达载体pSFJ2-16,并在其多克隆位点下游装入带有巨细胞病毒(CMV)启动子的突变型荧光蛋... 展开更多; 关键词痘苗病毒荧光蛋白 HIV-1 p17-24 载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白: 4; 作者郭军庆金宁一 +3 位作者毛春生郭志儒尹凤阁殷震《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期13-16,共4页; 为深入研究人Ⅰ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ—１）衣壳蛋白ｐ２４的结构与功能，制备抗Ｐ２４单克隆抗体及其诊断抗原，将编码ＨＩＶ－１ｐ２４蛋白的ｐ２４ｇａｇ基因片段，克隆到原核表达载体ｐＥＴ－１７ｂ的Ｔ７噬菌体启动子下游，构建... 展开更多; 关键词 p24蛋白大肠杆菌 HIV-1 艾滋病; 在线阅读下载PDF 职称材料

在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白被引量：1: 5; 作者郭军庆金宁一 +3 位作者毛春生郭志儒尹凤阁殷震《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第6期11-15,共5页; 目的表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV—1）衣壳蛋白p24，为制备抗p24单克隆抗体及其诊断杭原奠定基础。方法将编码HIV—1p24蛋白的P24(gag)基因片段，克隆到原核表达载体PET—17b的T7噬菌体启动子下游，构建重组表达质粒;转化大肠杆菌BL2（... 展开更多; 关键词艾滋病大肠杆菌 HIV-1 P24基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗HIV核心蛋白p24单克隆抗体的研制及鉴定被引量：4: 6; 作者王宏伟金宁一 +5 位作者刘仔郭军庆郭志儒毛春生李萍殷震《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期63-64,共2页; 抗ＨＩＶ核心蛋白ｐ２４单克隆抗体的研制及鉴定王宏伟金宁一刘仔郭军庆郭志儒毛春生李萍殷震（解放军农牧大学研究所病毒室，长春１３００６２）人Ｉ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ１）是导致人获得性免疫缺陷综合征（ＡＩＤＳ）的主要病原... 展开更多; 关键词抗HIV 核心蛋白P24 单克隆抗体研制鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1核心蛋白的表达与纯化: 7; 作者金宁一李体远 +5 位作者刘晓明王玉红王宏伟郭志儒安汝国殷震《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第1期28-31,共4页; 将编码人I型免疫缺陷病毒(HIV1)核心蛋白p24gag的基因序列克隆到原核表达载体pET28(b)中,高效表达了N,C端融合His·Tagp24蛋白,所表达的重组p24蛋白占菌体总蛋白的46%。在变性条件下,使用NiNTA亲和层析法纯化了p24蛋白,纯度为94%。... 展开更多; 关键词大肠杆菌纯化基因表达 HZV-1 核心蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1结构基因与白细胞介素基因在重组痘苗病毒中的共表达研究被引量：1: 1; 作者王玉红金宁一李体远王宏伟王弘郡刘素寰李萍安汝国殷震; 机构白求恩医科大学细胞生物教研室解放军农牧大学研究所病毒室; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期30-30,共1页; 基金国家杰出青年基金!39825119 自然科学基金!39770661; 关键词 HIV 结构基因白细胞介素重组痘苗病毒表达; 分类号 R512.910.1 [医药卫生—内科学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1 p24 gag 与hIL-2基因在重组痘苗病毒中的共表达研究被引量：1: 2; 作者王玉红金宁一李体远王洪军王弘郡刘素寰李萍安汝国殷震; 机构白求恩医大基础医学院细胞生物教研室解放军农牧大学研究所病毒室; 出处《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第4期366-368,共3页; 基金中国杰出青年基金国家自然科学基金; 文摘目的：研究ＨＩＶ１ｐ２４ｇａｇ与ｈＩＬ２基因在重组痘苗病毒中的共表达。方法：以痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将编码人白细胞介素２（ｈＩＬ２）的基因片段克隆到真核表达质粒ｐ１６ＱＦ２４ ＩＬ２，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选，获得了重组痘苗病毒ｖ１６ＱＦ２４ ＩＬ２。结果：经间接免疫荧光试验、Ｄｏｔ ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｏｌｔ等检测证明，重组病毒能同时表达ｐ２４ｇａｇ蛋白和ＩＬ２蛋白，表达产物分子量分别为２４０００、１６０００。结论：这种重组痘苗病毒人表达外源蛋白的成功，为获得更强的免疫效果，研制ＨＩＶ重组病毒活疫苗提供一种安全的新途径。; 关键词 HIV-Ip24gag HIL-2 痘苗病毒; Keywords HIV Ip24 gag hIL 2 vaccinia; 分类号 R392.2 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名分离型痘苗病毒表达载体的构建及HIV-1 gag p17-24的表达被引量：1: 3; 作者金宁一王宏伟殷震李体远王玉红罗坤安汝国; 机构解放军农牧大学研究所病毒室深圳市人民医院中心实验室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第1期8-11,共4页; 基金总后卫生部杰出中青年基金和国家自然科学基金(39770661)资助; 文摘目的:探索荧光蛋白作为报告基因以及His·Tag作为纯化标签在重组痘苗病毒表达系统中的应用.方法:将N-端融合His·Tag基因序列,插入痘苗病毒表达载体pSFJ2-16,并在其多克隆位点下游装入带有巨细胞病毒(CMV)启动子的突变型荧光蛋白基因(GFP),构建成N-端融合His·Tag并带有荧光蛋白报告基因的分离型痘苗病毒表达载体.再从pET-28中切出C-端融合His·Tag及多克隆位点序列,并与CMV-FP基因一同装入pSFJ2-16,构建成C-端融合His·Tag的分离型痘苗病毒表达载体.将人免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)核心蛋白(gag)p17-24基因分别插入上述载体,并筛选出重组病毒.结果:实验表明,重组病毒表达了gag蛋白.结论:将His-Tag的纯化标签加入到通用型痘苗病毒表达载体中用于纯化表达的目的蛋白,该方法是可行的.荧光蛋白基因作为一个筛选标记基因应用于痘苗病毒载体系统还有待进行进一步研究.; 关键词痘苗病毒荧光蛋白 HIV-1 p17-24 载体构建; Keywords vaccinia virus His'Tag fluorescence protein HFV-1 gag; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学] R512.91 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白: 4; 作者郭军庆金宁一毛春生郭志儒尹凤阁殷震; 机构解放军农牧大学研究所病毒室河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南农业大学牧医工程学院; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期13-16,共4页; 基金国家自然科学基金国家杰出青年基金; 文摘为深入研究人Ⅰ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ—１）衣壳蛋白ｐ２４的结构与功能，制备抗Ｐ２４单克隆抗体及其诊断抗原，将编码ＨＩＶ－１ｐ２４蛋白的ｐ２４ｇａｇ基因片段，克隆到原核表达载体ｐＥＴ－１７ｂ的Ｔ７噬菌体启动子下游，构建成了重组表达质粒ｐＥＴ２４，并使ｐ２４ｇａｇ基因片段在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中高效表达，其产物为３０ｋＤａ的ｓ１０－ｐ２４融合蛋白，表达量占菌体总蛋白的３８．４％。重组Ｐ２４蛋白均抗ｐ２４单克隆抗体及ＨＩＶ—１阳性血清发生特异性反应，具有较好的抗原性，对研究开发ＡＩＤＳ诊断试剂和基因工程疫苗具有重要意义。; 关键词 p24蛋白大肠杆菌 HIV-1 艾滋病; Keywords human immunodeficiency virus type 1p24expression E.coli; 分类号 R512.910.2 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白被引量：1: 5; 作者郭军庆金宁一毛春生郭志儒尹凤阁殷震; 机构河南省农业科学院畜牧兽医研究所解放军农牧大学研究所病毒室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第6期11-15,共5页; 文摘目的表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV—1）衣壳蛋白p24，为制备抗p24单克隆抗体及其诊断杭原奠定基础。方法将编码HIV—1p24蛋白的P24(gag)基因片段，克隆到原核表达载体PET—17b的T7噬菌体启动子下游，构建重组表达质粒;转化大肠杆菌BL2（DE3），IPTG诱导表达，表达产物以SDS-PAGE、Westernblotting及点免疫印迹分析。结果构建成功重组表达质粒pET24，经IPG诱导，p24(gag)基因片段在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达，产物为30kDa的810—p24融合蛋白，表达量占菌体总蛋白的38.4％;重组p24蛋白均与抗p24单克隆抗体及HIV—1阳性血清发生特异性反应。结论重组P24蛋白具有较好的免疫活性，是制备抗P24单克隆抗体及诊断试剂的理想抗原。; 关键词艾滋病大肠杆菌 HIV-1 P24基因; Keywords Human immunodeficiency virus type 1 p24 expression E. coli; 分类号 R378.21 [医药卫生—病原生物学] R512.910.2 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗HIV核心蛋白p24单克隆抗体的研制及鉴定被引量：4: 6; 作者王宏伟金宁一刘仔郭军庆郭志儒毛春生李萍殷震; 机构解放军农牧大学研究所病毒室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期63-64,共2页; 文摘抗ＨＩＶ核心蛋白ｐ２４单克隆抗体的研制及鉴定王宏伟金宁一刘仔郭军庆郭志儒毛春生李萍殷震（解放军农牧大学研究所病毒室，长春１３００６２）人Ｉ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ１）是导致人获得性免疫缺陷综合征（ＡＩＤＳ）的主要病原［１］。对ＨＩＶ１感染的诊断，常...; 关键词抗HIV 核心蛋白P24 单克隆抗体研制鉴定; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1核心蛋白的表达与纯化: 7; 作者金宁一李体远刘晓明王玉红王宏伟郭志儒安汝国殷震; 机构解放军农牧大学研究所病毒室白求恩医科大学; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第1期28-31,共4页; 基金国家自然科学基金!( 3 9770 6 6 1) 杰出青年基金!( 3 982 5 119)资助项目; 文摘将编码人I型免疫缺陷病毒(HIV1)核心蛋白p24gag的基因序列克隆到原核表达载体pET28(b)中,高效表达了N,C端融合His·Tagp24蛋白,所表达的重组p24蛋白占菌体总蛋白的46%。在变性条件下,使用NiNTA亲和层析法纯化了p24蛋白,纯度为94%。菌体中及纯化、复性后的目的蛋白均能与抗HIV1p24单克隆抗体发生特异性反应。用纯化的p24蛋白免疫小鼠,4周时小鼠血清抗p24抗体效价达1∶400。实验结果表明:大肠杆菌表达的HIV1p24蛋白纯化后可用作HIV1检测试剂的原料。; 关键词大肠杆菌纯化基因表达 HZV-1 核心蛋白; Keywords HIV 1 gag p24, E.coli, Expression, Isolation; 分类号 Q939.91 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	HIV-1结构基因与白细胞介素基因在重组痘苗病毒中的共表达研究	王玉红金宁一李体远王宏伟王弘郡刘素寰李萍安汝国殷震	《微生物学杂志》 CAS CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HIV-1 p24 gag 与hIL-2基因在重组痘苗病毒中的共表达研究	王玉红金宁一李体远王洪军王弘郡刘素寰李萍安汝国殷震	《白求恩医科大学学报》 CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	分离型痘苗病毒表达载体的构建及HIV-1 gag p17-24的表达	金宁一王宏伟殷震李体远王玉红罗坤安汝国	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白	郭军庆金宁一毛春生郭志儒尹凤阁殷震	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白	郭军庆金宁一毛春生郭志儒尹凤阁殷震	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	1998	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗HIV核心蛋白p24单克隆抗体的研制及鉴定	王宏伟金宁一刘仔郭军庆郭志儒毛春生李萍殷震	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	1998	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	HIV-1核心蛋白的表达与纯化	金宁一李体远刘晓明王玉红王宏伟郭志儒安汝国殷震	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料